[ 目的 ] 為了檢驗海參營養素是否具有抗疲勞作用,進行了此項研究。
[ 方法 ] 首先進行劑量分組,按推薦人體日攝入量( 2g/60kg 體重)的 30 倍、 20 倍、 10 倍設計,分 3 個實驗組及蒸餾水對照組。管飼法染毒。動物實驗室溫度( 25 ± 2 )℃,每日稱體重后灌胃 1 次,連續 30 天后分別測定以下各項抗疲勞作用指標。小鼠負重游泳試驗:末次給予受試物 30mim 后,稱體重,鼠尾根部負責 5 %體重鉛皮,置于游泳箱中游泳。記錄自游泳開始至死亡時間( min );肝素原測定(蒽酮法):末次給予受試物 30min 后處死,取肝臟,稱取 200mg 。加入 4.0mlTCA ,每管勻漿 1min ,將勻漿液 30r/min 離心 15min ,把上清液移至另一試管內,在沉淀中再加入 4.0mlTCA ,勻漿 1min ,再離心 15min 。合并混勻兩次上清液。取 1.0ml 上清液放入 10ml 離心管中,每管中加入 95 %乙醇 4.0ml ,充分混勻,加塞,室溫下豎立放置過液,沉淀完全后, 3000r/min 離心 15min ,棄去上清液,使試管倒立 10min 。用 2.0ml 蒸餾水溶解肝糖原,將 10.0ml 蒽酮試劑用力加入各管,放入沸水浴 15min ,再移至冷水浴,冷卻至室溫,在波長 620nm 處比色,用空白管調零,計算肝糖原含量。血乳酸測定:末次給予受試物 30min 后,尾根部負重,置于游泳箱中游泳。第 60min 取出,靜止 15min ,摘眼球采血。于 5ml 試管中加入 0.481 % NaF 溶液,準確吸取全血 20ul 加入試管底部,用試管上清液清洗微量吸管數次,再加入 1.5ml 蛋白沉淀劑,振蕩混勻。于 3000r/min 離心 10min ,取上清液 0.5ml 加入沉淀管,取乳酸標準應用液 0.5ml 加入標準管,取沉淀劑 -NaF 混合液 0.5ml 加入空白管,向各管中加入 0.1ml 4% CuSO 4 ,再加入 3.0ml 濃硫酸,充分混勻,置沸水浴加熱 5min ,取出放入冰水浴冷卻 10min ,向各管中加入 0.1ml 1.5% 對羥基聯苯搖勻,置( 30 ± 1 )℃水浴 30min ,再放入沸水浴加熱 90s ,取出冷卻至室溫,在波長 560nm 處用 5mm 光徑比色皿比色,空白管調零,計算血乳酸含量。血清尿素氮、血清乳酸脫氫酶、血糖測定,按試劑盒使用說明操作,用 COBAS MIRA 全自動化分析儀測定。
[ 結果 ] 海參營養素能延長小鼠的游泳時間,增加小鼠肝糖原含量,減少小鼠血乳酸含量,對小鼠血清尿素氮、乳酸脫氫酶、血糖作用不明顯;對實驗動物的體重增長無明顯影響。
[ 結論 ] 在本實驗條件下,表明海參營養素可能具有一定的抗疲勞作用。