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綜述:轉(zhuǎn)基因生物和食品存在的安全性問(wèn)題、檢測(cè)和評(píng)價(jià)研究
http://www.bioon.com 生 物 谷 網(wǎng) 站 80年代初,美國(guó)最早對(duì)轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行研究。首例轉(zhuǎn)基因生物(Genetically Modified Organism,GMO)于1983年問(wèn)世,轉(zhuǎn)基因作物(1986)批準(zhǔn)進(jìn)行田間試驗(yàn),延熟保鮮番茄(1993)(Calgene公司生產(chǎn))在美國(guó)批準(zhǔn)上市,開(kāi)創(chuàng)了轉(zhuǎn)基因植物商業(yè)應(yīng)用的先例。6年來(lái),其發(fā)展更為迅速,超出人們預(yù)料。1998年全球轉(zhuǎn)基因作物和種植面積達(dá)2780萬(wàn)公頃,1999年增至3990萬(wàn)公頃,增長(zhǎng)44%。1995-1998年全球轉(zhuǎn)基因作物的銷(xiāo)售額由0.75億美元猛增至12-15億美元。4年間增加了20倍。迄今,美國(guó)已批準(zhǔn)50種轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品商業(yè)化,1/4的耕地種植的是轉(zhuǎn)基因作物,其中轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆占美國(guó)大豆總面積的55%,轉(zhuǎn)基因玉米占總面積的30%。美國(guó)市場(chǎng)上已有近4000種食品來(lái)自轉(zhuǎn)基因化生物。據(jù)國(guó)際有關(guān)方面的預(yù)測(cè),到2010年,全世界的轉(zhuǎn)基因食物的種植面積將增至6000萬(wàn)公頃,市場(chǎng)總收入將達(dá)到3萬(wàn)億美元,其種子收入將達(dá)到1200億美元。因而可以毫不夸張地說(shuō),轉(zhuǎn)基因食品的新時(shí)代已經(jīng)到來(lái)。隨著GMO的發(fā)展,近來(lái)在全球范圍內(nèi)引起一場(chǎng)轉(zhuǎn)基因生物、食品安全性的爭(zhēng)論。支持和反對(duì)兩派爭(zhēng)鋒相對(duì),勢(shì)不兩立。為此,有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物安全成為歷次締約國(guó)大會(huì)、國(guó)際和區(qū)域性組織、民間團(tuán)體等討論的重要議題之一。本文就有關(guān)轉(zhuǎn)基因生物和食品存在的安全性問(wèn)題、檢測(cè)和評(píng)價(jià)研究綜述如下。
一、轉(zhuǎn)基因食品的安全性
GMO系一種或幾種植物或動(dòng)物乃至人類(lèi)的基因植入某一種生物,從而表現(xiàn)出本身自然不能擁有的由轉(zhuǎn)入基因帶來(lái)的新特性,達(dá)到改善其產(chǎn)品的品質(zhì)、提高營(yíng)養(yǎng)成份、增加其抗病、蟲(chóng)、害、增加產(chǎn)量、抗逆轉(zhuǎn)、延長(zhǎng)貨架期等。轉(zhuǎn)基因食品(Gene Food)系以轉(zhuǎn)基因生物為原料,加工為人類(lèi)所食用的產(chǎn)品。轉(zhuǎn)基因食品是一項(xiàng)新技術(shù)。
1,轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身的主要不足
(1),不精確的技術(shù):基因技術(shù)將一異源基因從一生物轉(zhuǎn)入另一生物,雖然其DNA可以精確地切割,但不能將新基因準(zhǔn)確地植入另一生物中,從而影響這一生物其它基因的基本功能。科學(xué)家無(wú)法預(yù)見(jiàn)植物基因化后產(chǎn)生新的,未知的蛋白質(zhì),也不能完全準(zhǔn)確的預(yù)見(jiàn)對(duì)受體影響的結(jié)果表現(xiàn)為不成熟性。
