食用菌菌種的保藏技術 |
來源:遼寧金農網 |
菌種是重要的生物資源,是食用菌生產的重要因素。菌種內在質量的高低及遺傳性狀的優劣決定著食用菌的生產能力,是內因。在相同的栽培條件下,良種比一般品種可增產三成以上,甚至成倍增長。但選擇出的優良菌種,如果管理不好,就會引起衰退,污染雜菌,造成減產,因此,保藏菌種和選育菌種具有同樣重要的意義。在生產中由于原種和栽培種數量大,不易保藏,菌種生產者通常以母種形式保藏食用菌菌種,栽培前再進行擴接用于生產。菌種通過保藏,控制其生長,使優良菌種不衰退,不變異,不死亡,不被雜菌污染,以保證在生產上長期應用。 菌種的保藏方法很多,常用的有低溫保藏法、液體石蠟保藏法、麥粒保藏法、鹽水保藏法等多種保藏方法,菇農可根據自身條件加以選擇。有條件的地方,同一菌株最好用幾種方法同時保藏。 1、斜面低溫保藏法:是菌種保藏最常用的方法。即將菌種在適宜的斜面培養基上培養成熟后,放入4—6℃冰箱中保存,一般3—5個月移植一次。為使菌絲體在培養基上不干、不死,以延長保藏時間,應做到以下幾點。一要使用營養豐富的天然培養基,使菌絲體發育健壯。二要將試管棉塞齊管口處剪平,用礦蠟封嚴,再包扎一層塑料薄膜,以減少培養基水分的散失,延長保藏時間。三要加大試管內瓊脂培養基的用量,使每管不少于12毫升,適當擺長斜面,以延緩水分的損耗。四要在配制保藏培養基時加入少量緩沖劑,一般加入0.2—0.3%的磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。五要設置一個永久性的保藏冰箱,與經常取用菌種的冰箱分開使用,不要隨意或過多的打開冰箱,以保持冰箱內溫度的穩定。六要在菌種培養基干縮到一定程度時,再取出轉接試管,一般應每隔一定時期調換一次培養基配方,以補充營養、水分,消除菌絲體代謝產物的影響,保持菌種正常的生活能力。 2、石蠟保藏法(即礦物油保藏法):在菌種斜面上注入一層無菌的液體石蠟,使菌絲體與空氣隔絕,以降低代謝活性,從而達到保藏的目的。此法一般可保藏2—3年,但最好1—2年移植一次。加了石蠟的菌種,置于室溫下保藏比放在冰箱中保存更好。液體石蠟在使用前,經高壓滅菌2—3小時后,再在40℃烘箱中烤干水分。液體石蠟的裝入量以淹過斜面尖端1厘米為宜,然后塞上棉塞(最好將棉塞齊管口剪平,用礦蠟密封),放于清潔避光、4—15℃常溫下保存。在保存期間應定期檢查,發現培養基露出液面,應及時補充滅菌液體石蠟。據試驗,在5—28℃之間保存6年出菇率正常。使用時,可用接種鏟直接挑取少許菌絲,接種于另一斜面培養基上。剛從液體石蠟菌種中移出的菌絲體,常沾有較多的石蠟,生長較弱,需再轉管1次,方能恢復正常。 3、鹽水保藏法:這是利用擔子菌在液體振蕩培養時,形成菌絲體球形顆粒的特性,用液體培養法培養食用菌菌絲球,然后進行保藏的一種方法。將液體培養1周左右,挑出菌絲體,加入盛有生理鹽水(0.85克食鹽溶于100毫升水中,高溫高壓滅菌后即成生理鹽水)的試管中,封存后可在常溫下存放2年,不影響菌種的存活和形成子實體。其方法是:用300毫升的三角瓶,裝入50—60毫升培養液(培養液采用馬鈴薯培養基,但不加瓊脂),接入新鮮菌種1塊(無菌操作),在28℃、180轉/分的搖床中振蕩培養5—7天。然后用無菌吸管從搖瓶中取出5—6個菌絲球,置于生理鹽水試管中(普通小試管可裝5毫升生理鹽水),用棉花塞緊管口,以蠟密封,放在4℃以下或常溫下保藏。使用時開啟管口,挑出菌絲體,放在斜面培養基上培養。 4、自然基質保藏法 (1)麩皮保藏法:水與新鮮麩皮按1:0.8的比例混合拌勻,裝入試管,占管深的2/5,洗凈管壁,加棉塞,121℃滅菌40分鐘,接入白靈菇菌種,24—28℃培養6—8天,菌絲在培養基表面延伸即可。用真空泵抽干試管內水分,棉塞上滴加無菌凡士林,置干燥器內常溫下保存,2—3年轉接1次。 (2)木屑保藏法:按配方(闊葉樹木屑78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏1%,料水比1:0.8)配制培養基,裝入試管中,占管深3/4,121℃滅菌1小時,接入白靈菇菌絲,24—28℃培養,當菌絲長到管深的1/2時,用接種鉤挑去老接種塊,石蠟溶封管口,包上塑料薄膜,冰箱中或常溫下保存,1—2年轉接1次。啟用時,先將菌種活化培養12—24小時,再挑取木屑內菌絲使用。 (3)麥粒保藏法:取健壯麥粒,淘洗后浸水5小時(水溫20℃),撈出稍加晾干,裝入試管,裝量以1/4到1/3為宜,然后滅菌,滅菌后趁熱搖散,放置冷卻,向每支試管內接菌絲懸浮液1滴,搖勻,在24—26℃下培養,當大多數麥粒出現稀疏的菌絲體時,終止培養,保藏在冷涼、干燥處(麥粒含水量下超過25%)。 5、擔孢子濾紙保藏法:在孢子彈射裝置內放數張小條黑色濾紙,整個裝置高溫滅菌。采收菌幕將開、八九成熟的白靈菇子實體,先將菇體浸在0.1%升汞液中殺菌1—2分鐘,用無菌水沖洗掉升汞溶液,再用無菌紗布揩干菇體,將菇體插在孢子彈射裝置內的支架上,在22℃下培養2天,孢子即可彈射到濾紙條上,然后將濾紙條卷起,置無菌小試管內塞上棉塞,用兩層以上牛皮紙包好試管口,置無菌干燥器中1—2天,除去濾紙條上過剩的水分,放在冰箱中保存。使用時,剪取一小段濾紙條,刮取上面的擔孢子,讓孢子萌發成菌絲體,通過出菇實驗篩選菌種,用于生產。用此法可保藏3年以上。 |
食用菌都具有高蛋白,低脂肪、低膽固醇的特點,含有蛋白質、脂肪、碳水化合物、多種維生素和礦質元素等成分