前    言

 

 

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、中國農(nóng)科院植物保護(hù)研究所、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張大兵、彭于發(fā)、李寧、羅云波、黃昆侖、汪其懷、楊立桃。

 

轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品檢測  抽樣

 

1.范圍

 

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因植物及產(chǎn)品檢測的抽樣方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品(大豆種子、大豆、大豆粉、豆油、玉米種子、玉米、玉米油、玉米粉、油菜種子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕、棉花種子、番茄種子、鮮番茄、番茄醬等)檢測樣品的抽取。

 

2.規(guī)范性引用文件

 

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

GB 5491            糧食、油料檢驗 扦樣、分樣法

GB 8855            新鮮水果和蔬菜的取樣方法及內(nèi)含物的測定

GB 10360           油料餅粕扦樣法

 

3.術(shù)語

 

3.1 批 lot

具備下列條件的，為一批：

1）同一合同、同一批次、同貨位或同車船（艙）等級的貨物；

2）經(jīng)過充分混合，使組成批的成分均勻一致地隨機(jī)分布；

3）不超過規(guī)定的數(shù)量，大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子為25 t; 油菜種子、油菜籽和番茄種子為10 t; 大豆粉、玉米粉、番茄醬為10 t。

3.2  初次樣品 primary sample

從一批的一個抽樣點(diǎn)上所抽取的一小部分樣品。

3.3  混合樣品 composite sample

     由一批內(nèi)抽取的全部初次樣品混合而成。

3.4  送驗樣品 submitted sample

     送到檢驗機(jī)構(gòu)檢驗、規(guī)定數(shù)量的樣品。

 

4 總則

 

4.1 取樣應(yīng)由貿(mào)易雙方協(xié)商一致后進(jìn)行，或者由政府的檢測機(jī)構(gòu)派出的人員進(jìn)行。

4.2 在取樣之前應(yīng)對被檢貨物進(jìn)行確認(rèn)。

4.3 應(yīng)該保證取樣工具和容器潔凈、干燥、無DNA和蛋白質(zhì)污染。取樣過程中不應(yīng)該受雨水、灰塵等環(huán)境污染。

4.4 對采集的樣品，應(yīng)該充分地代表被檢測的該批貨物的全部特征。從樣品中剔除損壞的部分（箱、袋、瓶等），損壞和未損壞的樣品應(yīng)分別采集。

4.5 抽樣完成后，要立即填寫抽樣報告。

 

5  抽樣工具及設(shè)備

 

5.1  抽樣器

5.1.1  適合大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉等產(chǎn)品的抽樣器。

5.1.1.1  單管抽樣器：適用于包裝貨物的抽樣。

a)  全長(60～75)cm，槽口長(50～55)cm，槽口寬(1.0～1.8)cm，最大外徑約2.5cm。適用于大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子抽樣。

b)  全長50cm，槽口長40cm，槽口寬(0.8～1.5)cm，外徑(1.6～2.0)cm，尖端部分約4cm，為實(shí)心圓錐體。適用于油菜種子、油菜籽和番茄種子抽樣。

c)  全長55cm，槽口長約35cm，槽口寬(0.6～0.7)cm，最大外徑約1cm，頭尖形。適用于大豆粉、玉米粉等貨物抽樣。

5.1.1.2  雙套管抽樣器和槽形承受器：適用于散裝貨物的抽樣。

全長110cm，外管外徑2.6cm，內(nèi)管內(nèi)徑2.0cm，手柄長15cm，尖端部分錐體長6.5cm，開有四個流樣口，每個開口為20cm×1.8cm。

槽形承受器用鐵皮或鋁皮制，長100cm，呈半圓柱形，開口寬10cm。或者使用足夠長度的帆布收集樣品。

5.1.1.3  取樣鏟：主要用于流動的大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉等貨物的取樣或倒包取樣。鏟長約13cm，寬約8cm，邊高約4cm，柄長約8cm。見附錄A的圖A1。

