測(cè)試片法介紹
01
方法原理及操作
測(cè)試片主要由培養(yǎng)基、冷水可凝膠、顯色劑組成,菌落總數(shù)大多數(shù)用的顯色劑是TTC。細(xì)菌在測(cè)試片上生長(zhǎng)時(shí),細(xì)胞代謝產(chǎn)物與濃度極低的指示劑TTC發(fā)生氧化還原反應(yīng),將指示劑還原成紅色產(chǎn)物,從而使細(xì)菌著色。所以,大多數(shù)測(cè)試片上紅色菌落判斷為菌落總數(shù)。
操作流程:在無(wú)菌條件下,吸取1mL待檢樣品滴加到測(cè)試紙片中, 覆蓋好紙片放置 36 °C±1 °C培養(yǎng) 48 h±2h(有快速測(cè)試片為24h±2h)。
計(jì)數(shù)全部紅色菌落為菌落總數(shù)(但也有雙顯色劑的測(cè)試片)。
02
適用范圍
由于操作簡(jiǎn)單,被廣泛使用于加工過(guò)程菌落總數(shù)快速測(cè)定。適用于大部分食品及環(huán)境涂抹樣本,試用范圍較廣泛。
顏色較深樣品可能會(huì)有干擾,部分辛辣調(diào)味料會(huì)有干擾抑制,可選用特殊的樣品處理方式,如選擇合適的稀釋倍數(shù)或帶濾網(wǎng)的均質(zhì)袋進(jìn)行樣品處理,具體依據(jù)各廠家的技術(shù)聲明來(lái)執(zhí)行。
03
主要方法特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)單,節(jié)省人工。減少了培養(yǎng)基準(zhǔn)備工作, 節(jié)省了大量的人力物力。
平板菌落結(jié)果一致性好,避免了熱損傷菌落蔓延發(fā)生減少。
判讀更清晰,易與食品顆粒分開(kāi)。
節(jié)省培養(yǎng)空間。檢測(cè)同樣數(shù)量的樣品,使用測(cè)試片所占的空間比平板要少很多,大大節(jié)省培養(yǎng)空間。
安全性高,不易碎、不會(huì)對(duì)人員造成潛在的傷害,另密封比較好,不容易直接接觸菌落。
04
常見(jiàn)問(wèn)題
(1)出現(xiàn)菌落蔓延、水化現(xiàn)象
主要由食品中的芽孢桿菌引起的易產(chǎn)生液化的產(chǎn)品:冰淇淋、糕點(diǎn)、加工肉制品、調(diào)味料等。可以減少堆疊數(shù)量或者進(jìn)一步稀釋來(lái)緩解。
(2)TTC具有一定抑菌功能,測(cè)試片以TTC為指示劑是否有影響?
首先,測(cè)試片生產(chǎn)時(shí)添加的是極低濃度的TTC,低濃度的TTC對(duì)多數(shù)常見(jiàn)微生物是不造成抑制的;其次,多數(shù)測(cè)試片的工藝采取的是分層涂布,TTC位于最上層,菌體長(zhǎng)出來(lái)后才能接觸到低濃度TTC。
(3)有些樣品,低稀釋度菌不生長(zhǎng),高稀釋度菌生長(zhǎng),如含有防腐劑、抑菌劑等具有一定抑制作用的樣本;含有乳酸菌較多的樣本;pH值較低的樣本。
可以通過(guò)稀釋梯度來(lái)解決。
(4)開(kāi)封后測(cè)試片的保存方法及原因?
密封夾密封后,常溫/冷藏、避光、干燥保存,并于1個(gè)月內(nèi)使用完。如果從冰箱中取出后要常溫放置一段時(shí)間再打開(kāi)使用以防止冷凝水的產(chǎn)生。
(5)測(cè)試片是否容易導(dǎo)致污染?
首先,測(cè)試片是預(yù)制的無(wú)菌培養(yǎng)基系統(tǒng);其次,測(cè)試片的接種操作時(shí)間短,只要遵循無(wú)菌操作,其污染的幾率相對(duì)傳統(tǒng)方法更小;且培養(yǎng)過(guò)程中,測(cè)試片的接種生長(zhǎng)區(qū)域處于密封狀態(tài),不會(huì)導(dǎo)致污染。