雙歧桿菌(Bifidobacteria)是人和某些動物腸道中對機體有益的正常菌,與機體的健康狀況密切相關。
國外對雙歧桿菌的研究和應用比較早,如德國在40年代已將雙歧桿菌制劑用于嬰兒消化道疾病的防治;日本從1971年開始生產雙歧桿菌制品,如今已成為世界上最大的雙歧桿菌制品生產國,生產有70多個品種,其中乳制品有50種以上。我國對雙歧桿菌的研究和應用較晚,近年來才有為數不多的產品面市。
雙歧桿菌具有保持腸道正常微生物區系平衡,產生B族維生素,增強機體的非特異性和特異性免疫反應,控制內毒素血癥、降低膽固醇水平,以及抗腫瘤的作用。隨著年齡增長及抗生素的濫用,雙歧桿菌在人體腸道內的含量會大大下降,飲用含活菌的雙歧桿菌制品,可彌補該菌在腸道內的不足。
水牛奶乳汁濃厚,營養豐富,固形物含量高達18%;胡蘿卜汁含有豐富的β-胡蘿卜素和多種生物活性物質,對人體具有抗癌保健作用,還可促進雙歧桿菌的生長。把胡蘿卜濃縮汁添加到水牛奶中,利用保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌與雙歧桿菌共同發酵所制成的酸奶,克服單一雙歧桿菌發酵產生的不良風味與口感,具有清香爽口、細膩圓滑的特點,雙歧桿菌活菌數保持較高的水平,具有很好的保健效果。
1 材料與方法
1.1 材料
水牛奶(部分脫脂) 本所提供;胡蘿卜濃縮汁(33 Bx) 由浙江黃巖購得;長雙歧桿菌 從南京農大引進;保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌 本所實驗室保存;雙歧因子 市售。
活化培養基 脫脂水牛奶100 mL,蛋白胨0.1%,L-半胱氨酸0.05%。在0.08MPa,20min滅菌。
乳酸菌計數培養基 蛋白胨10g,酵母膏10g,葡萄糖10g,吐溫-80 1 mL,L-半胱氨酸0.5 g,NaCl 0.25 g,K_2HP0_4 0.1 g,KH_2PO_(-4) 0.1 g,MgCl_2.6H_20 0.25g,ZnS0_4.7H_2O 0.125 g,CaCl2 0.075 g,0.4g溴甲酚紫3mL,瓊脂18g,蒸餾水1000mL,pHl6.8~7.0, 0.08MPa,滅菌25 min。
雙歧桿菌計數培養基 在1000mL乳酸菌計數培養基中添加85 mg硫酸卡那霉素,以抑制一般乳酸菌生長。
1.2 儀器設備
顯微鏡、pHS-29A酸度計、電熱恒溫培養箱、堿式滴定管。
1.3 方法
1.3.1 工藝流程
--蔗糖 胡蘿卜濃縮汁 雙歧因子
↓
脫脂水牛奶→配料→預熱(70℃)→均質(18~20 MPa)→消毒(95℃,20 min)→冷
卻(至40℃)→接種→發酵(40℃)→冷藏→成品
↑
--雙歧桿菌發酵劑、乳酸菌發酵劑
1.3.2 雙歧桿菌活化
挑取經耐氧馴化的雙歧桿菌凍干粉于1 mL無菌水中打勻,用注射器吸取0.3mL注入已滅菌的10 mL活化培養基中,在厭氧條件下,于40℃的恒溫培養箱中培養12~18 h至凝乳。連續接種活化直至凝乳時間縮短到6~10h。
1.3.3 活菌計數方法
將雙歧酸奶進行系列稀釋,分別接入乳酸菌計數培養基和雙歧桿菌計數培養基,于40℃進行厭氧培養48~72h,用菌落計數法計算其總菌數及雙歧桿菌數。
1.3.4 滴定酸度(°T)的測定
參照GB5409-85,2.1.1項,用0.1 NaOH滴定。
1.3.5 pH值測定
用pHS-3C型酸度計測定。
2 產品的質量指標
2.1 感官指標
呈淺黃色表面光滑,無乳清或只有少量乳清析出、質地均勻細膩;具有酸奶特有的香味,略帶果香味,酸甜爽口、無異味。
2.2 理化指標
總固體≥17.0%;脂肪1~2%;蛋白質≥3.5%;蔗糖≥6%;酸度70~11O°T;汞(以Hg計)<0.01mg/kg。
2.3 微生物指標
總活菌數≥1×10~8個/mL;
雙歧桿菌活菌數≥1×10~6個/mL;
大腸菌群≤90個/100mL;
致病菌:不得檢出。
3 結論
3.1 雙歧酸奶生產的最佳工藝條件是胡蘿卜濃縮汁5%,雙歧因子3%,生產發酵劑中雙歧桿菌發酵劑與乳酸菌發酵劑的比例為5:1,總接種量6%。
3.2 雙歧酸奶在2℃~6℃的冰箱中冷藏10d,其雙歧桿菌活菌數仍能達到1×10~6個/mL,但隨著冷藏時間的延長,雙歧酸奶的酸度逐漸增加。雙歧桿菌活菌數不斷減少。因此,保存期在8~10d為好。
