在天然核酸中,除主要堿基外,還含有微量堿基衍生物。特別在tRNA中,含量較多。多數是主要堿基被甲基化的物質或其衍生物(甲基化核苷),但在tRNA中除此之外,還發現有脫氨基衍生物(次黃苷、1-甲基次黃苷等)、含硫衍生物(4-硫尿苷、2-硫胞苷等)和具有異戊烯基(isopentenyl)的衍生物[6-(△2-異戊烯基)腺苷,2-甲基-6-(△2-異戊基)腺苷等和5-核糖基尿嘧啶(假尿嘧啶苷)] 、二氫尿苷等多種微量堿基。這些微量堿基的作用還不十分清楚,但認為與核酸的結構和功能有著重要的關系。例如已知細菌感染上噬菌體時,由細菌固有的限制酶的作用被分解的現象,但其作用部位的堿基發生特異的甲基化時,則不受分解而進行繁殖。另外也已知很多tRNA的反密碼子和反密碼子相鄰的3′-側的微量堿基的存在與識別密碼子有關。多數微量堿基在形成核酸的一級結構以后,可通過酶的修飾作用而生成。