膠原蛋白作為一種功能與結構兼具的蛋白質,在醫藥、化妝品及生物材料領域有著廣泛的應用。隨著膠原蛋白需求的快速增長,重組膠原蛋白的技術日趨成熟,逐漸成為主流的生產方式。本文將根據天然與重組膠原蛋白的特點,分別介紹其純化工藝并分享相關案例。
膠原蛋白的概述及分類
膠原蛋白是一種在皮膚、骨骼及肌腱中廣泛存在的結構蛋白,其基本單位由三條多肽鏈組成,形成穩定的三股螺旋結構。這種結構使得膠原蛋白在組織修復、組織工程及美容保健等領域發揮著重要作用。
一、天然膠原蛋白
天然膠原蛋白主要通過物理、化學或酶解等方法從動物組織(如皮膚、骨骼)中提取。常見的純化方式包括:
• 酸堿水解法:將動物組織(如皮膚、骨骼等)清潔和切片、粉碎后,通過酸解/堿解作用將膠原蛋白從中溶解,再進行中和、過濾、濃縮換液等步驟得到膠原蛋白。
• 酶解法:將動物組織(如皮膚、骨骼等)清潔和切片、粉碎后,用特定蛋白酶進行酶解,再通過離心、過濾、濃縮換液等步驟分離出膠原蛋白。
然而,隨著質量標準的提高,通過傳統方法天然提取的膠原蛋白面臨著雜質(如內毒素)的控制難題,這為后續的純化工藝提出了更高的要求。博格隆的陰離子交換層析介質可用于純化,以生產更高純度的膠原蛋白。
二、重組膠原蛋白
重組膠原蛋白是通過基因工程技術生產的膠原蛋白,避免了動物源膠原蛋白的質量波動和安全隱患。
重組膠原蛋白的生產體系主要包括大腸桿菌、酵母等表達系統,具有產率高、成本低、周期短等優勢。其工藝路線包括發酵表達、鹽析、固液分離、澄清、親和層析、離子交換和多模式層析等純化步驟。