首先,我們先了解一下什么是培養皿。
那么,培養皿接種后為什么要倒置培養呢?
主要原因有以下幾點:
當我們剛剛倒完平板,并蓋上培養皿蓋后,培養基尚有余溫且剛凝固不久,此時的水分較大,濕度也相對較高。在皿蓋上,你會發現凝結了一些水珠。如果平板正放,這些冷凝的水滴會流到培養基里,不僅容易造成污染,還可能使培養基與培養皿之間出現分離,導致平板在移動時容易滑動。此外,若培養基中的水分較大,在接種培養時,菌種會四處流動,使得長成的菌膜連在一起,給后續的計數工作帶來困難。
培養條件為必須通風時,倒置的平板可以減少培養基表面的空氣流動,減慢培養基中水分蒸發的速度,保持瓊脂等固體培養基中的水分,充分的維持瓊脂等凝固劑的彈性,延長培養基出現干裂的時間。所以,倒置培養有利于菌種的繁殖和生存。如果將平板正放,大概幾天時間培養基就會出現水分散失和開裂的情況。可見,防止培養過程中水分散失是非常重要的。
倒置平板在拿取時能夠保持原狀,不易出現平板底部與蓋子分離的情況,從而避免環境中的雜菌污染。同時,倒置培養使得培養基表面的菌落相對不會太快擴散,便于觀察和計數菌落特征。倒置平板使得觀察者可以從培養皿的底部觀察菌落,這有助于更清晰地觀察菌落的形態、大小和顏色等特征。
倒置平板有助于保持培養條件的一致性,因為所有平板都處于相同的環境條件下,有助于實驗結果的可重復性。
倒置培養時,由于平板內的空氣不易流動,能盡可能的減少外來雜菌的侵染,避免雜菌污染培養基和培養物。通過實驗觀察,發現如果平板正放,平板的周邊容易長出雜菌菌落。
在培養過程中,我們可能需要多次打開培養箱取放平板。如果平板正放,不小心容易將皿蓋掀開,增加污染的風險。而倒置的平板在拿取時能夠保持原狀,不易出現皿底和皿蓋分離的情況,從而避免環境中雜菌的污染。
那么如何正確的倒置培養皿呢?
現在總結幾點小技巧供大家參考:
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使用已消毒的平板,并在無菌條件下操作。
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佩戴干凈的無菌手套,以防止細菌和其他微生物的污染。
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倒置平板時,應將平板的蓋子倒置放置,以便讓蓋子在下、平板底在上。這樣可以防止平板蓋上的水分滴到培養基上造成污染。
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放置平板時要小心,避免顛簸和震動。
1.擴大培養,一般用液體培養基,不能倒置。
2.其實還有一些平板培養的情況是可以不用倒置的,比如在瓊脂平板上進行擴大培養,是用已經純化的單一菌種,接種比較大的量(比正常計數量要大,通常100毫米平板接種0.5毫升)到平板上,通過培養讓菌長滿整個平板,再加點無菌水用L形涂板器把菌刮下來。有些特定研究會用這種擴大培養的方法(而不是液體培養基培養后離心),這種培養理論上來說平板可以不用倒置,因為不存在冷凝水滴落造成菌種污染的問題(畢竟用的已經是純化菌種了)。