(2),副作用:基因技術(shù)像外科醫(yī)生動(dòng)心臟手術(shù)一樣,科學(xué)家不能完全、預(yù)先知道對(duì)生物進(jìn)行DNA手術(shù),有可能導(dǎo)致突變而對(duì)環(huán)境和人造成危害。雖然實(shí)驗(yàn)非常成熟,面對(duì)自然界的強(qiáng)大壓力,不能掌握所有對(duì)人類(lèi)可能造成影響的資料。
(3),農(nóng)作物廣泛減產(chǎn):基因技術(shù)通過(guò)不斷出售種子而獲取利潤(rùn),這就意味著,農(nóng)場(chǎng)主種植基因化種子時(shí),所有種植的植物基因相同。當(dāng)真菌、病毒、蟲(chóng)害侵襲這些特別的植物時(shí),會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的產(chǎn)量減產(chǎn)。
(4),嚴(yán)重影響整個(gè)食物供給:昆蟲(chóng)、鳥(niǎo)類(lèi)、野生物會(huì)攜帶基因化的種子到附近的田野,當(dāng)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生花粉時(shí),它們會(huì)交叉授花基因化的作物和野生物,所有的作物、有機(jī)物或無(wú)機(jī)物通過(guò)交叉授花易受污染。
2,衛(wèi)生危害
(1),未進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的安全性試驗(yàn):基因化食品改變了我們所食用食品的自然屬性,它所使用的生物物質(zhì)不是人類(lèi)食品安全提供的部份,未進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的安全試驗(yàn),沒(méi)有人知道這類(lèi)食品是安全的。
(2),產(chǎn)生毒素:基因化食品能產(chǎn)生不可預(yù)見(jiàn)的生物突變,會(huì)在食品中產(chǎn)生較高水平和新的毒素。Losey,J.E.等(1999)報(bào)道,在一種植物馬利筋葉片上撒有轉(zhuǎn)基因Bt玉米花粉后,普累克西普斑蝶食用葉片就少,長(zhǎng)得慢,4天的幼蟲(chóng)的死亡率44%。而對(duì)照組(飼喂不撒Bt玉米花粉的葉片)無(wú)一死亡。轉(zhuǎn)基因作物產(chǎn)生的殺蟲(chóng)毒素可由根部滲入周?chē)胁磺宄䲡?huì)產(chǎn)生何種影響。
(3),過(guò)敏或變態(tài)反應(yīng):基因技術(shù)會(huì)在食品中產(chǎn)生不能預(yù)見(jiàn)的和未知的變態(tài)反應(yīng)原。據(jù)報(bào)告,對(duì)巴西堅(jiān)果產(chǎn)生過(guò)敏的主體也會(huì)對(duì)用該堅(jiān)果基因工程化而得到的大豆產(chǎn)生過(guò)敏。科學(xué)家把巴西胡桃的特性移植到黃豆上去,結(jié)果卻使一些對(duì)胡桃過(guò)敏的人在攝取黃豆時(shí)有過(guò)敏的可能。植物凝血素(Lectin)對(duì)有些害蟲(chóng)來(lái)說(shuō)是有毒的,轉(zhuǎn)基因食品不得含有此類(lèi)有毒物質(zhì)。
(4),減少食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值或降解食品中重要的成份:基因化的目的是去除或滅活人們認(rèn)為不需要的物質(zhì),這些物質(zhì)可能是未知的,但它是基本的。比如它有自然的抑制癌癥的能力(Pariza,M.W.,1990)。美國(guó)的研究資料表明,在具有抗除草劑基因的大豆中,異黃酮類(lèi)激素等防癌的成份減少了。基因化食品的虛假新鮮感迷惑消費(fèi)者。具有芳香、有光澤的紅色蕃茄能貯藏幾周,但營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較低。消費(fèi)者在購(gòu)買(mǎi)水果或蔬菜時(shí),僅依靠外觀和質(zhì)地,因此,不能準(zhǔn)確判定該產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在環(huán)境中自然循環(huán)受到轉(zhuǎn)基因微生物的干擾。
