一、悉生動物的概念
悉生動物(Gnotobiotic Animals)也稱已知菌動物或已知菌叢動物(Anima with Known Bacterial Flora),是指用與無菌動物相同的方法取得飼養(剖腹取胎,在隔離器內飼養)、但明確的物體內所給予的已知微生物的動物,即凡含有已知的單菌(Monoxenie)、雙菌(Dixenie)、三菌(Trixenie)或多菌(Polyxenie)的動物。一般是將1~3種已知的微生物人工接種于無菌動物體內定居,無菌動物接種一種已各菌就是單菌動物,以此類推。由于此種動物和無菌動物一樣是放在無菌隔離器內飼養的,因此選用此種動物作實驗準確性是很高的,可排除動物體內帶有的各種不明確的微生物對實驗結果的干擾,常用于研究微生物和宿主動物之間的關系,并可按研究目的來選擇某種微生物。
悉生動物是使特定的微生物定居于無菌動物的動物,可以說是一種動物與微生物的復合體,也飼養于隔離器中,飼養方法與無菌動物相同。由于這種動物是有菌的,所以隔離器內也有這種微生物的存在。
二、悉生動物的發展
隨著科學的發展,向實驗動物提出了更高的要求,就是如何消除實驗動物自身疾病對實驗結果的干擾,實驗證明:除了剖腹產所獲得的仔畜,飼養在嚴格的無菌隔離屏障內,沒有另外的辦法可以消除實驗動物本身所帶的傳染性疾患,從而使無菌隔離技術的應用,從研究微生物與宿主之間的相互依存關系。推廣到高質量實驗動物的生產。
悉生動物大規模地生產和廣泛應用于醫學研究的各個領域,取得了普通動物實驗所無法發現的豐碩成果,這就豐富了無菌動物的研究內容。現在已把無菌動物、單菌動物、雙菌動物、多菌動物和特殊病原體動物總稱為悉生動物。近二十年來是無菌動物研究的飛躍發展階段,形成了跨越生物學、醫學、獸醫學的新興學科一悉生生物學(Gnotobiology),它是以無菌隔離技術提供的各種動物為實驗對象,研究實驗動物本身以及各種動物特別是動物與微生物之間相互依存和制約關系。
悉動物的發展歷史與無菌動物發展一樣,是隨著無菌動物的發展而發展的。無菌動物發展的要事年表列于表3。
悉生動物學的發展,大大促進了生物醫學研究的發展。國際悉生生物學討論會已召開過七次,1981年6月29日至7月3日,在日本東京召開了第七次國際悉生生物學討論會,我國第一次派出了由中國醫學科學院人中組成的代表團出席了會議。標志著我國悉生生物學的興起和發展。
表3 無菌動物發展的要事年表
年 |
學者姓名 |
項目 |
1895 |
Schottellius |
倡議應用豚鼠培育無菌動物,但未獲成功。 |
1895 |
Nuital,Thierfelder |
以無菌牛奶喝養經剖腹產獲得的豚鼠仔畜成活達10天。 |
1895 |
Kijanizin |
試圖在無菌代謝籠內養育無菌兔,未成功。 |
1899 |
Schottellius |
將雞在無菌條件下養活17天。 |
1902 |
Schottellius |
又將無菌雞養活到30天。 |
1908 |
Cohendy |
育成無菌雞,且生長情況良好。 |
1912 |
Kuster |
育成無菌雞。 |
1913 |
Kuster |
在柏林大學養育了1只無菌羊。 |
1914 |
Cohendy,Wallman |
把無菌豚鼠養活到29天。 |
1922 |
Cohendy,Wallman |
使用無菌豚鼠做感染病毒的短期試驗。 |
1922 |
Baeot,Harden |
發現無菌蠅蛆必須飼喂B族維生素才正常生長。 |
1928 |
Glimstedt |
在瑞共Lund大學開始做無菌動物研究。 |
1928 |
Reyniers |
在美國圣母大學創造了不銹鋼制無菌隔離器。 |
1929 |
Matsumura |
在日本千葉大學開始無菌動物研究。 |
1930 |
Reyniers |
在美國Notre Dame大學作無菌動物研究。 |
1932 |
Glimstedt |
發表關于無菌豚鼠工作的初步報告。 |
1932 |
Reyniers |
獲得無菌豚鼠。 |
1933 |
Glimstedt |
無菌豚鼠能生存5-30天。 |
1942 |
Reyniers |
無菌猴的試驗報告。 |
1943 |
Reyniers Trexler |
獲得無菌大鼠、兔、小鼠和雞。 |
1943 |
Reyniers |
制成新型不銹鋼大型無菌隔離器。 |
1946 |
Glimstedt |
獲得無菌狗。 |
1948 |
Reyniers,Guistafsson |
無菌大白鼠繁殖群培育成功。 |
1957 |
Trexler和Reyniers |
試制成塑料薄膜無菌隔離器養育無菌動物。 |
1959 |
Pleasant |
育成了小鼠、家兔、豚鼠、雞、貓、羊、狗等無菌動物。 |
1960 |
Whitenair等 |
在美國Michigan大學獸醫學院,使用塑料隔離器開始研究養育無菌豬和綿羊。 |
1969 |
Bleby |
育成無菌貓 |