1、操作前的準備
1.1 測定條件除另有規定外，測定溫度為20℃.對測定溫度有嚴格要求的供試品，在測定前將儀器及供試品置規定環境溫度的恒溫室內至少2h。
1.2 接通電源前檢查樣品室內應無異物，確定旋光儀光源開關置于【～】（交流）擋，電源開關和示數開關應放在關的位置（向下）；檢查儀器旋轉位置是否合適，鈉光燈啟輝后，不得再搬動儀器，以免損壞鈉光燈。
2、接通電源
2.1 將儀器電源插頭插入220V 交流電源插座上，并接好地線，如使用的交流電壓不穩定，可使用1kv電子穩壓器。
2.2 開啟電源開關，鈉光燈經輝光放電，瞬間啟輝點燃，但發光不穩，至少預熱15min，待鈉光燈呈現穩定的橙黃色后，將旋光儀光源開關扳至“—”（直流）擋。如鈉光燈熄滅，可能是預熱時間不夠，可將光源開關上下重復扳動1～2次，使鈉光燈點燃。測定時旋光儀光源開關應保持在“—”位置，即：應使鈉光燈在直流電下工作。
3、測定操作
3.1 開啟示數開關（向上扳），用調零手輪調節儀器的示數值為零點。反復按下復測鍵，使指示值偏離零點，放開復測鍵，示數盤應回到零處。示數盤上紅色示值為左旋，黑色示值為右旋，如有偏離，可再用手輪調節，反復用復測按鈕按放3次，使其偏離后再回至零點或停點，記錄3次平均值即為儀器的零點。
3.2 將試樣管一端螺帽放上皮墊和蓋玻片（蓋玻片應緊靠試樣管）擰緊。從另一端注入水或供試品溶劑，先洗滌試樣管后注滿，將另一蓋玻片蓋上，放上皮墊，擰緊螺帽，將兩端蓋玻片用擦鏡紙擦干。如有氣泡可搖動試樣管使氣泡浮入凸頸內關閉示數開關（向下扳），打開樣品室蓋，將試樣管置于樣品室內試樣管槽上，關閉樣品室蓋，開啟示數開關按3.1所述測定零點或停點，如測定值為停點，則計算時應扣除停點的讀數即為零點。
3.3 關閉示數開關（向下扳），取出試樣管，倒出空白溶液，注入供試液少量，沖洗數次后裝滿供試品溶液，同上操作，取3次平均值再扣除水或溶劑的讀數，即為供試品溶液的旋光度。
3.4 如旋光度超出儀器測量范圍，儀器在±45℃(處能自動停止，此時取出試樣管，按一下樣品室內的復位開關按鈕，儀器即能自動回零。
3.5 如直流供電產生故障儀器鈉光燈，也可使用交流供電，但穩定性不好，儀器必須按規程檢定性能符合要求方可使用，如有異常現象，應隨時檢測。
4、關機
4.1 測定結束后，應先將示數開關關閉，然后再關電源，取出試樣管洗凈，晾干，樣品室內可放硅膠吸濕。
4.2 登記使用時間和一起狀況。
5、常見故障維修
5.1 故障現象一：按復測按鈕，示數盤轉動一下，松開后，能復位到零點。測定樣品時，示數盤在轉動過程中出現瞬間偷停現象。
分析：儀器能完成整個測定過程，可判斷前置放大器部分，選頻放大器部分，功率放大器部分電路正常；應懷疑光源，高壓電路，光電倍增管極間電壓出現問題。
維修：首先測量光源鈉燈電壓有穩定的24V，電源正常。測量自動高壓有400V～600V之間變化，也正常。接著打開光電倍增管小蓋，逐級測量倍增極的電壓，按正常電壓值應該逐級遞增，但當測量至7極和8極電壓相同都是700V，正常時應該是800V以上，測量該電阻值由原來510k變為無窮大，更換電阻，故障消失。
5.2 故障現象二：按復測按鈕，示數盤轉動一下，松開后，不能復位零點。測定樣品時，示數盤不轉動。
分析：儀器不能完成整個測定過程，但可以用手動按鈕控制功率放大部分，包括伺服電機組，但沒有復位信號，可判定信號反饋回路斷開。故懷疑自動高壓部分，選頻放大器部分，前置放大器部分出現問題。
維修：首先測量自動高壓有450V，判定光源，高壓部分正常。接著根據電路圖標出的各點電壓進行測量，電源21V正常，功率放大器部分T1921V正常，T1017V正常。選頻放大器部分T90V，不正常，應有13V～15V，把該晶體管3DG6從電路拆下，測量已損壞，更換3DG6，儀器恢復正常。因此可判斷因選頻放大器部分電路出現故障，未能把電源電壓送到前置放大器部分，使得前置放大器無法輸出放大信號供給后級工作，以致沒有復位信號而引起該故障。