近年來各國學者對不同品種的海參進行了廣泛的化學和藥理作用研究,我們從新鮮采集的玉足海參內臟提取分離到海參素,證明有抗腫瘤的抗真菌作用。臨床上用于治療皮膚癬菌病,取得較好的療效,現以消癬凈的商品名進行生產。從玉足海參干燥體壁提取分離多糖成份,具有提高機體免疫功能,抗腫瘤和抗血凝等作用。現將玉足海參內臟的藥用研究結果報道如下。
一、 材料來源
玉足海參,采集于廣東省惠陽沃頭珍珠養殖場附近海域,水深1-2米,捕撈的活海參經海水靜養1天,以排去大量的泥沙,再經解剖分離為體壁和內臟(包括居維氏體),體壁曬干,內臟用70-80%乙醇固定備用。
二、 海參素的提取分離
將去凈泥沙的海參內臟,經剪碎后,用高速搗碎機搗碎(10000轉/分×3分鐘),以70-80%乙醇冷浸3次,每次1周左右時間,減壓回收乙醇至浸膏狀(棕紅色),用甲醇反復多次溶解浸膏,除去不溶物,甲醇組份減壓回收甲醇浸膏狀,復用水溶解,濾去不溶物,水溶液用石油醚提取3次,脫脂后的水溶液用正丁醇提取若干次,合并正丁醇層,用無水硫酸鈉干燥,過濾去硫酸鈉,減壓回收正丁醇至干,得淡黃色粉末,稱海參素。該物質具有明顯的醋酐――濃硫酸反應,α-荼酚反應,屬皂甙類化合物。
用硅膠柱層析對海參素進行單離,硅膠粒度為100-200目,洗脫劑用不同比例的氯仿:甲醇:水,每50ml收集1份,用硅膠板層檢查收集液(展開劑為氯仿:甲醇=2:1,顯色劑為5%磷鉬酸乙醇液),相同斑點者合并。回收溶劑,得到海參素I、IV、V、VI。
三、 海參素I的初步鑒定
從玉足海參內臟分離的海參皂甙,以海參素I的含量最高,對海參素I進行了初步的化學鑒定工作,證明海參素I屬于三萜皂甙,水解后分離-單體甙元,經旋光、紅外、紫外、質譜和H1-核磁共振測定,與已知的甙元22,25-oxidoholothurinogenin相符。
用海參素B標準樣品作對照,海參素I的硅膠薄層層析之Rf值與對照品相同,紅外光譜也具有γ-內脂吸收帶(1750cm-1)及甙的特征吸收(3389cm-1,1060cm-1),與文獻報道的海參素B的紅外特征吸收一致,因此初步認為海參素I的化學結構與海參素B的化學結構相同。
四、 海參素對體外培養的子宮頸上皮癌細胞的作用
海參素I對子宮頸上皮癌細胞有明顯的抑制作用,海參素I(10μg/ml)抑制率為100%,陽性對照藥長春新鹼(10μg/ml)抑制率為87.3%。海參素I對Hela細胞的抑制作用強過長春新鹼。
海參素I對正常人胚肺細胞的作用,當濃度為0.1mg/ml時,抑制率僅10.34%,而長春新鹼在同一濃度時,對正常人胚肺細胞抑制率達51.25%。海參素I對正常細胞毒作用小于長春新鹼。
五、 海參素對小鼠S-180的抑瘤作用
海參素提取物劑量為50mg/kg,腹腔給藥,對小鼠S-100的抑瘤率為46.7%。
海參素I劑量為2mg/kg,腹腔給藥,對小鼠S-180的抑瘤率為57.7%。
六、 海參素的抗真菌作用
海參素有較強的抗真菌作用,當濃度為10-40μg/ml時,對黃癬菌,斷發癬菌,新型隱球菌等均有抑制生長作用。試用于治療皮膚癬菌113例,得到較好的療效。