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蛋白質濃縮方法

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-28

蛋白濃縮方法基本有:
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……

1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。

2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!

3,硫酸銨沉淀法:利用高濃度鹽將蛋白質析出(鹽析)
選擇硫酸按是因為:鹽析有效性,pH范圍廣,溶解度高,溶液散熱少,經濟!

4,(低溫)有機溶劑沉淀法:強調低溫(0-4度以下)是因為10度時蛋白會在有機溶劑中變性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2 離子,pH值

5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG時旨在個別情況下才會是蛋白質稍有變性!他溶解是散熱低,形成沉淀的平衡時間短,通常達到30%時蛋白質就會達到最大量的沉淀!

6,超濾法:主要針對小體積蛋白質溶液(幾ml)此法更不易引起變性!不過得有濃縮器,不是哪個實驗室都有的!

7,透析法:主要用于更換蛋白質的緩沖液!的有透析袋!不需要特殊的儀器!

8,離子交換層析:可用陰離子交換樹脂進行濃縮!

9,冷凍干燥法:在冷凍狀態下讓揚品種的液體升華


具體你的實驗應該是做一種分泌蛋白吧?
濃縮后要干什么,需要活性蛋白么?
實驗室設備如何,導師經費如何?
這些都要考慮!

 
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