5.1.1.4  機(jī)械自動化抽樣設(shè)備，主要包括：

a)  分流型機(jī)械抽樣器：如Gamet公司的6800L系列D/T型。

b)  旋轉(zhuǎn)式縮分器：如Gamet公司的4500系列旋轉(zhuǎn)縮分器。

c)  重力縮分器：如Gamet公司的5：1重力縮分器。

d)  轉(zhuǎn)盤式集樣器：如Gamet公司的24位集樣器。

5.1.2  適合豆油、玉米油、油菜籽油、番茄醬產(chǎn)品的抽樣器。

5.1.2.1  不銹鋼或鋁合金制成的底部抽樣器：適合于從罐（艙）裝油脂等液態(tài)樣品底部抽取樣品。見附錄A的圖A2。

5.1.2.2  瓶式抽樣器：適合從罐（艙）中抽取油脂等液態(tài)樣品。見附錄A的圖A3。

5.1.2.3  套管式抽樣器：適用于糊狀油脂、番茄醬等抽樣。見附錄A的圖A4。

5.1.2.4  抽樣探子：全長100cm，柄長7cm，槽深1.5cm，槽口寬1.5cm，橫柄長12cm，橫柄直徑1.5cm，由不銹鋼制成。適用于糊狀或軟固體油脂、番茄醬貨物抽樣。見附錄A的圖A5。

5.1.2.5  抽樣管：管長100cm，外徑2cm，下口0.5cm，上口0.8cm，由厚壁玻璃管或不銹鋼制成，適用于油脂等液體類貨物抽樣。見附錄A的圖A6。

5.2  樣品袋(筒)：采用牢固、衛(wèi)生、無DNA污染的材料制成的容器，可密閉。

5.3  分樣板。

5.4  分樣器：包括二分、三分、四分分樣器。

5.5  分樣布或合適的鋪墊物。

5.6  混樣桶：帶蓋的搪瓷或塑料桶。

5.7  樣品瓶：(500～30000)mL玻璃瓶或塑料瓶。

 

6  抽樣方法

 

6.1  散裝貨物的抽樣

6.1.1  散裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉等貨物的抽樣

6.1.1.1  確定抽樣點(diǎn)數(shù)和位置

根據(jù)散裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉的數(shù)量按照表1確定抽樣點(diǎn)數(shù)。抽樣位置的確定按照GB 5491執(zhí)行。

表1 散裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、

油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉的抽樣點(diǎn)數(shù)規(guī)定

6.1.1.2  抽樣操作

    抽樣時應(yīng)隨機(jī)從各部位及深度抽取初次樣品，每個部位抽取的樣品數(shù)量應(yīng)大體相等。

a)  雙套管抽樣器：手持雙套管抽樣器，關(guān)閉流樣口，保持流樣口向上，用力將抽樣器與貨物表面垂直的方向插入，旋轉(zhuǎn)抽樣器手柄約180°，打開流樣口，緊握探管上下轉(zhuǎn)動幾次，然后回旋手柄關(guān)閉流樣口，從貨層中拔出抽樣器，旋開流樣口，將抽取的樣品無損失地倒入槽形承受器中。然后，再關(guān)閉流樣口，繼續(xù)抽取第二、第三和其他抽樣點(diǎn)的樣品。

b)  抽樣鏟：從各個抽樣點(diǎn)貨物表面10 cm以下鏟取一定數(shù)量的樣品，將抽取的樣品無損失地倒入承受器內(nèi)，繼續(xù)抽取第二、第三和其他抽樣點(diǎn)的樣品。

c)  機(jī)械自動化抽樣設(shè)備：按照機(jī)械化抽樣設(shè)備的操作規(guī)程實(shí)施抽樣。

6.1.2  散裝豆油、玉米油、油菜籽油等貨物的抽樣

6.1.2.1  確定抽樣點(diǎn)

散裝油以一個油池、一個油罐、一個車槽為一個檢測單位。不同形狀油容器的抽樣部位和抽樣點(diǎn)比例按表2規(guī)定的部位、數(shù)量進(jìn)行抽樣。

 

 

 

 

 

表2散裝油脂抽樣部位和抽樣點(diǎn)規(guī)定

容器形狀	上層 (油層下面20 cm處)	中層 (油層中部)	下層 (距油底或油水界面20 cm處)
直立式容器	1	3	1
倒梯形容器	2	2	1
圓底容器	3	6	1
臥式油槽車或油池	1	8	1

6.1.2.2  抽樣操作

散裝油脂按一個檢測單位逐個抽取樣品，每個原始樣品不少于1500 mL。

抽樣時，先將底部抽樣器放至散裝油容器的底部，抽取底部樣品，檢查底部有無明水和雜質(zhì)(若有明水和雜質(zhì)，應(yīng)確定其深度，并將抽取的樣品存放于專用的容器中)，然后根據(jù)散裝油容器的形狀，按照6.1.2.1確定的抽樣部位和比例抽取樣品，注入混樣桶中。

