主要是:壓力異常、漏 液、譜圖問題、進樣閥的問題。
一)壓力異常
操作壓力的變化往往是故障的征兆。
A、沒有壓力顯示,沒有流動相流動:
原 因 解決方法
1、電源問題 接通電源,開機
2、保險絲被燒壞 更換保險絲
3、控制器設定不正確或設定失敗 采取恰當的設定、、修理或更換控制器
4、柱塞桿折斷 更換柱塞桿
5、泵頭內有空氣 溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣
6、流動相不足 補充流動相、更換入口濾頭
7、單向閥損壞 更換單向閥
8、漏液 擰緊或更換手緊接頭
B、流動相流動正常,但沒有壓力顯示:
原 因 解決方法
1、儀表損壞 更換儀表
2、壓力傳感器損壞 更換壓力傳感器
C、壓力持續偏高
原 因 解決方法
1、流速設定過高 調整流速設定
2、柱前篩板堵塞 反沖色譜柱、更換篩板、更換色譜柱
3、流動相使用不當或緩沖鹽的結晶沉淀 使用恰當的流動相、沖洗柱塞桿。
4、色譜柱選擇不當 選擇恰當的色譜柱
5、進樣閥損壞 清洗或更換進樣閥
6、柱溫過低 提高溫度
7、控制器失常 修理或更換控制器
8、保護柱阻塞 清洗或更換保護柱
9、在線過濾器阻塞 清洗或更換在線過濾器
D、 壓力持續偏低:
原 因 解決方法
1、流速設定過低 調整流速
2、系統漏液 確定漏液位置并維修
3、色譜柱選擇不當 選擇恰當的色譜柱
4、柱溫過高 降低溫度
5、控制器失常 維修或更換控制器
E、 壓力波動:
原 因 解決方法
1、泵中有氣體 溶劑脫氣、從泵中除去氣體
2、單向閥損壞 更換單向閥
3、泵密封損壞 更換泵密封
4、脫氣不充分 重新過濾一遍、溶劑脫氣
5、系統漏液 確定漏液位置并維修
6、使用梯度洗脫 由于流動相粘度的變化引起的壓力波動
二) 漏 液
通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題,就必須將接頭取下,檢查是否損壞(例如,卡套損壞、密封表面有雜質);損壞的接頭應該更換掉。
A)接頭處漏液
原 因 解決方法
1、接頭松動 擰緊
2、接頭磨損 更換
3、接頭過緊 擰松,再重新擰緊、更換
4、接頭被污染 拆下清洗、更換
5、部件不匹配 使用同一品牌的配件
B)泵漏液
原 因 解決方法
1、單向閥松動 擰緊單向閥(不必擰的過緊)、更換單向閥。
2、接頭松動 擰緊接頭(不必擰的過緊)
3、混合器密封損壞 更換混合器密封、更換混合器。
4、泵密封損壞 維修或更換泵密封件
5、壓力傳感器損壞 維修或更換壓力傳感器
6、脈沖阻尼器損壞 更換脈沖阻尼器
7、比例閥損壞 檢查隔膜,如果漏液立即更換、檢查手緊接頭,損壞的立即更換
8、放空閥的損壞 擰緊放空閥、更換放空閥
C)進樣閥漏液
原 因 解決方法
1、轉子密封損壞 重新安裝或更換進樣閥
2、定量環阻塞 更換定量環
3、進樣口密封松動 調整
4、進樣針頭尺寸不合適 使用恰當的進樣針
5、廢液管中產生虹吸 保持廢液管高于廢液液面
6、廢液管阻塞 更換或疏通廢液管
D)色譜柱漏液
原 因 解決方法
1、尾端接頭松動 擰緊接頭
2、卡套內有填料 拆下、清洗卡套、重新安裝
3、篩板厚度不合適 使用合適的篩板
E)檢測器漏液
原 因 解決方法
1、流通池墊片損壞 更換墊片、避免過大的背景壓力(壓力降)
2、流通池窗破碎 更換窗口
3、手緊接頭漏液 擰緊或更換
4、廢液管阻塞 更換廢液管
5、流通池阻塞 重新安裝或更換
三)譜圖問題
液相色譜系統的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設備參數得到解決;對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關鍵。
A)峰拖尾
原 因 解決方法
1、篩板阻塞 反沖色譜柱、更換進口篩板、更換色譜柱
2、色譜柱塌陷 填充填料至色譜柱中
3、干擾峰 改變流動相或更換色譜柱
4、流動相PH選擇錯誤 調整PH值,一般在3-7
5、樣品與填料表面的溶化點發生反應 加入離子對或堿性修飾劑、更改色譜柱
6、柱外效應 調整系統連接(使用更短、內徑更小的管路)使用小體積的流通池
7、二級保留效應,反相模式 加入三乙胺(堿性樣品)、加入乙酸(或酸性樣品)、加入鹽緩沖劑(離子化樣品)換柱
8、緩沖液不合適 使用濃度20-100mM的緩沖液、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液
B)峰前延
原 因 解決方法
1、柱溫低 升高柱溫,一般為25-40度,不得超過60度
2、樣品溶劑選擇不恰當 使用流動相作為樣品溶劑
3、樣品過載 降低樣品含量
4、色譜柱損壞 更換新柱
