色譜分析實驗中,標準品使用方式靈活多樣:(少量純品配制成)低濃度標液直接使用、(純品配制成)高濃度標準溶液稀釋使用。我們在實驗室天天接觸,熟悉卻不一定了解它們。
一支標準品從原液或純品形態“變身”為直接使用的形態,通常會經歷標準品→儲備液→工作液階段,不同階段的有效期也不同。接下來,小編帶大家進一步認識標準品的這些“變換形態”。
標準儲備液(或貯備液)
基本信息
▶ 部分標準文件稱貯備液。
▶ 通常是用標準品配制成的或者直接購買的高濃度標準溶液,濃度遠高于最高使用濃度,同一項目中一般不直接使用。
▶ 在食品、藥品、化妝品等檢測領域,貯備液通常配制成1mg/L(或1000μg/mL),但也有部分食品中毒素類檢測項目如黃曲霉毒素,由于實際使用濃度很低,可能配制成10μg/mL甚至更低濃度。環境監測領域部分項目可能需要配制成更高濃度,如2mg/L~10mg/L(或稱2000μg/mL~10000μg/mL)。
用途
▶ 稀釋成不同濃度的工作溶液。
溶劑的選擇
▶ 根據化合物性質選擇不發生反應、溶解性較好、或適用于后續實驗的種類。
▶ 可用流動相。
▶ 遵守SOP或參照現行標準、文獻。
優點
▶ 分裝后可多次使用,省去多次稱量純品/取用原液的麻煩;
▶ 避免每次配制的工作溶液間的濃度差異帶來數據的偏差。
標準工作溶液
基本信息
▶ 分為標準使用液和標準中間液,不同標準文件叫法不同。
▶ 工作溶液是儲備液按一定比例稀釋后的標準溶液,濃度視具體實驗需要而定。
▶ 如果儲備液濃度過高,使用前還需要梯度稀釋至使用濃度,此時就會有中間梯度的標準中間溶液。
用途
▶ 外標法:配制成不同濃度梯度用于繪制標準曲線。
▶ 內標法:加入樣品基質/提取液用于校正標準曲線、校正分析儀器狀態等。
▶ 質量控制:加入空白基質/空白溶液檢測加標回收率、檢驗基質效應。
溶劑選擇
▶ 不與化合物發生反應、有一定溶解性、適用于后續實驗的種類。
▶ 不一定要溶解性最好,溶劑與流動相極性不能相差太大,否則會出現溶劑效應,表現為峰型異常、上樣后柱壓升高甚至保留時間漂移等現象。
▶ 可用流動相稀釋儲備液獲得。
▶ 遵守SOP或參照現行標準、文獻。
儲備液和工作液的有效期
相比純品或標液原液,配制的儲備液和工作液有效期會極大縮短。
▶ 未開封時純品有效期通常2-5年,標液原液的有效期通常0.5-2年(注:不同品牌、不同化合物的標準品有差異,以證書為準),而配制成貯備液或工作溶液后,有效時限則縮短至數月到數周。
▶ 部分標準文件中對于標準貯備液和工作溶液的參考有效期,部分標準文件在標液配制方法下對有效期做出規定:
例1:GB/T 27404-2008 實驗室質量控制規范 食品理化檢測附錄C中提供了常檢的農獸藥標準溶液的參考有效期:0.5mg/L~1mg/L貯備液保存在0℃左右冰箱中,有效期6個月,0.5μg/L~1μg/L工作溶液保存在0℃-5℃冰箱中,有效期2-3周。
例2:GB 5009.82-2016 食品安全國家標準 食品中維生素A、D、E的測定中,標準溶液配制部分(例如 10.4一節)對儲備液和中間液的有效期做出了說明,工作溶液部分沒有說明有效期,鑒于維生素E屬于不穩定的化合物,此類工作溶液需要現用現配。