手機版
當(dāng)下，市面上實驗室試劑和耗材琳瑯滿目，質(zhì)量、價格等也是參差不齊，究竟什么樣的試劑與耗材才是對保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確無誤的呢？作為實驗人員又應(yīng)該如何選擇呢？
該類試劑為我國國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定，適用于檢驗、鑒定、檢測。
優(yōu)點：
用途：用于液相色譜（LC）樣品制備、LC樣品分析、LC-MS分析 2、農(nóng)殘級試劑 優(yōu)點：
用途：用于氣相色譜檢測（ECD、PND），用于有機氯、有機磷農(nóng)藥，PCBs及其他用GC/ECD和GC/PND檢測的化合物。 3、光譜純試劑 優(yōu)點：
用途：用于UV、IR光譜分析 4、優(yōu)級純試劑 符合國際標(biāo)準(zhǔn)要求，金屬元素雜質(zhì)含量低（大多是ppm級）。 用途：優(yōu)級純試劑可用于大多數(shù)常規(guī)實驗，這類產(chǎn)品還可應(yīng)用于生產(chǎn)領(lǐng)域。 5、特純與合成試劑 特純（extra pure）或者合成（for synthesis）級別試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能夠滿足實驗室常規(guī)溶液的配置或標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)使用（藥物合成原材料等），通常只檢測一些重要應(yīng)用的參數(shù)，比如，純度、IR參數(shù)、水分含量和醚含量以及過氧化物成分。 6、NMR核磁共振溶劑 氘代溶劑廣泛應(yīng)用于化學(xué)研究領(lǐng)域，對于分析有機物分子結(jié)構(gòu)的重要方法－－核磁共振波譜法是不可缺少。 用途：核磁共振實驗可以提供原子同其他分子中的原子的關(guān)聯(lián)信息，包括分子的空間取向、三維空間結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)組學(xué)、染色體組學(xué)、藥物研究領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。 對氘代溶劑有哪些要求？ NMR對所用溶劑的氘代度反應(yīng)很敏感，如用200兆赫光譜，使用氘代度在99.5％～99.8％就足夠了，如果提高設(shè)備的等級，例如用600兆赫光譜，則需要更高氘代度的溶劑。 7、基準(zhǔn)試劑 基準(zhǔn)化合物必須是測試精度范圍內(nèi)的純物質(zhì)；基準(zhǔn)溶液被用于檢驗和校準(zhǔn)當(dāng)量溶液、pH緩沖溶液；只有這樣的物質(zhì)才能反映檢驗測定當(dāng)量溶液。 8、衍生化試劑 衍生法指借助化學(xué)反應(yīng)將待測組份接上某種特定基團，從而改善其檢測靈敏度和分離效果的方法。利用化學(xué)衍生反應(yīng)達到改變化合物特性的目的，使其更適合于特定分析的過程，在儀器分析中被廣泛應(yīng)用。 氣相色譜用：為了增加樣品的揮發(fā)度或提高檢測靈敏度； 高效液相色譜用：與樣品組份進行化學(xué)反應(yīng)，反應(yīng)的產(chǎn)物有利于色譜檢測或分離。 紫外光譜用：使被測化合物帶上特定基團，具有紫外吸收。 紅外光譜用：使被測化合物鍵合特定基團，具有紅外吸收。 熒光檢測用：帶上熒光發(fā)色基團。
1、回收率低
判斷方法:空白溶劑加標(biāo)，回收上樣液和淋洗液，若實際檢測濃度超過含量的5%，說明保留不足。
（2）目標(biāo)洗脫不完全
判斷方法:空白溶劑加標(biāo)，回收上樣液和淋洗液，沒有檢出目標(biāo)物;但回收洗脫液，回收率也不高。
（3）其他原因
判斷方法：空白溶劑加標(biāo)，回收上樣液，淋洗液沒有檢出目標(biāo)物;回收洗脫液，回收率正常。
①改變預(yù)處理方法 ②改變淋洗液和洗脫液的強度 ③選擇合適的作用小柱 ④正確進行SPE操作 4、流速過快過慢的原因及對策
吸附劑主要可根據(jù)目標(biāo)化合物性質(zhì)和基質(zhì)性質(zhì)進行選擇。 吸附劑的選擇則大致可由以上兩種方式進行選擇，對于具體實例，可依據(jù)“區(qū)分目標(biāo)化合物和主要干擾物”的原則進行選擇。
液相色譜柱的選擇
化合物分子量>2000Da時： 
在自動進樣器上使用劣質(zhì)樣品瓶和密封件的害處：
6、隔墊與樣品和溶劑的兼容性
*PTFE/硅橡膠/PTFE隔墊與PTFE隔墊具有相同的化學(xué)兼容性，直至被刺穿