C)峰分叉
原 因 解決方法
1、分析柱污染 可能是柱子污染,再生;入口可能被阻塞,拆下來清洗必要時更換色譜柱。
2、樣品溶劑不溶于流動相 采取流動相作為樣品溶劑。
D)峰變形
原 因 解決方法
1、樣品過載 減少樣品載量
2、樣品溶劑選擇不恰當 減少進樣體積、運用低極性樣品溶劑
E)額外的峰
原 因 解決方法
1、樣品中有其他組份 正常
2、前一次進樣的洗脫峰 增加運行時間或梯度斜率、提高流速
3、空位或鬼峰 檢查流動相是否純凈、使用流動相作為樣品溶劑、減少進樣體積
F)保留時間波動
原 因 解決方法
1、溫控不當 調好柱溫
2、流動相組分變化 防止變化(蒸發、反應等)
3、色譜柱沒有平衡 在運行前給予足夠的時間平衡色譜柱
4、流速變化 重新設定流速
5、泵中有氣泡 從泵中除去氣泡
3、流動相選擇不恰當 更換合適的流動相、選擇合適的混合流動相
G)基線漂移
原 因 解決方法
1、柱溫波動。 控制好柱子和流動相的溫度
2、流動相不均勻或純度不高 使用HPLC級的溶劑、高純度的鹽及添加劑、重蒸水、流動相在使用前進行脫氣
3、流通池被污染或有氣體 用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池
4、檢測器出口阻塞 取出阻塞物或更換管子
5、流動相配比不當或流速變化 更改配比或流速
6、柱平衡慢,特別是流動相發生變化時 更改流動相時,平衡半小時
7、流動相污染、變質 檢查流動相的組成、重新配制
8、樣品中有強保留的物質以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現出一個逐步升高的基線。 重新用水及甲醇清洗柱,除去強留份。
10、檢測器沒有設定在最大吸收波長處。 將波長調整至最大吸收波長處
H)基線噪音
原 因 解決方法
1、在流動相、檢測器或泵中有空氣 流動相脫氣。強極性溶劑沖洗系統除去氣。
2、漏液 檢查管路接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。
3、流動相混合不完全 用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑
4、溫度影響(柱溫過高) 減少差異、穩定時間長一點
5、在同一條線上有其他電子設備 檢查干擾是否來自于外部,加以更正。
6、泵振動 在系統中加入脈沖阻尼器
7、流動相污染、變質或由低質溶劑配成 檢查流動相的組成。
8、流動相各溶劑不相溶 選擇互溶的流動相
9、檢測器/記錄儀電子元件的問題 斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。
10、流通池污染 清洗流通池
11、檢測器燈能量不足 更換燈
12、色譜柱填料流失或阻塞 更換色譜柱
13、流動相混合不均勻或混合器工作不正常 維修或更換混合器
I)寬峰
原 因 解決方法
1、流動相組成變化 重新制備新的流動相
2、流動相流速太低 調節流速
3、漏液(特別是在柱子和檢測器之間) 檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。
4、檢測器設定不正確 調整設定
5、柱外效應影響:柱子過載;檢測器對反應時間或池體積響應過大;柱與檢測器間管路太長或管路內徑太大 小體積進樣、減少響應時間或使用更小的流通池、使用內徑為0.007-0.01的短管路、減少響應時間
6、緩沖液濃度太低 增加濃度
7、色譜柱污染或失效,塔板數較低 更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰,則用強溶劑沖洗舊柱子。
8、柱入口塌陷 打開柱入口,填補塌陷或更換柱子
9、呈現兩個或多個未被完全分離的物質的峰 選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果
10、柱溫過低 提高柱溫。溫度不宜超過60℃
12、檢測器時間常數太大 使用較小的時間常數
J)所有的峰面積都太小
原 因 解決方法
1、檢測器衰減設定過高或過低 減少或增加衰減的設定
2、檢測器時間常數設定太大 設定較小的時間常數
3、進樣量太少或太多 增大或減少進樣量
4、記錄儀連接不當 使用正確的連接
四)進樣閥的問題
以下問題在使用進樣閥過程中有可能發生。
A)手動進樣閥,轉動不靈
原 因 解決方法
1、轉子密封損壞 更換或調整轉子密封
2、轉子太緊 調整轉子的松緊度
B)手動進樣閥,載樣困難
原 因 解決方法
1、進樣閥安裝不當 重新安裝
2、定量環阻塞 清洗或更換定量環
3、進樣器污染 清洗或更換進樣器
4、管路阻塞 清洗或更換管路