高通量細胞計數儀的基本原理是將待檢樣品通過流式系統連續傳送到光學檢測區域,采用一定的探測器對細胞進行激發并測量細胞在不同光學參數下的特性。
具體步驟如下:
具體步驟如下:
1.激發光源:使用激光或LED等光源產生單一或多種波長的光。這些光將通過光束整形系統,使其獲得理想的光束形狀。
2.樣品注射:樣品通常被稀釋并加入試劑,以保證細胞在流動時不會黏連在一起。樣品通過注射器被注入到裝有緩沖液的注射器中,并通過壓力控制一定的流速。
3.水平排列:通過加速流體以及流體的層流自動調整,使細胞在流動時保持單個、水平排列的狀態,方便激發光的入射和測量。
4.激發和測量:選擇特定的濾光片、光柵和透鏡組合來引導激發光通過細胞,并測量光的散射、發射、吸收等特性。激發光在細胞表面相互作用并發生散射或激發產生熒光。根據光的強度、散射角度、發射光的波長等參數,可以推斷細胞的大小、形狀、顏色等信息。
5.數據處理:收集到的數據將被發送到計算機進行處理。計算機根據設定的閾值和標準,對細胞進行計數、分類和分析。各種特征數據可以通過軟件進行可視化顯示和輸出。
高通量細胞計數儀的應用:
1.細胞培養過程中,監測細胞的生長情況和濃度變化。
2.通過細胞計數,可以估算細胞的增殖速度、存活率以及死亡率等。
3.評估藥物對細胞的影響,如細胞毒性測試、細胞增殖抑制實驗等。
4.臨床樣本的細胞計數和鑒定,如血液檢測、尿液分析等。
5.評估病菌或微生物的濃度,以判斷生物實驗室環境的安全狀況。
6.也可以用于測量植物細胞的數量以及相關參數,如細胞體積等。
總的來說,高通量細胞計數儀在生命科學的研究和實驗中有著廣泛的應用,可以快速、準確地計數大量細胞,并為研究提供可靠的數據基礎。