首先，就是方法的適用性，不同的實驗方法，選擇不同的試劑與耗材，這是選擇的前提，其次，就要考慮質(zhì)量和價格，我們后說質(zhì)量與價格，不是說他們不重要，而這是一個先后的順序，三者同樣重要，少考慮了哪一樣都將是不明智的選擇。
化學(xué)試劑的選用
+
化學(xué)試劑是進行化學(xué)研究、成分分析的相對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是科技進步的重要條件，廣泛用于物質(zhì)的合成、分離、定性和定量分析。在工廠、學(xué)校、醫(yī)院和研究所的日常工作中，都離不開化學(xué)試劑。
首先，我們要了解實驗的化學(xué)試劑的分類。
國標(biāo)試劑分類介紹
試劑級（RG，紅標(biāo)簽）：作為試劑的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)品。
基準(zhǔn)試劑（JZ，綠標(biāo)簽）：作為基準(zhǔn)物質(zhì)，標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液。
優(yōu)級純（GR，綠標(biāo)簽）：主成分含量很高、純度很高，適用于精確分析和研究工作，有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。
分析純（AR，紅標(biāo)簽）：主成分含量很高、純度較高，干擾雜質(zhì)很低，適用于工業(yè)分析及化學(xué)實驗。
化學(xué)純（CP，藍(lán)標(biāo)簽）：主成分含量高、純度較高，存在干擾雜質(zhì)，適用于化學(xué)實驗和合成制備。
實驗純（LR，黃標(biāo)簽）：主成分含量高，純度較差，雜質(zhì)含量不做選擇，只適用于一般化學(xué)實驗和合成制備。
教學(xué)試劑：可以滿足學(xué)生教學(xué)目的，不至于造成化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象偏差的一類試劑。
指定級（ZD）：該類試劑是按照用戶要求的質(zhì)量控制指標(biāo)，為特定用戶訂做的化學(xué)試劑。
高純試劑（EP）：包括超純、特純、高純、光譜純，配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。此類試劑質(zhì)量注重的是在特定方法分析過程中可能引起分析結(jié)果偏差，并對成分分析或含量分析產(chǎn)生干擾的雜質(zhì)含量，但對主含量不做很高要求。
色譜純（GC）：氣相色譜分析專用。質(zhì)量指標(biāo)注重干擾氣相色譜峰的雜質(zhì)。主成分含量高。
色譜純（LC）：液相色譜分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。質(zhì)量指標(biāo)注重干擾液相色譜峰的雜質(zhì)。主成分含量高。
指示劑（ID）：配制指示溶液用。質(zhì)量指標(biāo)為變色范圍和變色敏感程度。可替代CP，也適用于有機合成用。
生化試劑（BR）：配制生物化學(xué)檢驗試液和生化合成。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)。可替代指示劑，可用于有機合成。
生物染色劑（BS）：配制微生物標(biāo)本染色液。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)�？商娲甘緞�，可用于有機合成。
光譜純（SP）：用于光譜分析。分別適用于分光光度計標(biāo)準(zhǔn)品、原子吸收光譜標(biāo)準(zhǔn)品、原子發(fā)射光譜標(biāo)準(zhǔn)品。
合成試劑：就是在標(biāo)明成分主含量的前提下，嚴(yán)格給出該產(chǎn)品的有關(guān)各種物理常數(shù)的一類化學(xué)試劑。
其次，我們必須考慮試劑的具體用途。
化學(xué)試劑的選用應(yīng)以分析要求為主，包括分析任務(wù)、分析方法、對結(jié)果準(zhǔn)確等為依據(jù)，來選用不同等級的試劑。如痕量分析要選用高純或優(yōu)級純試劑，以降低空白值和避免雜質(zhì)干擾。在以大量酸堿進行樣品處理時，其酸堿也應(yīng)選擇優(yōu)級化學(xué)純。同時，對所用的純水的制取方法和玻璃儀器的洗滌方式也應(yīng)有特殊要求。作仲裁分析也常選用優(yōu)級純、分析純試劑。一般車間控制分析，選用分析純、化學(xué)純試劑。某些制備實驗、冷卻浴或加熱的藥品，可選用工業(yè)品。
不同分析方法對試劑有不同要求。如絡(luò)合滴定，最好用分析純試劑和去離子水，否則因試劑后水中的雜質(zhì)金屬離子封閉指示劑，使滴定終點難以觀察。
