箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然后手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中殘余氧化合成水的原理。
該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均是自動調節。
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結構
共分為:厭氧室、傳輸艙、裸手袖套操作孔、氣路及電路控制系統四大部分。
1、厭氧室:
內腔機械強制對流與內腔正壓,實現恒溫、控濕、除氧、生物脫毒四方面狀態穩定均一,并且快速恢復,操作培養同室進行。
2、傳輸艙:
采用緊湊式筒狀設計,實現單人單手輕松轉移樣品。
3、裸手袖套操作孔:
無需進行抽真空/充氮置換過程,雙手可直進直出內腔厭氧。
4、控制系統:
全方位實時狀態自檢報警功能,確保設備正常運行。
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操作室厭氧環境形成
1.按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內放入兩個無毒塑料袋。
2.混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調整,調節減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa。
3.打開設備后配,電源開關后,按控制牌上的總電源鍵,使設備通電。
4.操作室放入1000g鈀粒(密封),由冷凝系統除濕,并放入厭氧指示劑。
5.關緊取樣室內外門,并抽真空校驗(按控制面板上真空泵鍵,按一下開,再按一下關)。
6.操作室內第一次置換(氮氣置換):
①先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一個插入塑料袋。
②接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關閉電磁閥,然后扎緊袋口。
③把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
④把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內,至全部放除。
7.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣。
8.操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H21/10% CO2/15%):
①調換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣。
②混合氣充滿塑料袋后,關閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經過穩流器、流量計、調整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
③把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
④通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態。
9.操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應區上滴一點潔凈水,1-2小時后,觀察其變色情況,反應部分深藍色變為淺藍為操作室內達到厭氧環境。
10.紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間自定。
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菌種的置入和培養
1.檢查取樣室內門并關緊之。
2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門。
3.取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進氣,使指針回復零位,關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束。
4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5.取樣室外門開啟、關緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6.厭氧培養箱需要長期連續使用的條件:
①每天在操作室內放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新換氣。
②要長期連續輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
③連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內,干燥2-3小時可使其復原)
7.接種棒滅菌器的應用:
①隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
②熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。
8.操作室里的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。
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注意事項
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。
2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3.培養物放入必須是在操作室內達到絕對厭氧環境后放入。
4.如發生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態。(超過12小時則根據需要把培養物取出另作處理)
5.經常注意氣路有無漏氣現象。
6.調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體。
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
8.停止使用,關閉總電源鍵,及設備后部的電源開關。
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臨床常見厭氧菌
1、梭狀芽胞桿菌屬(Clostridium)
簡稱梭菌屬,常見致病菌有破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌和艱難梭菌,均為嚴格厭氧菌。其中產氣莢膜梭菌常引起氣性壞疽,且病程短、癥狀兇險;艱難梭菌常引起抗生素相關性腹瀉,極易因誤診而產生嚴重癥狀。
2、卟啉單胞菌屬(Porphyromonas Shah and Collins)
常見致病菌有牙齦卟啉單胞菌、牙髓卟啉單胞菌等,嚴格厭氧菌。其中牙齦卟啉單胞菌是牙周疾病的主要病原菌;牙髓卟啉單胞菌主要引起牙髓及根尖組織疾病。
3、念珠菌屬(candidiasis)
常見致病菌有白色念珠菌,厭氧菌。白色念珠菌口腔粘膜感染常引起口腔潰瘍,而其在陰道內感染則是婦科疾病的主要起因。
4、乳酸桿菌屬(Lacticacid bacteria)
常見條件致病菌有嗜酸乳桿菌,厭氧菌。該菌為齲齒形成的主要原因,也是牙科主要防治菌之一。
5、螺桿菌屬(Helicobacter)
常見致病菌有幽門螺桿菌,微需氧菌。該菌為慢性胃炎和胃腸潰瘍的主要病原菌,也與原發性胃癌有密切關系。
6.彎曲菌屬(Campylobacter)
常見致病菌有空腸彎曲菌,微需氧菌。該菌為腸炎的重要病原菌之一,常因抗生素治療無效而延誤病情,產生嚴重后果。