培養(yǎng)基(culture medium)是由人工方法配制而成的,專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品。培養(yǎng)基一般pH為7.2~7.6,少數(shù)的細(xì)菌按生長(zhǎng)要求調(diào)整pH偏酸或偏堿。許多細(xì)菌在代謝過程中分解糖類產(chǎn)酸,故常在培養(yǎng)基中加入緩沖劑,以保持穩(wěn)定的pH。培養(yǎng)基制成后必須經(jīng)滅菌處理。
培養(yǎng)基按其營(yíng)養(yǎng)組成和用途不同,分為以下幾類:
1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
基礎(chǔ)培養(yǎng)基(basic medium)含有多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分。它是配制特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ),也可作為一般培養(yǎng)基用。如營(yíng)養(yǎng)肉湯(nutrient broth)、營(yíng)養(yǎng)瓊脂(nutrient agar)、蛋白胨水等。
2.增菌培養(yǎng)基
若了解某種細(xì)菌的特殊營(yíng)養(yǎng)要求,可配制出適合這種細(xì)菌而不適合其他細(xì)菌生長(zhǎng)的增菌培養(yǎng)基(enrichment medium)在這種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的是營(yíng)養(yǎng)要求相同的細(xì)菌群。它包括通用增菌培養(yǎng)基和專用增菌培養(yǎng)基,前者為基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加合適的生長(zhǎng)因子或微量元素等,以促使某些特殊細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖,例如鏈球菌、肺炎鏈球菌需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng);后者又稱為選擇性增菌培養(yǎng)基,即除固有的營(yíng)養(yǎng)成分外,再添加特殊抑制劑,有利于目的菌的生長(zhǎng)繁殖,如堿性蛋白胨水用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng)。
3.選擇培養(yǎng)基
在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使之抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng),而有利于另一些細(xì)菌生長(zhǎng),從而將后者從混雜的標(biāo)本中分離出來,這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基(selective medium)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌和志賀菌容易分離到。若在培養(yǎng)基中加入抗生素,也可起到選擇作用。實(shí)際上有些選擇培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基之間的界限并不十分嚴(yán)格。
4.鑒別培養(yǎng)基
用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細(xì)菌種類的培養(yǎng)基稱為鑒別培養(yǎng)基(differential medium)。利用各種細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,一般不加抑菌劑,觀察細(xì)菌在其中生長(zhǎng)后對(duì)底物的作用如何,從而鑒別細(xì)菌。如常用的糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂等。也有一些培養(yǎng)基將選擇和鑒別功能結(jié)合在一起,在選擇的同時(shí),起一定的鑒別作用,如SS瓊脂,其中所加的底物乳糖和指示劑中性紅就起到鑒別作用。
5.厭氧培養(yǎng)基
專供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,稱為厭氧培養(yǎng)基(anaerobic medium)。這種培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分豐富,含有特殊生長(zhǎng)因子,氧化還原電勢(shì)低,并加入亞甲藍(lán)作為氧化還原指示劑。其中心腦浸液和肝塊、肉渣含有不飽和脂肪酸,能吸收培養(yǎng)基中的氧;硫乙醇酸鹽和半胱氨酸是較強(qiáng)的還原劑;維生素K氯化血紅素可以促進(jìn)某些類桿菌的生長(zhǎng)。常用的有庖肉培養(yǎng)基(cooked meat medium)硫乙醇酸鹽肉湯等,并在液體培養(yǎng)基表面加入凡士林或液狀石蠟以隔絕空氣。
此外,還可根據(jù)對(duì)培養(yǎng)基成分了解的程度將其分為兩大類:化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基(defined medium),又稱為合成培養(yǎng)基(synthetic medium);化學(xué)成分不確定的培養(yǎng)基(undefined medium),又稱天然培養(yǎng)基(complex medium)也可根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)的不同分為液體、固體和半固體培養(yǎng)基三大類。在液體培養(yǎng)基中加入15g/L的瓊脂粉,凝固成固體培養(yǎng)基;瓊脂粉含量在3~5g/L時(shí),則為半固體培養(yǎng)基。瓊脂在培養(yǎng)基中起賦形劑作用不具營(yíng)養(yǎng)意義。液體培養(yǎng)基可用于大量繁殖細(xì)菌,但必須種入純種細(xì)菌;固體培養(yǎng)基常用于細(xì)菌的分離和純化;半固體培養(yǎng)基則用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力和短期保存細(xì)菌。
——《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》第9版