另一方面，GC-MS，HPLC，UPLC和 LC-MS等應(yīng)用，需要特定的或高度純化的溶劑級別，以滿足痕量分析的嚴(yán)格性能要求。這樣也保證用戶得到最高的儀器靈敏度，同時避免因使用低質(zhì)量溶劑導(dǎo)致儀器中有殘留引起的停機清洗。使用高質(zhì)量溶劑的好處還包括減少重復(fù)工作、提高精密度和準(zhǔn)確度、提高儀器性能、增加重現(xiàn)性以及減少儀器配件和提高分析效率等。盡管這些高純度溶劑的成本會比低級別的產(chǎn)品稍高，但這些成本可以從上述好處中得到抵消。
以下是幾種常見的實驗室化學(xué)試劑用途：
1、HPLC級高純液相色譜溶劑
低紫外吸收 非揮發(fā)性物質(zhì)、游離酸、游離堿和水份含量低 可用于熒光檢測
極低的農(nóng)殘背景值（≤5 pg/ml ），不揮發(fā)性組分極少 GC控制（ECD-PND檢測）質(zhì)量可靠，穩(wěn)定性高 適用于分析有機氯農(nóng)藥、有機磷農(nóng)藥、多氯聯(lián)苯 （PCBs）及其他用GC/ECD和GC/PND檢測的化合物 符合各種殺蟲劑殘留量分析的要求和對低揮發(fā)性雜質(zhì)的要求
低紫外吸收、低紅外吸收 雜質(zhì)含量低 適用于UV、IR光譜分析
最后，綜合考量質(zhì)量與價格。
雖然化學(xué)試劑必須按照國家標(biāo)準(zhǔn)進行檢驗合格后才能出廠銷售，但不同廠家原料和工業(yè)生產(chǎn)的試劑在性能上有時有顯著差異。甚至同一廠家，不同的同一類試劑，其性質(zhì)也很難完全一致，因此，在某些要求較高的分析中，不僅要考慮試劑的等級，還應(yīng)注意生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號等。
說完了實驗室試劑的選取辦法，接下來咱們再聊一聊如何選取實驗室耗材，因為實驗室耗材眾多，只選取其中幾個常見的實驗室耗材。
固相萃取柱的選擇
+
關(guān)于萃取柱使用時的常見問題，一般有回收率低、重現(xiàn)性差、凈化效果不佳、流速過快過慢這幾大方面，下面我們一一說明：
原因分析:
（1）目標(biāo)物在填料上保留不足
（2）目標(biāo)洗脫不完全
（3）其他原因
2、重現(xiàn)性差的原因及對策
3、凈化效果不佳的對策
所以，選擇合適的萃取柱對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性有著至關(guān)重要的作用。一般從兩方面進行考量：吸附劑和柱規(guī)格。適宜的吸附填料可以讓干擾物質(zhì)與目標(biāo)組分得到良好的分離，并滿足回收要求。而吸附劑所能吸附的化合物質(zhì)量是有限的，一旦樣品量過大，則會出現(xiàn)“超載”，使得目標(biāo)物直接“穿透”萃取柱不被保留。
根據(jù)基質(zhì)性質(zhì)選擇
選擇出適宜的吸附劑后，還需要根據(jù)檢定所需的樣品量選擇合適的柱規(guī)格。由于萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質(zhì)量是有限的，一旦超過了這個數(shù)值，目標(biāo)物就不能被有效保留，使得洗脫效果大打折扣。因此，根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格，是很有必要的。
以下給出了萃取柱的上樣容量及洗脫參數(shù)，以供參考:
液相色譜柱的選擇
+
選擇色譜柱時應(yīng)考慮不同色譜柱參數(shù)的影響，以下內(nèi)容對色譜柱的參數(shù)進行分析。
HPLC色譜分離模式的選擇
在建立化合物的HPLC方法時，可以首先根據(jù)化合物的分子量大小，極性大小及PKa，選擇合適的分離模式，在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去再去優(yōu)化同類的色譜柱及流動相�；衔锓肿恿�<2000Da時，按下圖來選擇。
在實際工作中所涉及的化合物絕大部分都可以使用反相色譜進行分離，下面先分析反相鍵合相色譜柱性能的影響因素，只有了解影響色譜柱性能的因素，才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
影響色譜柱性能的物理參數(shù)
1、硅膠純度
硅膠純度和殘留金屬離子濃度，硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形，硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形，易發(fā)生拖尾。
2、色譜柱尺寸
