一、親魚選擇與培育
親魚可人工繁殖的或捕自自然海區(qū)。雌魚選擇體重0.5公斤~1公斤、腹部膨大而柔軟者;雄魚選擇體重1.5公斤以上、清壓腹部能流出精液者。雌雄親魚按1∶1~1∶3的比例搭配。石斑魚是雌性先熟的雌雄同體魚體,其6齡才轉(zhuǎn)化為雄魚,近年來,由于過度捕撈,自然海區(qū)的生殖群體中存在雌多雄少的性比失調(diào)現(xiàn)象,而且養(yǎng)殖條件下培育高齡大個體雄性親魚的時間長且費(fèi)用也高,所以,親魚選擇中的難題是性腺成熟的雄魚不易獲得。為了解決人工繁殖中的雄性親魚不足,可用外源性激素17α-甲基睪酮誘導(dǎo)雌雄同體的赤點(diǎn)石斑魚,可提早3齡~4齡使雌魚轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩彻δ艿男坌杂H魚,而且17α-甲基睪酮不僅可以抑制卵黃生成,而且還可影響卵原細(xì)胞增殖和分化。對2齡~4齡魚投喂50天藥餌,每次劑量約5毫克/千克體重(累積量241.3毫克/千克體重),可使性轉(zhuǎn)變的雄性親魚流精率達(dá)93.5%,授精率達(dá)81.1%,胚胎發(fā)育正常。為解決雄性激素藥餌投喂法因攝餌量不均造成的“性轉(zhuǎn)變”效果不穩(wěn)定和每天投飼費(fèi)工、費(fèi)時等問題,也可采用將17α-甲基睪酮植入魚體的雄性激素埋植法來誘導(dǎo)石斑魚提早“性轉(zhuǎn)變”。17α-甲基睪酮可一次性埋植到3齡~7齡成熟的赤點(diǎn)石斑魚雌魚內(nèi),50天~90天后雌魚就轉(zhuǎn)變?yōu)樾埕~魚體,使石斑魚“性轉(zhuǎn)變”過程提早5年~6年。用它們的精液得到的受精卵的受精率達(dá)73%、孵化率97%,仔魚發(fā)育正常,能達(dá)到人工繁殖的目的。在相同的處理?xiàng)l件下雌性高齡魚的“性轉(zhuǎn)變”時間比低齡魚短,且較易獲得釋精的變性雄魚。因此,在人工繁殖中應(yīng)盡量選擇較高齡的、個體較大的雌魚作變性處理,效果較好。
為了解決人工繁殖中性成熟的雄魚比較難得的問題,還可應(yīng)用超低溫冷凍法保存精液,在液氮罐中冷凍保存2個月后的精液仍具有相當(dāng)于鮮精的活力,不影響人工繁殖的效果。人工繁殖的效果很大程度上取決于親魚性腺的成熟度,所以在誘導(dǎo)產(chǎn)卵前,加強(qiáng)親魚的培育,促其性腺發(fā)育至關(guān)重要。在室內(nèi)水泥池中蓄養(yǎng)或暫養(yǎng)石斑魚親魚,通過人工強(qiáng)化培育,每日換水和吸污,親魚不用激素催產(chǎn)就能自然產(chǎn)卵受精,可獲得優(yōu)質(zhì)的受精卵。
二、催產(chǎn)
選擇好的雌性親魚,用細(xì)塑膠管或挖卵器自產(chǎn)卵孔插入約3厘米~5厘米深吸出卵粒,置于載波片上,在顯微鏡下觀察其成熟程度,卵粒若易分離、蛋黃色、飽滿、卵徑0.3毫米~0.5毫米、加透明固定液后核已偏向動物極,則成熟度較好。雄性親魚輕輕壓腹部有少許精液流出者成熟良好。石斑魚精液量少,檢查雄魚成熟度時切勿擠壓太重。催產(chǎn)劑有鯉魚腦垂體、絨毛膜促性腺激素、促黃體激素釋放激素類似物和LRH-A+PG的混合物等4種。
雌魚用PG10毫克/千克體重~12毫克/千克體重或LRH-A60微克/千克。以上劑量一般分兩次胸腔注射,第一次注射量占總量的2/3,兩次間的間隔時間在水溫25℃~26℃度時為24小時左右。雄性親魚注射劑量是雌魚的一半,均在雌魚第二次注射的同時進(jìn)行。注射用水為0.6%氯化鈉溶液,將催產(chǎn)劑溶解或制成懸濁液,注射液量為每尾親魚一次注射1毫升~2毫升為度。
三、人工授精和自然產(chǎn)卵受精
赤點(diǎn)石斑魚人工授精宜采用干法授精法。親魚注射第二針催產(chǎn)劑后10小時~13小時即 可產(chǎn)卵,由上而下輕壓雌魚腹部,將成熟魚卵擠入消毒過的白瓷碗中,反復(fù)5次~6次后即可 將親魚輕輕放回親魚蓄養(yǎng)池中。隨即再用同樣方法將雄魚精液擠入白瓷碗的卵堆上。石斑魚精液很少,連擠5次~6次總計(jì)也不過1毫升~2毫升,但已足夠用了。待最后一次擠精完成后 ,即用消毒海水浸濕過的潔凈羽毛將碗中卵和精液攪拌均勻,約1分鐘~2分鐘后加入少量消毒海水,繼續(xù)攪拌5分鐘后傾倒在消毒過的小臉盆中,加消毒的海水輕輕攪勻,靜置片刻。 所有受精卵都漂浮在水的中上層,死卵或未受精卵沉淀于底部。用消毒過的海水洗凈受精卵,除去多余的精子,以避免多精受精,然后將受精卵移入孵化器中孵化。
人工授精時,應(yīng)避免陽光直射,以免殺死精子。由于石斑魚屬分批產(chǎn)卵魚類,有連續(xù)多次產(chǎn)卵的生殖特點(diǎn)。
如果為親魚創(chuàng)造在產(chǎn)卵池中自然產(chǎn)卵受精的環(huán)境條件,就可以避免因人工授精時經(jīng)常出現(xiàn)的卵子過熟或不夠成熟的弊端,也可以減少因捕撈和擠卵、擠精液造成的對親魚的傷害。所以,也可采用強(qiáng)化培育石斑魚親魚的方法,促進(jìn)親魚分泌激素,不用注射催產(chǎn)劑而能自然產(chǎn)卵受精,從而獲得了優(yōu)質(zhì)受精卵,提高了仔魚成活率,降低了畸形率。自然產(chǎn)卵方式優(yōu)于人工催產(chǎn)授精。產(chǎn)卵時適宜水溫25℃~27℃,海水鹽度32~35,pH7.8~8.5,產(chǎn)卵池面積 20平方米,水深約1.5米,池上方用遮光幕遮光,水流量40升/分鐘~50升/分鐘。
四、孵化
石斑魚產(chǎn)浮性卵,孵化應(yīng)在環(huán)道孵化器或孵化缸中進(jìn)行。孵化時魚卵密度為50粒卵/ 升海水~100粒卵/升海水,水流速度以能使魚卵或仔魚漂浮為度。孵化用水必須清新,需經(jīng)過沙濾和紫外光殺菌。水溫保持在25℃左右,鹽度30~33,并保持穩(wěn)定。孵化過程中需適度充氣,充氣量太大或太小都不好,使海水溶氧量保持在5毫克/升以上。孵化中盡量清除死卵 ,以防水質(zhì)變壞。赤點(diǎn)石斑魚和青石斑魚卵在以上條件下,自產(chǎn)卵受精后經(jīng)過24小時可以孵出魚。