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食物中脂肪酸成分的測定

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-10-26
氣相色譜法

  此方法測得的是食物中各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。樣品處理簡單,快速;方法準(zhǔn)確,靈敏度高。

1.原理
  氣相色譜法是利用色譜柱中裝入擔(dān)體及固定液,用載氣把欲分析的混合物帶入色譜柱,在一定的溫度與壓力條件下,各氣體組分在載氣和固定液薄膜的氣液兩相相中的分配系數(shù)不同,隨著載氣的向前流動,樣品各組分在氣,液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配,使脂肪酸各組分的移動速度有快有慢,從而可將各組分分離開。然后進(jìn)行分別測定。

2.適用范圍
  此法適用于食物中脂肪酸的分析。

3.儀器
  氣相色譜儀
  氫火焰離子化檢測器
  氮?dú)?、氫氣、壓縮空氣
  微處理機(jī)
  色譜柱2m×4mm或3m×4mm填充80--100目ChromosorbW,涂以8% 或10%(W/W)二乙二醇琥珀酸酯(DEGS)
  氣相色譜條件
  柱溫:210℃
  進(jìn)樣器溫度:280℃
  檢測器溫度:280℃
  氮?dú)饬魉伲?0ml/cm2

4.試劑
  所有試劑,如未注明規(guī)格,均指優(yōu)級純,所有實(shí)驗(yàn)用水,均為蒸餾水。
  (1)石油醚(沸程30~60℃)分析純
  (2)苯
  (3)無水甲醇
  (4)0.4mol/L氫氧化鉀--甲醇溶液:稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中,然后用甲醇稀釋到10ml。
  (5)脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)(SIGMA)
  (6) 脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)
  CHAIN %BYWT
  6:0 1.0
  8:0 5.0
  10:0 4.0
  12:0 27.0
  14:0 10.0
  16:0 10.0
  18:0 2.0
  18:1 15.0
  18:2 25.0
  18:3 1.0

5.操作步驟
  稱取30--100mg(約2-6滴) 油脂,置入10ml量瓶內(nèi),加入1-2ml 30~60℃沸程石油醚和苯的混合溶劑(1:1),輕輕搖動使油脂溶解。加入1-2ml 0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液,混勻。在室溫靜置5~10分鐘后,加蒸餾水使全部石油醚苯甲酯溶液升至瓶頸上部,放置待澄清。如上清液渾濁而又急待分析時,可滴入數(shù)滴無水乙醇,1-2分鐘內(nèi)即可澄清。吸取上清液,在室溫下吹入氮使?jié)饪s,所得到濃縮液即可用于氣層分析。

6.結(jié)果計(jì)算
  在有微處理機(jī)的情況下,用歸一化計(jì)算法則可自動打印出峰面積和各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。歸一化計(jì)算法不能直接計(jì)算脂肪酸的總重量及各種脂肪酸的實(shí)際含量。

7.注意事項(xiàng)
  同一樣品的兩次測定值之差不得超過兩次測定平均值的5%。
 
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