填料床的長度和內(nèi)徑，增加色譜柱長度，可以在一定程度上提高柱效，但也會升高壓力和導(dǎo)致峰展寬；寬柱徑，提高載樣量，但也會增加橫向擴散，同樣會導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑，可減少橫向擴散，但壓力較大，對系統(tǒng)要求較高。
3、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻，不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動相線速度不均勻，容易譜帶展寬；平均顆粒直徑，粒徑越小，柱效越高，柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低，壓力越大。
4、顆粒表面積
顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/g表示，相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力，更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài)，更適合梯度洗脫程序。
5、孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍是80~3000，大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間，改善分離，所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
影響色譜柱性能的化學(xué)因素
1、鍵合類型及鍵合相
鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合，這種鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率，縮短柱平衡時間；聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連，這種鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性，增加載樣量。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為。
2、碳覆蓋率
高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性，但分析時間長。
3、封端
硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基，如圖封端可以減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)，改善保留和峰行，這對于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術(shù)也會直接影響色譜柱的效能。
反相鍵合相色譜柱的選擇
1、重現(xiàn)國標(biāo)文獻中方法
選擇色譜柱粒徑、比表面積、基質(zhì)表面特性、鍵合類型等相似的色譜柱，或者利用USP網(wǎng)站及一些色譜柱選擇軟件，如“column selector for acd/chemsketch”來查詢相似系數(shù)，選擇相似系數(shù)高的色譜柱。
2、建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據(jù)目標(biāo)分析物的分子量大小、溶解性、Pka值，以及分離要求、儀器、成本等各方面來選擇色譜柱。
(1) 根據(jù)分離目的選色譜柱，對映體分離常選擇手性柱，離子化色譜可選擇離子柱，蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱，一般的小分子化合物可選擇普通反相柱，如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2) 根據(jù)實際需求和設(shè)備選擇填料粒徑，普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱，而UPLC則常使用1.7μm—3.5μm的色譜柱。
(3) 比表面積，高比表面積有助于分離，低比表面積更適合梯度洗脫程序。
(4) 孔徑，大分子化合物適合大孔徑，在保證比表面積的前提下，選擇孔徑大的。
(5) 鍵合相的選擇
-
直鏈烷基鍵合相C18和C8適合中等極性化合物，對于極性化合物可以選用硅羥基未封端或特殊封端的C18柱；或者鍵入極性基團的C18柱；
