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篩查文庫(kù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
用放射性同位素或非放射性化學(xué)物質(zhì)標(biāo)記探針(待克隆的基因或cDNA的一段同源序列),同文庫(kù)的細(xì)菌克隆或噬菌斑作核酸分子雜交,經(jīng)放射自顯影或顯色反應(yīng)后,可以篩選出含有同探針互補(bǔ)序列的細(xì)菌克隆或噬菌斑,然后分析這些重組載體中所插入的DNA片段或cDNA,最后分離出所要的基因或cDNA。 在克隆cDNA時(shí),還可應(yīng)用噬菌體載體λgtll構(gòu)建cDNA文庫(kù),這種載體可使插入的cDNA分子翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)。此時(shí),可用某一蛋白質(zhì)免疫動(dòng)物得到抗體并標(biāo)記上同位素或化學(xué)物質(zhì)后用作探針,即用蛋白質(zhì)作為探針去篩查cDNA文庫(kù),如果這種抗體能同cDNA文庫(kù)中某個(gè)噬菌斑產(chǎn)生抗原—抗體結(jié)合反應(yīng),則這個(gè)噬菌體載體中插入的cDNA所編碼的就是用作抗原去免疫動(dòng)物的蛋白質(zhì),也就是探針探查的目的基因。
 
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