分光光度計在我們日常試劑開發中,是一臺必備的測量儀器,分光光度計是怎么使用的?下面就和大家一起聊聊它的使用技巧!1.使用儀器之前,一般要校正儀器,看看空白時透光率是否是100%。 2.比色皿應該保持清潔,干燥。 如有污物,可用稀鹽酸清洗后,再用1:1的酒精與乙醚清洗涼干。禁止用硬物碰或擦透明表面。或者建議使用10%的鹽酸溶液浸泡,然后用無水乙醇沖洗2~3次。比色皿具有方向性,使用時要注意,仔細觀察比色皿上方應該有一個箭頭標志的,代表入射光方向。注入和倒出溶液時,應該選擇非透光面。最好使用配對的比色皿。 3.防止儀器振動,影響光學系統。 4.在開機狀態,不測量時,應該打開樣品池門,否則,影響光電傳感器壽命。 5.樣品集中測量,避免開機次數,可延長光源壽命。 6.儀器工作穩定性差,漂移大時,應該考慮更換光源或光電元件。 7. 一般分光儀主要有光源部分、光路部分、檢測器三的部分,光路有的情況是穩壓電源問題,鎢燈問題及鎢燈位置與光路不一致等問題。光路部分主要有比色皿不干凈,燈光與比色皿位置不合適(在正常情況下,比色皿位置放一張白紙,可以清楚看到光斑形狀呈顯矩形,屬于正常情況。對于檢測器大多數是正常的,但是光敏管或者光電管有時侯也會出現問題。 8.若峰出現很多“毛刺”,可能是掃描速度過快,濃度過高或者狹縫過小; 9. 紫外分光光度計用來測紫外光時,石英皿用來調零時不穩定,是由那些原因? 首先確定是否用成玻璃比色皿,判斷方法在紫外區任一波長下用空氣調零測比色皿的吸光度如果超過1ABS則比色皿用錯.再次用空氣調零看零點是否穩定,如不穩則是儀器問題,如空氣穩定而放入石英皿后不穩定,則檢查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液藥品過期,或者空白溶液透明范圍不適合此波長測量比如甲醇在210NM以下吸光度很大無法調零。 10. 儀器狹縫寬度的選擇 狹縫的寬度會直接影響到測定的靈敏度和校準曲線的線性范圍。狹縫寬度過大時,入射光的單色光降低,校準曲線偏離比耳定律,靈敏度降低;狹縫寬度過窄時,光強變弱,勢必要提高儀器的增益,隨之而來的是儀器噪聲增大,于測量不利。選擇狹縫寬度的方法是:測量吸光度隨狹縫寬度的變化。狹縫的寬度在一個范圍內,吸光度是不變的,當狹縫寬度大到某一程度時,吸光度開始減小。因此,在不減小吸光度時的最大狹縫寬度,即是所欲選取的合適的狹縫寬度。 11. 紫外測量吸光度值不準,什么原因? (1).儀器調零后跳動大的話那可能是儀器有問題. (2).調零穩定的話,看樣品濃度是否過高,最好控制在0-1個吸光度之間. (3).濃度合適的話,看是否比色皿沒擦干凈,一般可用蒸餾水沖洗一下,擦干后用鏡頭紙擦干凈. (4).檢查樣品是否穩定,如果零點不變而放上樣品變化,那么是樣品有變化,檢查樣品是否有問題. 12.關于儀器維護 (1).儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動. (2).為了延長光源使用壽命,在不使時不要開光源燈. (3).單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內不能拆開,為防止色散元件受潮發霉,必須經常 更換蛋色器盒干燥劑. (4).必須正確使用吸收池,保護吸收池光學面. (5).光電轉換元件不能長時間暴光,應避免強光照射或受潮積塵. 使用分光光度計都有什么注意事項? 1)為了防止光電管疲勞:不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。 2)比色皿的使用方法:
①拿比色皿時:手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿時:一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實驗時,應立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干:以保護透光面。
④測定有色溶液吸光度時:一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
⑤在實際分析工作中:通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
①拿比色皿時:手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
②清洗比色皿時:一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實驗時,應立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干:以保護透光面。
④測定有色溶液吸光度時:一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測定一系列溶液的吸光度時,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差。
⑤在實際分析工作中:通常根據溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。