國外對雙歧桿菌的研究和應用比較早,如德國在40年代已將雙歧桿菌制劑用于嬰兒消化道疾病的防治;日本從1971年開始生產雙歧桿菌制品,如今已成為世界上最大的雙歧桿菌制品生產國,生產有70多個品種,其中乳制品有50種以上。我國對雙歧桿菌的研究和應用較晚,近年來才有為數不多的產品面市。
雙歧桿菌具有保持腸道正常微生物區系平衡,產生B族維生素,增強機體的非特異性和特異性免疫反應,控制內毒素血癥、降低膽固醇水平,以及抗腫瘤的作用。隨著年齡增長及抗生素的濫用,雙歧桿菌在人體腸道內的含量會大大下降,飲用含活菌的雙歧桿菌制品,可彌補該菌在腸道內的不足。
水牛奶乳汁濃厚,營養豐富,固形物含量高達18%;胡蘿卜汁含有豐富的β-胡蘿卜素和多種生物活性物質,對人體具有抗癌保健作用,還可促進雙歧桿菌的生長。把胡蘿卜濃縮汁添加到水牛奶中,利用保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌與雙歧桿菌共同發酵所制成的酸奶,克服單一雙歧桿菌發酵產生的不良風味與口感,具有清香爽口、細膩圓滑的特點,雙歧桿菌活菌數保持較高的水平,具有很好的保健效果。
1 材料與方法
1.1 材料
水牛奶(部分脫脂) 本所提供;胡蘿卜濃縮汁(33 Bx) 由浙江黃巖購得;長雙歧桿菌 從南京農大引進;保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌 本所實驗室保存;雙歧因子 市售。
活化培養基 脫脂水牛奶100 mL,蛋白胨0.1%,L-半胱氨酸0.05%。在0.08MPa,20min滅菌。
乳酸菌計數培養基 蛋白胨10g,酵母膏10g,葡萄糖10g,吐溫-80 1 mL,L-半胱氨酸0.5 g,NaCl 0.25 g,K_2HP0_4 0.1 g,KH_2PO_(-4) 0.1 g,MgCl_2.6H_20 0.25g,ZnS0_4.7H_2O 0.125 g,CaCl2 0.075 g,0.4g溴甲酚紫3mL,瓊脂18g,蒸餾水1000mL,pHl6.8~7.0, 0.08MPa,滅菌25 min。
雙歧桿菌計數培養基 在1000mL乳酸菌計數培養基中添加85 mg硫酸卡那霉素,以抑制一般乳酸菌生長。
1.2 儀器設備
顯微鏡、pHS-29A酸度計、電熱恒溫培養箱、堿式滴定管。
1.3 方法
1.3.1 工藝流程
--蔗糖 胡蘿卜濃縮汁 雙歧因子
↓
脫脂水牛奶→配料→預熱(70℃)→均質(18~20 MPa)→消毒(95℃,20 min)→冷
卻(至40℃)→接種→發酵(40℃)→冷藏→成品
↑
--雙歧桿菌發酵劑、乳酸菌發酵劑
1.3.2 雙歧桿菌活化
挑取經耐氧馴化的雙歧桿菌凍干粉于1 mL無菌水中打勻,用注射器吸取0.3mL注入已滅菌的10 mL活化培養基中,在厭氧條件下,于40℃的恒溫培養箱中培養12~18 h至凝乳。連續接種活化直至凝乳時間縮短到6~10h。
1.3.3 活菌計數方法
將雙歧酸奶進行系列稀釋,分別接入乳酸菌計數培養基和雙歧桿菌計數培養基,于40℃進行厭氧培養48~72h,用菌落計數法計算其總菌數及雙歧桿菌數。
1.3.4 滴定酸度(°T)的測定
參照GB5409-85,2.1.1項,用0.1 NaOH滴定。
1.3.5 pH值測定
用pHS-3C型酸度計測定。
2 產品的質量指標
2.1 感官指標
呈淺黃色表面光滑,無乳清或只有少量乳清析出、質地均勻細膩;具有酸奶特有的香味,略帶果香味,酸甜爽口、無異味。
2.2 理化指標
總固體≥17.0%;脂肪1~2%;蛋白質≥3.5%;蔗糖≥6%;酸度70~11O°T;汞(以Hg計)<0.01mg/kg。
2.3 微生物指標
總活菌數≥1×10~8個/mL;
雙歧桿菌活菌數≥1×10~6個/mL;
大腸菌群≤90個/100mL;
致病菌:不得檢出。
3 結論
3.1 雙歧酸奶生產的最佳工藝條件是胡蘿卜濃縮汁5%,雙歧因子3%,生產發酵劑中雙歧桿菌發酵劑與乳酸菌發酵劑的比例為5:1,總接種量6%。
3.2 雙歧酸奶在2℃~6℃的冰箱中冷藏10d,其雙歧桿菌活菌數仍能達到1×10~6個/mL,但隨著冷藏時間的延長,雙歧酸奶的酸度逐漸增加。雙歧桿菌活菌數不斷減少。因此,保存期在8~10d為好。