具體操作如下：

a)  底部抽樣器：使用時，將活塞關(guān)閉，以系于A、B環(huán)上的金屬鏈緩緩沉入油中至抽樣部位，拉動C環(huán)，活塞打開，油即可注入。待充滿后，放下C環(huán)，活塞關(guān)閉。以A、B環(huán)的金屬鏈緩緩向上提拉抽樣器。拉動C環(huán)，將樣品放入盛樣桶。

b)  瓶式抽樣器：用時可任意將其放入油中的不同深度，急速提動，移開塞子或蓋，油即充滿容器。

6.2  件裝貨物的抽樣

6.2.1  件裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉等貨物的抽樣

6.2.1.1  確定抽樣件數(shù)和抽樣部位

a)  確定抽樣件數(shù)

按表3確定件裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉的抽樣數(shù)。

  

 

表3 件裝大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、

油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉的抽樣數(shù)的規(guī)定

b)確定抽樣部位

實(shí)施倉庫內(nèi)抽樣時，按照GB 54951確定抽樣位置，按批抽樣，每批樣品抽樣點(diǎn)不少于5個。

實(shí)施裝卸時抽樣，根據(jù)裝卸貨速度和批數(shù)量隨機(jī)抽取。

6.2.1.2  抽樣操作

按6.2.1.1  確定的抽樣件數(shù)和抽樣部位，使用單管抽樣器或抽樣鏟等工具抽取樣品，直至完成一個原始樣品的抽樣工作。

具體操作如下：

a)  單管抽樣器：手握抽樣器把柄，流樣口朝下，從袋中或袋一角斜向插入袋內(nèi)，旋轉(zhuǎn)抽樣器約180°使流樣口朝上，稍停片刻，使貨物流入抽樣器探管內(nèi)，保持流樣口朝上的方向拔出抽樣器，從手柄端將樣品倒入樣品袋中，如上操作抽取各應(yīng)抽包件直至應(yīng)抽取的總件數(shù)，每件抽取的單株樣品數(shù)量應(yīng)基本一致，各單株樣品混合后組成原始樣品。

使用單管抽樣器抽樣時，應(yīng)從抽樣包件中隨機(jī)抽取5%，進(jìn)行倒包。若發(fā)現(xiàn)包間差明顯或其他異常情況，應(yīng)增加倒包件數(shù)，用抽樣鏟抽取樣品。

對于形狀不一、粒度較大、不適于用單管抽樣器抽樣的包裝的貨物，應(yīng)進(jìn)行拆包、倒包，倒包數(shù)應(yīng)不少于抽取總包數(shù)的20%，用抽樣鏟抽取樣品。

b)  抽樣鏟

倒包抽樣：將貨物置于潔凈的、無其它貨物污染的帆布或水泥臺上，拆去包口縫線，緩慢地放倒，雙手緊握袋底兩角，提起約50 cm高，拖倒約1.5 m長，全部倒出后，從相當(dāng)于袋的中部和底部用抽樣鏟抽取樣品，每包、每點(diǎn)抽樣數(shù)量應(yīng)一致。

拆包抽樣：將袋口縫線拆開若干針，用抽樣鏟從上部取出所需樣品，每包抽樣數(shù)量應(yīng)一致。

6.2.2  件裝豆油、玉米油、油菜籽油、番茄醬的抽樣

6.2.2.1  抽樣比例

抽樣件數(shù)的確定按照表3的規(guī)定，每件產(chǎn)品的抽樣數(shù)量應(yīng)基本一致，數(shù)量控制在100 g（mL）以上，每批抽樣數(shù)量應(yīng)不少于1500g(mL)。

6.2.2.2  件裝液體油脂的抽樣

先將抽樣管用拇指堵住上口插入油桶底部，檢查底部有無明水雜質(zhì)，然后將桶中的油脂充分混合均勻，將抽樣管斜插入桶底，堵住上口，緩緩取出，將樣品注入混樣桶中。

6.2.2.3  件裝糊狀油脂、番茄醬的抽樣

先將套管式抽樣器關(guān)閉，斜插入桶底，開啟抽樣器，使其轉(zhuǎn)動，待樣品充滿后轉(zhuǎn)動內(nèi)管，將抽樣器關(guān)閉，緩緩取出，將樣品刮入混樣桶中。

