做為「定量擔當」,移液器是實驗過程中必不可少的神器,而這小小的移液器,也給大家帶來了大大的困擾:
師妹想不通,剛剛校準過的移液器,為什么配制溶液的時候有誤差呢?
老板也是百思不得其解,買了那么多高端移液器,怎么總是有人用不好呢?
其實,好多問題都是移液器使用不當或保養不及時造成的:
吸液時拇指迅速放開,這樣會迫使液體形成湍流狀態,液體會直接沖到移液器內部,導致移液器失準。
日常除了移液器內部清潔,外部也很重要,可以用95%酒精或60% 的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干。
小小的移液器藏著大大的學問,正確使用,定期維護,合理管理,從此,師妹不再頭禿。那么這些移液器知識,你又了解多少?
1槍頭的裝配
如果你還使勁在槍頭盒子上敲幾下來套上槍頭,趕緊收手!這樣會導致槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節旋鈕卡住甚至會將槍彈射套筒折斷。
正確的做法應該是:將槍垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動1/4或1/2圈即可使其緊密結合。多道(如8道或12道)移液槍,可將移液槍的第一道對準第一個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略微超過O型環,并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
2量程的調節
從大體積到小體積,按照正常的調節方法,逆時針旋轉旋鈕即可;從小體積到大體積,則先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度(繼續旋轉活塞按鈕約1/3圈),再回調至設定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。
通常,移液器推薦在35-100%量程范圍內操作。
3潤洗
除了普通液體潤洗以外,在吸取有機溶劑或高揮發性液體時,揮發性氣體會在白套筒室內形成負壓,從而產生漏液的情況,這時就需要預洗4~6次,讓白套筒室內的氣體達到飽和,負壓就會自動消失。
注:高溫或者低溫(冰點以下)液體請不要潤洗!可以考慮活塞外置式移液器。
4移液
1)移液浸入的角度:保持垂直狀態,最多不能超過20°。傾斜吸液會造成氣壓面的改變,增大移液誤差。
2)吸頭浸入深度:(如下圖)正確的吸頭浸入深度可以有效的減少取液誤差。
3)吸液速度:勻速。
過快的吸液速度,容易使樣品形成漩渦,產生氣泡;樣品液易進入套柄,對活塞和密封圈造成損傷 ;帶入氣霧造成樣品的交叉污染;特別是1ml以上的液體,很容易造成液體上沖。吸完后最好能在液面內停留1-3秒。
4)排液及吹液:
排液:將活塞按壓至第一檔排液;
吹液:繼續下壓活塞按鈕,到達第二停止點或通過第二停止點直至底部。
5)移液器必須卸掉槍頭后才可以平放在實驗臺上,因為任何殘留的液體都會在平放時倒流回吸液桿。
5維護與保養
1)如果移液器每天都需要使用,則建議每三個月或半年清潔并校準一次。
2)如較長時間不使用,要把移液槍的量程調至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態以保護彈簧,不注意此點容易導致活塞無法回彈。
3)如液體不小心進入活塞室需及時清除污染物。
4)高溫消毒之前,要確保移液器能適應高溫,避免放在較高溫處變形,致漏液或不準。
5)在吸取過高揮發、高腐蝕液體后,應將整支移液器拆開,用蒸餾水沖洗活塞桿及白套筒內壁,并在晾干后安裝使用,以免揮發性氣體長時間吸附于活塞桿表面,對活塞桿產生腐蝕,損壞移液器。
6期間核查
大多數實驗室對移液器的核查周期為一年或半年。要知道,移液器受環境和操作所造成的系統誤差極其明顯,最終可能導致檢測結果的偏離;定期的期間核查,可使檢測儀器始終處于受控狀態,從而確保儀器的穩定,保證測量結果的可靠性。
移液器定期核查的必要性
