微量加樣器(移液器)最早出現(xiàn)于1956年,由德國生理化學(xué)研究所的科學(xué)家Schnitger發(fā)明,其后,在1958年德國Eppendorf公司開始生產(chǎn)按鈕式微量加樣器,成為世界上第一家生產(chǎn)微量加樣器的公司。這些微量加樣器的吸液范圍在1—1000~1之間,適用于臨床常規(guī)化學(xué)實驗室使用。微量加樣器發(fā)展到今天,不但加樣更為精確,而且品種也多種多樣,如微量分配器、多通道微量加樣器等,其加樣的物理學(xué)原理有下面兩種:①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣;②使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。上述兩種不同原理的微量加樣器有其不同的特定應(yīng)用范圍。
一、空氣墊加樣器
活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,加樣體積的范圍在小于1ul至l0ml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開來,空氣墊通過加樣器活塞的彈簧樣運動而移動,進而帶動吸頭中的液體,死體積和移液吸頭中高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。因此,活塞移動的體積必須比所希望吸取的體積要大約2%~4%,溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過對空氣墊加樣器進行結(jié)構(gòu)上的改良而降低,使得在正常情況下不至于影響加樣的準確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個重要組成部分,其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對加樣的準確度有很大的影響。
二、活塞正移動加樣器
以活塞正移動為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,因此,在空氣墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,活塞正移動加樣器可以應(yīng)用,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液體;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定中,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,最好使用活塞正移動加樣器。活塞正移動加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同,其內(nèi)含一個可與加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動加樣器的廠家配套生產(chǎn),不能使用通常的吸頭或不同廠家的吸頭。
三、多通道加樣器、電子加樣器和分配器
多通道加樣器、電子加樣器和分配器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道,與8X12=96孔微孔板一致。多通道加樣器的使用不但可減少實驗操作人員的加樣操作次數(shù),而且可提高加樣的精密度。電子加樣器和分配器為半自動加樣系統(tǒng),電子加樣器最大的優(yōu)點是其具有很高的加樣重復(fù)性,應(yīng)用范圍廣。