一、紫外檢測儀概述:
紫外檢測儀是液相色譜中的一種紫外裝置,儀器配上層析柱,恒流泵,部分收集器等,即組成一完整的液相色譜分離分析裝置,它是從現代生物學研究,藥物測定、農業科研、化工、食品及醫療單位對具有紫外吸收的樣品的作定量分析,本儀器主要元件器采用進口,光電培增管IP28型,性能穩定、靈敏度高等。
二、紫外檢測儀主要技術指標:
1、核酸蛋白檢測儀波長:254nm、280nm
2、紫外檢測儀波長:220nm、254nm、280nm、340nm
3、樣品池,容積100微升,光程3毫米
4、量程范圍:0-100%T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A
5、LED數字顯示
6、儀器可連續工作一周
7、電源:220VAC±10%50HZ
8、溫度:-5℃~35℃
三、紫外檢測儀工作原理:
儀器工作原理的依據是光吸收定律。從光源發出的光經狹縫、濾光片、樣品池到光電培增管上,使束由于樣品濃度不同所引起光強的變化轉換成光電流的變化,此光電流經放大器輸入到對數轉換器,使透光率T轉成A輸出,即A=1g — =εCL式中ε為待測樣品的克分子消光系統,C為樣品濃度,采用克分子/升單位,L為光程,用厘米作單位。根據上式就知測出了A,就知樣品濃度C。若從放大器直接輸入記錄儀,繪出的是樣品透光率T變化的圖譜,若從對數轉換器輸入到記錄儀繪出的是樣品光密度A變化的圖譜。
四、紫外檢測儀儀器結構:
它由一組光源,四塊干涉濾色片,一塊聚光透鏡,一只樣品池,一只光電倍增管,一塊放大板和一塊對數板等組成,面板上有聚乙稀塑料管的進樣口和出樣口,A調零以及調節“光量”大小旋鈕(光量大小以箭頭表示)。還有光源指示燈、電源指示燈以及量程轉換旋鈕。
光源主要提供220、254、280、340毫微米分別作為檢測核酸、蛋白、酶、多肽的光源。
濾色器由220、254、280、340毫微米譜線外尚含有其它波長的譜線,通過各自所對應的濾色片就把非譜線波長以外的其它波長濾去,這保證了儀器的單色性。
核酸蛋白檢測儀除測254nm、280nm外,其它性均同紫外檢測儀。
樣品池由石英玻璃管拉制而成,內徑一般為3毫米左右,容積不大于100微升。
五、紫外檢測儀記錄儀
根據用戶簽訂合同而定,目前我公司配備有XWD-100型長型記錄儀,LM17-A、LM14-104、XWT-1044以及3057型臺式記錄儀。用時他細參閱隨要說明書。
本公司儀器記錄儀有以下幾個要求:
1、量程一定用10mv。
2、走紙速度為每小時3cm、6cm或12cm。
紫外檢測儀使用方法:
1、首先將主機和記錄儀二部分電路接妥,然后把主機的電源插頭插入220V電源插座上。
2、出廠前波長設定280nm,若所需其它波長,只需在儀器右側轉動波長轉換旋鈕撥到實驗所需檔。
3、按下主機電源開關指示燈亮,若做透光度100%T測試把旋鈕(即靈敏度)撥到T檔。調節光量旋鈕,LED數字顯板上也同時顯示該數字。
4、若做光密度A測試,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到實驗需T檔。調節光量旋鈕,使LED數字面板顯示約為98左右附近即可。儀器預熱1.5小時左右,當基線穩定后,就對儀器進行調校。
5、把層析柱下端塑料管與主機進樣塑料管相連接,出樣塑料管接到部分收集器或試管內,此時樣品池內有洗脫液通過。
6、調節光量旋鈕,量程旋鈕放置100%T檔,使LED數字顯示為100,T撥到A檔,使LED面板上讀數為0左右,若作透光度T測試,就可在層析柱上加樣,對樣品進行分離分析。
7、若做光密度A測試,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到所需光密度A,調節光量旋鈕,使LED面板為0。此時記錄儀回到零點附近(注:零點附近即可,在實驗中可自來定)。
8、如繪出圖譜峰值過小,把量程旋鈕(即敏度)撥到所需位置。
9、在測試過程中,“光量”均不再變動。測試完畢,并用蒸餾水清洗樣品池和管道。
六、紫外檢測儀注意事項
1、汞燈的光強受溫度和電壓影響較大,建議用戶最好能在恒溫室內工作或者在冰庫里工作。
2、T調零生產時機內已校準,當更換光電培增管后,需重新校準。
3、汞燈壽命可達數千小時,若發現記錄儀不能調到10mV,且基線一直往小的方向漂移要考慮換燈。如汞燈不亮可再按一次電源開關,汞燈就會即亮,光電培增管壽命在數千小時以上。注意開機工作時不得拿出樣品池架,以免強光照射光電培增管造成損壞。汞燈發光區域和光電培增管光陰極窗口沾污時,可用干凈棉芯酒精擦拭干凈。