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（1）取鏡：右手握鏡臂，左手托底座（考慮到大部分人都是右手有力）
（2）安放：放有光，略靠左，鏡臂朝自己。（考慮到大部分人都是右手執(zhí)筆記錄）
（3）對(duì)光：低倍物鏡，大光圈，一起對(duì)準(zhǔn)通光孔，左眼觀，同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡，直至看到明亮圓形光斑。（大光圈凹面鏡視野光線強(qiáng)，小光圈平面鏡視野光線弱，查看液泡的時(shí)候，需要光線弱點(diǎn)才能看清）
（4）放片：載物臺(tái)，放玻片，保證標(biāo)本在通光孔中間，便于觀察。
（5）調(diào)焦：側(cè)盯物鏡，降下物鏡至距離標(biāo)本0.5CM，再通過(guò)目鏡觀察，向后旋粗準(zhǔn)焦螺旋，鏡筒升，看見(jiàn)物像再調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。（如果調(diào)到頭了沒(méi)找到，再按要求重來(lái)一次，或者查看移動(dòng)玻片保證標(biāo)本在通光孔中央）
（6）觀察：顯微鏡，成倒像，物向左，像向右，像在上，向上移，像往何處逃，玻片同向追。（注意：順逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)不變）
2．顯微鏡成像：
（1）放大倍數(shù)：目鏡×物鏡
目鏡越短，放大倍數(shù)越大；物鏡越短，放大倍數(shù)越小。
目鏡和物鏡通過(guò)是否有螺口來(lái)判斷。
注意：放大的是長(zhǎng)度，不是面積；長(zhǎng)度放大10倍，面積放大102倍
（2）高低倍鏡下物像特點(diǎn)的比較
放大倍數(shù)越大，看到的視野范圍越小/細(xì)胞數(shù)量越少，光線越暗；放大倍速越小，看到的視野范圍越大/細(xì)胞數(shù)量越多，光線越亮。
（3）成像：倒像 （上下左右都顛倒）
如果物像偏向右上側(cè)，要使物像移動(dòng)到視野中央，應(yīng)該向右上移動(dòng)玻片
3．用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞
（1）洋蔥表皮臨時(shí)裝片的制作：
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擦 |
用潔凈的紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈 |
目的是擦除載玻片上的污物 |
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滴 |
用滴管在載玻片的中央滴一滴清水 |
目的是保持細(xì)胞的原有形態(tài) |
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取 |
用鑷子從葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明薄膜 |
目的是取到適于觀察的洋蔥鱗片內(nèi)表皮細(xì)胞 |
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展 |
將索取材料放于載玻片，展平 |
目的是防止細(xì)胞重疊 |
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蓋 |
用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后輕輕的蓋上。 |
目的是避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡 |
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染 |
在蓋玻片的一側(cè)滴加紅墨水或稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使染液浸潤(rùn)標(biāo)本的全部。 |
目的是使細(xì)胞著色，可以對(duì)其內(nèi)部結(jié)構(gòu)觀察得更清晰 |
（2）注意事項(xiàng)：
A.用鑷子撕取洋蔥表皮時(shí)，先用刀片割“#”形，便于操作
B.加蓋玻片時(shí)，防止產(chǎn)生氣泡的方法：讓蓋玻片的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后輕輕平放
C.吸水紙不但有利于染色，還能把多余的水分吸走，也能利于氣泡排出。
D.如果出現(xiàn)以下問(wèn)題，會(huì)采取相應(yīng)的措施
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現(xiàn)象 |
原因 |
對(duì)策 |
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細(xì)胞有嚴(yán)重重疊現(xiàn)象 |
洋蔥表皮細(xì)胞撕得太厚 |
重新撕幾次，挑選較薄的表皮進(jìn)行實(shí)驗(yàn) |
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洋蔥表皮細(xì)胞未在載玻片上展平，甚至造成折疊現(xiàn)象 |
用鑷子展平洋蔥表皮后，重新制作裝片 |
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細(xì)胞結(jié)構(gòu)不太清楚 |
未滴加紅墨水/碘液 |
滴加紅墨水/碘液 |
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有黑色圓圈 |
有氣泡或氣泡太多 |
重新蓋蓋玻片或重新制作裝片 |
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視野中無(wú)光斑或視野太暗等現(xiàn)象 |
顯微鏡操作失誤，如反光鏡未對(duì)好，光線過(guò)強(qiáng)、過(guò)弱或無(wú)光，物鏡為對(duì)準(zhǔn)通光孔，準(zhǔn)焦螺旋轉(zhuǎn)動(dòng)過(guò)快 |
重新按正確的方法操作顯微鏡 |
4．用顯微鏡觀察人體口腔上皮細(xì)胞
（1）步驟：
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擦 |
用潔凈的紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈 |
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滴 |
用滴管在載玻片的中央滴一滴生理鹽水 |
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刮 |
用消毒牙簽在漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下 |
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涂 |
把牙簽上附有碎屑的一端，放在載玻片上的0.9%生理鹽水涂抹幾下 |
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蓋 |
用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后輕輕的蓋上，避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡。 |
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染 |
在蓋玻片的一側(cè)滴加亞甲基藍(lán)/稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使染液浸潤(rùn)標(biāo)本的全部。 |
（2）注意事項(xiàng)：
A.滴加生理鹽水而不是清水，是為了使口腔上皮細(xì)胞保持原來(lái)的形態(tài)特點(diǎn)（防止吸水爆裂）。
B.漱口，除掉口腔中的食物殘?jiān)?/span>
C.涂抹一定要均勻，防止細(xì)胞重疊。
D.由于口腔上皮薄而透明，所以要用亞甲基藍(lán)溶液染色，觀察時(shí)光線要調(diào)得暗一些。
