最近網上一條「如何定量吸取液體?」的帖子引起熱烈討論。原因是博主 po 出 100 年前的移液方式——用嘴巴吸,在眾多手動自動、單孔連排移液槍圖片的中間,顯得尤為突出和滑稽。
不過更讓人震驚的是評論區的精彩發言,直到現在仍然有老師同學在用這個「傳統」的操作。
其實「嘴巴移液」已延續百年,因為這樣操作可以在一定程度上做到「又準又穩」。但用嘴巴移液這樣的操作,肯定是存在風險的,比如:1893 年一位內科醫生在操作時因為意外而吸入了傷寒桿菌的培養液,不幸中招。
現在,大多數實驗室都配備了移液槍,更加安全更加精準。但別以為這樣就結束了,因為移液不準,會引發太大的災難——實驗數據重現「危機」,實驗數據無法復制,代表了前期努力全部白費!比如:PCR 實驗做了三次,每次結果都不一樣;WB,樣本參數都相同,每次趨勢卻各不同;實驗數據重現不出來,輸在起跑線上……
因此,各大移液器品牌均建議每年至少進行一次預防性維護且在保養間隔期間進行常規性能驗證,以保持吸液和分液的準確度。那么,日常實驗中如何開展檢查、清潔消毒、正確移液等才能提升實驗數據穩定性,讓實驗一遍過呢?
秘籍內容一睹為快:
1. 選擇優質移液槍
若要實現可重現移液,請選擇在整個移液循環(吸液和分液)中都準確無誤的優質移液槍。
2. 選擇正確吸頭
移液槍吸頭是樣品和移液槍之間的唯一接觸點,因此所選的移液槍吸頭類型在液體處理過程中發揮著重要作用。
● 未滅菌吸頭適用于無需擔心污染或不會影響結果的實驗。
● 無菌吸頭適用于細胞培養和分子檢測等敏感實驗,可防止污染物影響結果,進而影響實驗的可重現性。
● 無菌濾芯吸頭可減少氣霧形成、保護移液槍套柄在使用過程中免受污染,從而多加一層保護。
3. 改進移液技術
選擇正確維護且經驗證的優質移液槍,同時搭配原廠吸頭,還可通過改善操作人員技術來提高數據重現性。
以移液槍標稱值上限進行操作
大多數移液槍的正常量程為標稱容量的 10% 至 100%。
適當的吸頭入液
微量移液槍的吸頭入液深度應當為 1~2 mm,大容量移液槍(200~2 000 μL) 的吸頭入液深度高達 6~10 mm。
提高吸液性能
在使用過程中保持移液槍角度垂直、移液節奏一致、活塞操作迅速流暢。
提高分液性能
較為常用的一種分液技術是將吸頭接觸容器內壁的側面。如果溶液溫度為室溫,則潤洗吸頭兩到三次可在吸頭內壁形成一層液膜。如果溶液溫度低于4℃ 和高于 37℃,則應避免潤洗吸頭。
創造適合的環境條件
移液環境溫度應保持穩定。移液的理想溫度為 21.5℃±1℃,與校準的理想溫度相同。
文章(文字)來源:丁香學術
不過更讓人震驚的是評論區的精彩發言,直到現在仍然有老師同學在用這個「傳統」的操作。
其實「嘴巴移液」已延續百年,因為這樣操作可以在一定程度上做到「又準又穩」。但用嘴巴移液這樣的操作,肯定是存在風險的,比如:1893 年一位內科醫生在操作時因為意外而吸入了傷寒桿菌的培養液,不幸中招。
現在,大多數實驗室都配備了移液槍,更加安全更加精準。但別以為這樣就結束了,因為移液不準,會引發太大的災難——實驗數據重現「危機」,實驗數據無法復制,代表了前期努力全部白費!比如:PCR 實驗做了三次,每次結果都不一樣;WB,樣本參數都相同,每次趨勢卻各不同;實驗數據重現不出來,輸在起跑線上……
因此,各大移液器品牌均建議每年至少進行一次預防性維護且在保養間隔期間進行常規性能驗證,以保持吸液和分液的準確度。那么,日常實驗中如何開展檢查、清潔消毒、正確移液等才能提升實驗數據穩定性,讓實驗一遍過呢?
秘籍內容一睹為快:
1. 選擇優質移液槍
若要實現可重現移液,請選擇在整個移液循環(吸液和分液)中都準確無誤的優質移液槍。
2. 選擇正確吸頭
移液槍吸頭是樣品和移液槍之間的唯一接觸點,因此所選的移液槍吸頭類型在液體處理過程中發揮著重要作用。
● 未滅菌吸頭適用于無需擔心污染或不會影響結果的實驗。
● 無菌吸頭適用于細胞培養和分子檢測等敏感實驗,可防止污染物影響結果,進而影響實驗的可重現性。
● 無菌濾芯吸頭可減少氣霧形成、保護移液槍套柄在使用過程中免受污染,從而多加一層保護。
3. 改進移液技術
選擇正確維護且經驗證的優質移液槍,同時搭配原廠吸頭,還可通過改善操作人員技術來提高數據重現性。
以移液槍標稱值上限進行操作
大多數移液槍的正常量程為標稱容量的 10% 至 100%。
適當的吸頭入液
微量移液槍的吸頭入液深度應當為 1~2 mm,大容量移液槍(200~2 000 μL) 的吸頭入液深度高達 6~10 mm。
提高吸液性能
在使用過程中保持移液槍角度垂直、移液節奏一致、活塞操作迅速流暢。
提高分液性能
較為常用的一種分液技術是將吸頭接觸容器內壁的側面。如果溶液溫度為室溫,則潤洗吸頭兩到三次可在吸頭內壁形成一層液膜。如果溶液溫度低于4℃ 和高于 37℃,則應避免潤洗吸頭。
創造適合的環境條件
移液環境溫度應保持穩定。移液的理想溫度為 21.5℃±1℃,與校準的理想溫度相同。
文章(文字)來源:丁香學術