膠體金溶液是指分散相粒子直徑在l—150 nm之間的金溶膠,屬于多相不均勻體系,顏色呈桔紅色到紫紅色.膠體金作為標記物用于免疫組織化學始于1971年,Faulk等應用電鏡免疫膠體金染色法(IGS)觀察沙門氏菌,此后他們把膠體金與多種蛋白質結合.1974年Romano等將膠體金標記在第二抗體(馬抗人IgG)上,建立了間接免疫膠體金染色法。1978年geoghega發現了膠體金標記物在光鏡水平的應用。膠體金在免疫化學中的這種應用,又被稱為免疫金.之后,許多學者進一步證實膠體金能穩定又迅速地吸附蛋白質,而蛋白質的生物活性無明顯改變.它可以作為探針進行細胞表面和細胞內多糖、蛋白質、多膚、抗原、激素、核酸等生物大分子的精確定位,也可以用于日常的免疫診斷,進行免疫組織化學定位,因而在臨床診斷及藥物檢測等方面的應用已受到廣泛的重視.目前電鏡水平的免疫金染色(IGS),光鏡水平的免疫金銀染色(IGSS),以及肉眼水平的斑點免疫金染色技術日益成為科學研究和臨床診斷的有力工具.
膠體性質膠體金顆粒大小多在1~100nm,微小金顆粒穩定地、均勻地、呈單一分散狀態懸浮在液體中,成為膠體金溶液。膠體金因而具有膠體的多種特性,特別是對電解質的敏感性。電解質能破壞膠體金顆粒的外周永水化層,從而打破膠體的穩定狀態,使分散的單一金顆粒凝聚成大顆粒,而從液體中沉淀下來。某些蛋白質等大分子物質有保護膠體金、加強其穩定性的作用。
呈色性微小顆粒膠體呈紅色,但不同大小的膠體呈色有一定的差別。最小的膠體金(2~5nm)是橙黃色的,中等大小的膠體金(10~20nm)是酒紅色的,較大顆粒的膠體金(30~80nm)則是紫紅色的。根據這一特點,用肉眼觀察膠體金的顏色可粗略估計金顆粒的大小。近10多年來膠體金標記已經發展為一項重要的免疫標記技術.膠體金免疫分析在藥物檢測、生物醫學等許多領域的研究已經得到發展,并越來越受到相關研究領域的重視.光吸收性膠體金在可見光范圍內有一單一光吸收峰,這個光吸收峰的波長(λmax)在510~550nm范圍內,隨膠體金顆粒大小而變化,大顆粒膠體金的λmax偏向長波長,反之,小顆粒膠體金的λmax則偏于短波長,表1所列為部分膠體金的λmax。
表 四種粒徑膠體金的制備及特性
膠體金粒徑(nm)
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1%檸檬酸三鈉加入量(ml)*
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膠體金特性
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呈色
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λmax
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16
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2.00
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橙色
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518nm
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24.5
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1.50
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橙紅
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522nm
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41
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1.00
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紅色
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525nm
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71.5
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0.70
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紫色
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535nm
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