下表是常見的化學(xué)鍵合相及其運用范圍：
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目，根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇，但由于各個儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異，即使是C18柱，同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低PH值的、耐受高溫、耐受純水相和適合堿性分離等等。所以在使用色譜柱之前需要好好閱讀產(chǎn)品說明手冊，才能找到滿意的分離條件。
樣品瓶和隔墊的選擇
+
樣品瓶質(zhì)量的重要性
如果不嚴(yán)格控制公差，自動進樣器樣品瓶的標(biāo)示尺寸及壁重可能有所不同，這會影響樣品瓶中的樣品容積，龍其對少量樣品來說非常重要，我們嚴(yán)格的公差控制貫穿于整個制造過程中，從最初設(shè)計到最后的光電掃描檢查過程，確保每一個樣品瓶和瓶蓋規(guī)格的準(zhǔn)確性。
隔墊質(zhì)量的重要性
防了防止污染，避免針頭和儀器損壞，正確的隔墊選擇是至關(guān)重要的，在選擇時應(yīng)該注意的問題：
1、溫度控制
在較高溫度下隔墊會發(fā)生降解而導(dǎo)致樣品污染，橡膠隔墊僅在90℃以下穩(wěn)定，因此不適用于高溫應(yīng)用。通常以聚四氟乙烯和優(yōu)質(zhì)硅橡膠或者超純硅膠作為材料的隔墊是用于各種溫度的最佳選擇。
2、碎屑
當(dāng)針頭直徑相對隔墊太大或隔墊材料不能承受多次進樣時就會產(chǎn)生碎屑，此時，隔墊材料會脫落進入樣品瓶并污染樣品。以下是如何防止碎屑的方法：
a. 選擇一種PTFE內(nèi)襯的隔墊以防止隔墊材料進入樣品中；
b. 確保針頭未損壞，考慮使用側(cè)孔針頭替代錐形針頭；
c. 使用預(yù)穿孔隔墊幾乎可以完全消除碎屑。
d. 對于高敏感性樣品，推薦使用聚四氟乙烯（PTFE）隔墊，因為PTFE層可作為一種耐化學(xué)腐蝕的屏障。
3、再密封性
再密封性是選擇隔墊需考慮的一個重要因素。PTFE/紅色橡膠隔墊不推薦用于多次進樣或需要儲存用于以后分析的樣品。當(dāng)進樣之間需要較長時間或添加任何類型的標(biāo)樣時，PTFE/硅橡膠/PTFE總是最佳選擇。
4、易刺穿性
通常，硅橡膠隔墊比紅色橡膠和丁基橡膠隔墊更易穿刺。預(yù)穿孔隔墊是最佳選擇，最易穿刺并能減少碎屑的可能。
5、瓶蓋和隔墊兼容性
6、隔墊與樣品和溶劑的兼容性
一次性針式過濾器
+
選擇不同種類的針式過濾器對流動相及樣品進行過濾達到澄清除菌、去除雜質(zhì)顆粒的作用。對保護色譜系統(tǒng)及色譜柱具有重要意義。
針式濾器的選擇主要可以從以下三個方面進行考量：外殼、規(guī)格，以及濾膜。
1、外殼
一般外殼為高壓聚丙烯（PP），耐高溫，不泄漏，不需換膜和清洗，省去繁雜費時的準(zhǔn)備工作，是過濾HPLC、GC小量樣品首選產(chǎn)品。
2、規(guī)格
直徑：常用Φ13mm、Φ25mm、Φ33mm三種。即樣品量2-10ml選用Φ13μm，樣品量10-100ml選用Φ25μm，大于100ml選用Φ33μm。
孔徑：0.22μm、0.45μm
3、濾膜的特性及應(yīng)用
（1）水系膜（混合纖維素酯CN-CA）
特性：孔徑均勻、孔隙率高、無介質(zhì)脫落、質(zhì)地薄、阻力小、濾速快、成本低，但不耐有機溶液及強酸強堿。
應(yīng)用：飲用水、地表水、井水等除菌過濾溶液中微粒及油類不溶物的分析、水質(zhì)污染指數(shù)測定、氣體、油類、飲料、酒等微粒和細(xì)菌過濾。為前處理過濾中最為廣泛使用的濾膜之一。
（2）尼龍膜（聚酰胺NYLON）
特性：耐溫性能好、可耐121°C、飽和蒸汽高壓消毒30分鐘、最高工作溫度60°C，化學(xué)穩(wěn)定性好，能耐稀酸稀堿等多種有機無機化合物、溶劑。
應(yīng)用：適用于電子、微電子、半導(dǎo)體工業(yè)水過濾組織培養(yǎng)基、藥液、飲料、高純化學(xué)品、水及有機溶液流動相的過濾。
（3）PVDF膜（聚偏氟乙烯）
特性：膜機械強度高、抗張強度好、具有良好的耐熱性及化學(xué)穩(wěn)定性、蛋白吸附極低、具較強的疏水性。
應(yīng)用：氣體及蒸汽過濾、高溫液體過濾、組織培養(yǎng)基、添加劑等除菌過濾、溶劑和化學(xué)原料凈化過濾。
（4）PTFE（聚四氟乙烯）
特性：具有廣泛的化學(xué)兼容性、耐溫性好、抗強酸強堿、化學(xué)腐蝕性較強的溶劑及氧化劑。
應(yīng)用：化工、醫(yī)藥、環(huán)保、電子、食品、能源等領(lǐng)域，幾乎能過濾所有的有機溶液。
