资源新版在线天堂-桌下含校园污肉高h-坠落女教师-椎名由奈在线播放-六月色婷婷-六月丁香婷婷天天在线

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 細胞實驗技術 » 正文

細胞周期測定

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-08

一、原理
細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。
測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅??艘桓鮒芷冢?蛄教醯ヌ寰?釗盡<品至嚴嘀懈髕詒壤??涂傷慍魷赴?芷詰鬧怠?/SPAN>
二、儀器、用品與試劑
1、儀器、用品:同常規細胞培養
2、試劑:BrdU(1.0mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液
三、操作步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使最終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、鏡檢100個分裂相,計第一、二、三、四細胞期分裂指數。
9、計算:

細胞周期(Tc)=48/{(M1 2M2 3M3 4M4)/100}(小時)

附:(1)BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml 4℃下避光保存。
(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,檸檬酸三鈉·2H2O 0.88克,加水至100ml,4℃保存。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.411 second(s), 819 queries, Memory 2.59 M
主站蜘蛛池模板: 欧美美女论坛| 国产ts在线| 久久中文字幕综合不卡一二区 | 亚洲日本在线不卡二区 | 午夜伦理:伦理片| 大陆极品少妇内射AAAAAA| 欧美精品做人一级爱免费| 67194成在线观看免费| 乱码AV午夜噜噜噜噜| 456亚洲人成在线播放网站| 捆绑白丝粉色JK震动捧喷白浆| 永久免费毛片| 久久毛片基地| 自拍区偷拍亚洲视频| 毛片手机在线观看| 91久久精一区二区三区大全| 蜜桃成熟时2在线观看完整版hd| 3dbdsm变态videos高清| 蜜臀AV99无码精品国产专区| 99久久久无码国产精品AAA| 男人的天堂黄色片| 成人AV精品视频| 无码欧美喷潮福利XXXX| 国产综合视频在线观看一区| 亚洲视频在线免费观看| 久久中文字幕亚洲精品最新| 99热久久视频只有精品6| 秋霞电影网午夜鲁丝片| 高中生被C到爽哭视频免费| 亚洲AV天堂无码麻豆电影| 久久国产一区二区三区| 91久久偷偷做嫩草影院免费看| 日本国产黄色片| 国产精品亚洲AV色欲在线观看| 亚洲欧美偷拍视频一区| 榴莲黄版无限刷| 动漫美女搞鸡| 亚洲午夜精品A片久久WWW解说| 麻豆AV无码精品一区二区| 成人网站国产在线视频内射视频 | 日本久久黄色|