移液器是一種在一定容量范圍內可隨意調節的精密取液裝置,是日常實驗中非常常見的儀器之一,產品具有性能穩定、使用靈活、可靠性高、維護簡便等優點。其主要部件如圖1所示大同小異。正確使用移液器不僅可延長移液器的使用壽命,也可保證實驗數據的可靠性,減少實驗誤差。目前較為常見的移液器品牌主要有德國Eppendorf移液器、芬蘭Ismart移液器、法國Gilson移液器及國產Dragonmed移液器等,下面就來具體介紹一下移液器的使用方法,希望可以幫助到大家。
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差 (2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差 (3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,而且會污染槍頭 (4)試劑的揮發:吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善。
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。 (2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。 (3)濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。 (4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。 (5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內部零件松散而損壞移液器。 (6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。 (7)在設置量程時,請注意旋轉到所需量程,數字清清楚楚在顯示窗中,所設量程在移液器量程范圍內不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。 (8)移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。 (9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。 (10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
使用前:
1.熟悉整個實驗流程,選擇適宜量程的移液器。常見的量程包括0.1-2.5ul;0.5-10ul;2-20ul;5-50ul;10-100ul;20-200ul;100-1000ul;500-5000ul;1000-10000ul,各品牌的量程大同小異,量程通常在移液器上都會標注,量程范圍內可進行大小調節。
2.移液器槍頭大小和移液器匹配,
3.部分實驗要求槍頭無菌,在實驗開始前需先對槍頭進行高壓滅菌;部分實驗要求無RNA酶,則需直接購買無RNA酶槍頭。