在反應用玻板上,將血清和菌液各一滴(0.5ml)滴置,用攪拌棒充分混合后,將玻板置前后左右傾斜觀察,在3min內出現明顯的顆粒為陽性,反應溫度以20~25℃為適。
7.2.2試管內凝集反應
血清從5倍開始,按倍比稀釋(各管0.25ml)。各梯度血清加等量菌液,充分混合后,在37℃放置2h,再在5℃中靜置16~18h。以上有明顯凝集(++以上)的最高終末稀釋倍數作為凝集價,凝集價在10以上為陽性。
7.2.3紅血球凝集抑制實驗
血球液為雞紅血球,以生理鹽水洗3次以上,在同液內5%懸浮。血清及菌液的稀釋均用生理鹽水。
紅血球凝集反應:菌液由5倍開始,倍比稀釋(各管0.4ml)加等量的血球液,充分振蕩混合后,在室內靜置40~50min。根據管底情況來判定,以呈現凝集陽性的菌液稀釋倍數作為抗原效價。
8預防與治療
8.1綜合防治措施
杜絕引入病雞和帶菌雞。平時加強雞群的飼養管理,特別注意雞舍通風和清潔衛生,使雞群的飼料營養合理,多喂些富含有維生素A的飼料,以提高雞群的抵抗力。本病發生后,應隔離病雞,加強消毒和檢疫。病雞即使經過治療康復但也不能留做種用。除非知道雞群來源于IC雞場,否則只應購買1日齡雞作為后備雞。預防和控制本病的理想措施是遠離老雞群進行隔離飼養。要從雞場中清除病原,必須首先清除感染雞或康復雞,對雞舍和設備進行清洗和消毒后,再重新飼養清潔雞之前,禽舍應空閑2~3周。
8.2疫苗免疫
主要為滅活疫苗。有HPGA型和C型菌單價苗及將A型和C型等量混合的滅能苗,還有A型苗的新城疫病毒混合苗及在其中再將傳染性支氣管炎病毒混合的疫苗。
疫苗使用注意事項:由于雞副嗜血桿菌為革蘭氏陰性菌,含有內毒素。因此,疫苗接種后會有不同程度的反應,故在免疫雞群時應密切觀察雞群的體況,體質虛弱應暫緩接種;雞群發病后最好通過血清學方法分離鑒定細菌,確定本地區雞副嗜血桿菌的流行菌型。從而選擇相應的血清型疫苗,不贊成直接使用多價苗;注射途徑所引起的免疫反應強度不同,皮下和肌肉注射兩種途徑都有效,經腿部肌肉注射提供的保護較經胸部注射的效果好,經鼻腔接種無效。
8.3藥物防治
各種磺胺藥物和抗生素對減輕本病的嚴重程度和縮短病程都有作用。應當注意細菌產生耐藥性。
8.3.1環境因素可影響藥物治療的效果。因此,應加強在日常和治療中的飼養管理和衛生管理。如將發病雞隔離飼養,每天對發病雞舍消毒,保持雞舍良好的衛生條件。
8.3.2選擇敏感的藥物,防止耐藥性。用藥時最好選擇2~3種有效藥物聯合應用。
8.3.3用藥途徑。由于本病主要通過病雞排毒污染飲水進行傳播,通常藥物飲水既可殺菌又可治療。
8.3.4保證用藥的劑量和時間,不得中途停藥。
8.3.5藥物與疫苗聯合應用,防止疾病反復,對于體況尚且良好或發病雞數尚少的雞群在用藥的同時可注射相應的滅活疫苗,這樣在治療結束后可產生較強的免疫力。