若糊狀油脂等樣品較粘稠，亦可用抽樣探子進(jìn)行抽樣。

6.2.2.4  件裝固體油脂的抽樣

軟固體油脂，可用抽樣探子進(jìn)行抽樣。硬固體油脂，可適當(dāng)加熱，使其熔化后，再抽取樣品。

6.3  油菜籽粕抽樣按照GB 10360執(zhí)行。

6.4  鮮番茄抽樣按照GB 8855執(zhí)行。

 

7 分樣方法

 

將抽取的大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、棉花種子、油菜種子、油菜籽和番茄種子、大豆粉、玉米粉初次樣品均勻混合，混合樣品按照GB 5491中四分法制備成送檢樣品。抽取的豆油、玉米油、油菜籽油、番茄醬等初次樣品按照質(zhì)量等比例充分混合后，從中取出送檢樣品。抽取的油菜籽粕送檢樣品的制備按照GB 10360執(zhí)行。抽取的鮮番茄樣品縮減制備混合樣品應(yīng)該用從每個抽取的鮮番茄上切取一定量的番茄，均勻混合，制備成送檢樣品。

 

8 送檢樣品的最小量

 

一般情況下，按照表4確定送檢樣品的最小量。特殊情況下，可適當(dāng)增減。

表4   送檢樣品的最小量

 

9  送驗樣品的盛裝和抽樣報告

 

送驗樣品盛裝的容器必須清洗干凈，不能有DNA的污染；送驗樣品必須包裝好，以防在運(yùn)輸過程中損壞和擴(kuò)散。送驗樣品必須由抽樣員(檢驗員)盡快送到檢驗機(jī)構(gòu)，每個送驗樣品須有記號(這記號最好能把批與樣品聯(lián)系起來)，并附有抽樣報告。抽樣報告應(yīng)包括以下項目：

a)  產(chǎn)品名稱、種類、品種、質(zhì)量等級；

b)  能夠辨認(rèn)該批貨物的樣品標(biāo)記（包裝種類、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是否標(biāo)識等）；

c)  運(yùn)輸和貯存條件（清潔、有無異味、運(yùn)輸方式、物理條件、防雨性能等）；貨物清潔程度、外觀情況、是否受潮、殘損；

d)  貨物所屬單位或個人；

e)  要求取樣日期、時間；取樣日期、時間；

f)  取樣時氣候條件（溫度等）；

g)  取樣目的；

h)  抽樣方法、工具；

i)  抽樣樣品數(shù)量及說明；

j)  實(shí)驗室樣品編號；

k)  取樣人姓名及樣品所屬單位蓋章或證明人簽名；

l)  其它。

 

10  送驗樣品保存

 

送驗樣品必須由抽樣員（檢測人員）盡快送到檢測機(jī)構(gòu)，在送驗樣品的運(yùn)輸過程中，應(yīng)該保證不能破壞樣品中DNA和蛋白質(zhì)，不能影響轉(zhuǎn)基因成分的檢測。

送驗樣品驗收合格并按規(guī)定要求登記后，應(yīng)將樣品分為三份，一份作檢測，一份作復(fù)檢，一份作備查。送檢樣品保留3個月。樣品的保存須按樣品質(zhì)量分類保存，使質(zhì)量的變化降到最低限度。鮮番茄、番茄醬等含水量大的樣品短期內(nèi)（90天）可保存在-20℃；對于有些因特殊需要需長期保存的樣品，建議保存在-80℃，以保證DNA和蛋白質(zhì)分子的完整性，不影響其中轉(zhuǎn)基因成分的檢測。液體樣品解凍后，建議用適當(dāng)?shù)奶幚恚�以保證檢測樣品的均勻度，并立即進(jìn)行樣本檢測。大豆種子、大豆、玉米種子、玉米、油菜種子、油菜籽、棉花種子、番茄種子、大豆粉、玉米粉、油菜籽粕等干燥樣品和大豆油、玉米油、油菜籽油樣品可以在4℃、干燥、密封保存。

 

附  錄 A

（規(guī)范性附錄）

抽樣工具

 

A1  抽樣鏟

 

 

圖A2  底部抽樣器

 

 

 

 

 

圖A3  瓶式抽樣器

 

 

圖A4  套管式抽樣器

 

 

圖A5  抽樣探子

 

 

 

         抽樣管管長100cm，外徑2cm，下口0.5cm，上口0.8cm

圖A6  抽樣管