緩沖液 |
使用液 |
濃貯存液(每升) |
tris-乙酸(tae) |
1×:0.04mol/l tris-乙酸 |
50×:242g tris堿 |
0.001mol/l edta |
57.1ml冰乙酸 | |
100ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
tris-磷酸(tpe) |
1×:0.09mol/l tris-磷酸 |
10×:10g tris堿 |
0.002mol/l edta |
15.5ml85%磷酸(1.679g/ml) | |
40ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
tris-硼酸(tbe)a |
0.5×0.045mol/l tris-硼酸 |
5×:54g tris堿 |
0.001mol/l edta |
27.5硼酸 | |
20ml 0.5mol/l edta(ph8.0) | ||
堿性緩沖液b |
1×:50mmol/l naoh |
1×:5ml 10mol/l naoh |
1mmol/l edta |
2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0) | |
tris-甘氨酸c |
1×:25mmol/l tris |
5×:15.1g tris |
250mmol/l 甘氨酸 |
94g 苷氨酸(電泳級(jí))(ph8.3) | |
0.1% sds |
50ml 10% sds(電泳級(jí)) |
說(shuō)明:
①tbe溶液長(zhǎng)時(shí)間存放后會(huì)形成沉淀物,為避免這一問(wèn)題,可在室溫下用玻璃瓶保存5×溶液,出現(xiàn)沉淀后則予以廢棄。
以片都以1×tbe作為使用液(即1:5稀釋濃貯液)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。但0.5×的使用液已具備足夠的緩沖容量。目前幾乎所有的瓊脂糖膠電泳都以1:10稀釋的貯存液作為使用液。
進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠垂直槽的緩沖液槽較小, 故通過(guò)緩沖液的電流量通常較大,需要使用1×tbe以提供足夠的緩沖容量。
②堿性電泳緩沖液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。
③tris-甘氨酸緩沖液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2×sds凝膠加樣緩沖液:
100mmol/l tris·hcl(6.8)
200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)
4%sds(電泳級(jí))
0.2%溴酚藍(lán)
20%甘油
不含dtt的2×sds凝膠加樣緩沖液可保存于室溫,應(yīng)在臨用前取1mol/l貯存液現(xiàn)加于上述緩沖液中。