移液器現已廣泛應用于食品藥品檢測分析方法中。但是,微小的誤差對取樣總量的影響非常大,合格可調移液器使用一段時間后,由于磨損、彈簧彈力變化等原因導致準確度和精密度下降,必須進行校準。據報道,新購置的移液器失準率為1.56%,使用1萬次以下的失準率為4%,1萬~5萬次失準率為8.82%,5萬~10萬次失準率為21.7%,10萬次以上失準率為47.6%。
在設備的兩次校準之間或儀器維修后投入使用前進行期間核查,驗證設備是否保持校準時的狀態,確保檢驗結果的準確性和有效性。
期間核查的內容步驟
移液器主要用于在實驗或生產中作液體的取樣或加液用。它利用空氣排放原理進行操作,以活塞在活塞套內移動的距離確定移液器的容量。移液器為量出式量器,分定量式移液器和可調移液器兩大類。其型式分為單頭型和多頭型。其結構由顯示窗、容量調節部件、活塞、活塞套、吸液管和吸液嘴等部分組成。
1.核查條件
檢測環境:移液器應在15℃~25℃室溫下檢驗,待檢的移液器和檢測用的超純水應與室溫一致。
檢測介質:超純水
檢測所需的設備:
檢測項目:外觀、密合性、容量。
移液器塑料件外殼表面應平整、光滑,不得有明顯的縮痕、廢邊、裂紋、氣泡和變形等現象,金屬件表面鍍層應無脫落、銹蝕和起層。
移液器主體應具有下列標記:產品名稱、制造廠或商標、標稱容量(μl或ml)、型號規格、出廠編號。
活塞:按動移液器活塞時,上、下移動應靈活,分檔界限明顯,按動活塞應不引起顯示窗數值的改變。
調節器:移液器的顯示窗在容量調節動作時,應轉動靈活,數字指示清晰、完整。
吸液嘴:吸液嘴在正常使用下內壁應不產生液滴,吸、放液體流暢。
2.檢測方法
1.外觀檢驗
目測被檢移液器,外觀應符合上文要求。
2.密合性檢驗
將移液器調至可標稱容量的最大值,選擇與吸引桿配套的吸液嘴。在移液器的吸引桿的下端,輕輕轉動吸液嘴,以保證移液器的密封性; 如果移液器使用200μl或1000μl吸液嘴,吸入液體,并將吸液嘴朝下懸垂20s,觀察是否有液體溢出吸液嘴,如果有則移液器密合性不符合要求。
如果移液器使用10μl吸液嘴,將吸液嘴插入液面下2-3mm處,觀察是否有液體進入吸液嘴,如果有則移液器密合性不符合要求。
3.容量檢驗
(1)選擇檢測點,定量移液器為定量的體積,可調移液器為可標稱容量的最大值、標稱容量最大值的一半、標稱容量的最小值;同時選擇與吸引桿配套的吸液嘴接上。
(2)打開電子天平至天平穩定。
(3)將移液器的容量調至被檢點,選擇與吸引桿配套的吸液嘴;在移液器的吸引桿的下端,輕輕轉動吸液嘴,以保證移液器的密封性;來回吸放超純水5次使吸液嘴預濕。
(4)選擇合適的容器作為稱量杯放在電子天平托盤上,復零。
注:檢測10μl以上的體積使用10ml塑料瓶,檢測10μl以下的體積使用1.5ml螺旋管,以減少稱量杯重量造成的誤差。
(5)垂直地握住移液器,將吸液嘴侵入裝有超純水的容器內,并保持在液面下2mm~3mm處,緩慢放松按鈕,等待1s~2s后離開液面并在容器壁上停靠一下,以去處多余的液體。
(6)從電子天平中取出稱量杯,將吸液嘴流液口靠在稱量杯內壁并與其成45度,緩慢地把按鈕撳到地一停點,等待1s~2s再將按鈕完全撳下,然后將吸液嘴沿著稱量杯的內壁向上移開。
(7)將稱量杯放在電子天平托盤上,記錄此時天平顯示出的質量,同時測量并記錄此時容器內蒸餾水的質量。
(8)重復五次執行(4)-(7)步驟,但如果發現測量值已經超出最大允許誤差則無需重復直接判為不合格。
4.數據處理
移液器在標準溫度20℃時的實際容量值。
5.核查結果的處理
(1)外觀、密合性不合格,移液器禁止使用,標定“不合格”,進行維修或報廢。(2)外觀、密合性合格,且所有使用量程的誤差小于最大允許誤差,標定“合格”。 表1 移液器最大允許誤差 移液器在標準溫度20℃時,其容量允許誤差和測量重復性應滿足下表要求:
(3)外觀、密合性合格但部分量程的誤差大于最大允許誤差,標定可用的量程。(4)如果移液器讀數滑位,或按動活塞引起數值改變,因進行標注。
6.核查周期
每六個月進行一次,時間在兩次外校之間完成。儀器維修或其他例外情況應及時進行。
正確的使用移液器可以促使實驗結果更為精確,減少實驗誤差,同時也能延長移液器的使用壽命。