通常的生物化學(xué)反應(yīng)過程包括三步,即樣品的制備,生化反應(yīng)、結(jié)果的檢測和分析。可將這三步不同步驟集成為不同用途的生物芯片,所以據(jù)此可將生物芯片分為不同的類型。例如用于樣品制備的生物芯片,生化反應(yīng)生物芯片及各種檢測用生物芯片等。現(xiàn)在,已經(jīng)有不少的研究人員試圖將整個生化檢測分析過程縮微到芯片上,形成所謂的"芯片實驗室"(Lab-on-chip)。"芯片實驗室"通過微細加工工藝制作的微濾器、微反應(yīng)器、微泵、微閥門、微電極等以實現(xiàn)對生物樣品從制備、生化反應(yīng)到檢測和分析的全過程,從而極大地縮短的檢測和分析時間,節(jié)省了實驗材料。
樣品制備芯片的目的是將通常需要在實驗室進行的多個操作步驟集成于微芯片上。目前,樣品制備芯片主要通過升溫、變壓脈沖以及化學(xué)裂解等方式對細胞進行破碎,通過微濾器、介電電泳等手段實現(xiàn)生物大分子的分離。
生化反應(yīng)芯片即在芯片上完成生物化學(xué)反應(yīng)。與傳統(tǒng)生化反應(yīng)過程的區(qū)別主要在于它可以高效、快速地完成生物化學(xué)反應(yīng)。例如,在芯片上進行PCR反應(yīng),可以節(jié)約實驗試劑,提高反應(yīng)速度,并可完成多個片段的擴增反應(yīng)。當前,由于檢測和分析的靈敏度所限,通常在對微量核酸樣品進行檢測時必需事先對其進行一定程度的擴增。所以用于PCR的芯片無疑為快速大量擴增樣品多個DNA片段提供了有力的工具。
檢測芯片顧名思義是用來檢測生物樣品的。例如用毛細管電泳芯片進行DNA突變的檢測,用于表達譜檢測、突變分析、多態(tài)性測定的DNA微點陣芯片(也稱DNA芯片、基因芯片),用于大量不同蛋白檢測和表位分析的蛋白或多肽微點陣芯片(也稱蛋白或多肽芯片)。
芯片實驗室是生物芯片技術(shù)發(fā)展的最終目標。它將樣品的制備、生化反應(yīng)到檢測分析的整個過程集約化形成微型分析系統(tǒng)。現(xiàn)在,已經(jīng)有由加熱器、微泵、微閥、微流量控制器、微電極、電子化學(xué)和電子發(fā)光探測器等組成的芯片實驗室問世,并出現(xiàn)了將生化反應(yīng)、樣品制備、檢測和分析等部分集成的芯片。例如可以將樣品的制備和PCR擴增反應(yīng)同時完成于一塊小小的芯片之上。
再如Gene Logic公司設(shè)計制造的生物芯片可以從待檢樣品中分離出DNA或RNA,并對其進行熒光標記,然后當樣品流過固定于柵欄狀微通道內(nèi)的寡核苷酸探針時便可捕獲與之互補的靶核酸序列。應(yīng)用其自己開發(fā)的檢測設(shè)備即可實現(xiàn)對雜交結(jié)果的檢測與分析。這種芯片由于寡核苷酸探針具有較大的吸附表面積,所以可以靈敏地檢測到稀有基因的變化。同時,由于該芯片設(shè)計的微通道具有濃縮和富集作用,所以可以加速雜交反應(yīng),縮短測試時間,從而降低了測試成本。