(5),產(chǎn)生抗菌素耐藥性細(xì)菌:基因技術(shù)采用耐抗菌素(如抗卡那霉素、氨芐青霉素、新霉素、鏈霉素等)基因來(lái)標(biāo)識(shí)轉(zhuǎn)基因化的農(nóng)作物,這就意味著農(nóng)作物帶有耐抗菌素的基因。這些基因通過(guò)細(xì)菌而影響我們。英國(guó)的研究顯示,轉(zhuǎn)基因作物中的突變基因可能會(huì)進(jìn)入到生物有機(jī)體,突變的基因如跨越種群和轉(zhuǎn)移至細(xì)菌,其結(jié)果可能會(huì)導(dǎo)致新的疾病。雖然這種機(jī)會(huì)可能性很小,但如出現(xiàn)無(wú)法治療的并廣泛傳播的對(duì)生命造成嚴(yán)重威脅的疾病時(shí),其后果不堪設(shè)想。荷蘭科學(xué)家發(fā)表在《新科學(xué)家》雜志的試驗(yàn)結(jié)果稱(chēng),設(shè)計(jì)一人造胃,對(duì)人消化轉(zhuǎn)基因食物的過(guò)程進(jìn)行模擬,發(fā)現(xiàn)DNA滯留在腸內(nèi),同時(shí)一些轉(zhuǎn)基因細(xì)菌能夠把自己的抗生素抗性基因轉(zhuǎn)移給人造胃的細(xì)菌。如果類(lèi)似結(jié)果發(fā)生在人和動(dòng)物體內(nèi),就可能培養(yǎng)出功效最強(qiáng)的、抗菌素也無(wú)法殺死的超級(jí)細(xì)菌。英國(guó)新食品和工藝顧問(wèn)委員會(huì)就禁止一種用抗氨芐青霉素基因作標(biāo)識(shí)的轉(zhuǎn)基因改良玉米趨勢(shì)飼喂牛,因其中含有的DNA仍保持原樣,并有可能加速對(duì)抗菌素的抗藥性。
(6),產(chǎn)生的問(wèn)題不能進(jìn)行追蹤:若不進(jìn)行標(biāo)識(shí),我們的公共衛(wèi)生當(dāng)局就無(wú)力因出現(xiàn)問(wèn)題發(fā)現(xiàn)其來(lái)源,潛在性的危害值得懷疑。
(7),副作用能殺害人體:Mayeno,A.N.等(1994)報(bào)告,發(fā)生一種新的,不明原因的病癥,主要表現(xiàn)為嗜酸性肌痛。臨床表現(xiàn)有麻痹、神經(jīng)問(wèn)題、痛性腫脹、皮膚發(fā)癢、心臟出現(xiàn)問(wèn)題,記憶缺乏、頭痛、光敏、消瘦(Brenneman,D.E.等,1993;Love,L.A.等,1993)。后查明系日本一公司生的基因化工程細(xì)菌產(chǎn)生的色氨酸所致。食用者在3個(gè)月后發(fā)病,導(dǎo)致37人死亡,1500人體部份麻痹,5000多人發(fā)生偶爾性無(wú)力。據(jù)測(cè)定,含量為0.1%便可殺死人體。
3,直接危害
Lancet雜志1999年10月16日?qǐng)?bào)告,蘇格蘭Rowett研究所的Pusztai,A.(1998)首次用轉(zhuǎn)雪花蓮凝結(jié)素(GNA)基因的馬鈴薯喂大鼠,10天后,發(fā)現(xiàn)飼喂組大鼠結(jié)腸、空腸和部分小腸粘膜變厚,而未飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯組未發(fā)現(xiàn)病變。他認(rèn)為,也許是導(dǎo)入的基因激活或阻止植物中的其它基因的結(jié)果。另外觀察到,實(shí)驗(yàn)鼠腎臟、胸腺和脾臟生長(zhǎng)異常或萎縮或生長(zhǎng)不當(dāng),多個(gè)重要器官也遭到破壞,腦部萎縮,免疫系統(tǒng)變?nèi)酢km然英國(guó)皇家醫(yī)學(xué)會(huì)對(duì)此專(zhuān)門(mén)組織科學(xué)家進(jìn)行調(diào)查研究,認(rèn)為,該實(shí)驗(yàn)從設(shè)計(jì)、執(zhí)行到分析等多方面存在缺陷,不應(yīng)過(guò)早得出結(jié)論,雖然兩組存在差異,但因受實(shí)驗(yàn)技術(shù)的限制和不正確的利用統(tǒng)計(jì)學(xué),這些差異說(shuō)明不了問(wèn)題。但仍不能消除人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的疑慮。重組奶牛生產(chǎn)激素(rbGH)在美國(guó)投入商業(yè)化使用后,使用者很快發(fā)現(xiàn)這類(lèi)藥物導(dǎo)致了奶牛乳房炎發(fā)病率增加,奶牛的繁殖率低。由于藥物的作用,使奶牛的新陳代謝加快,導(dǎo)致能耗增加而引起死亡。牛奶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也降低了。科學(xué)家對(duì)獲準(zhǔn)在西班牙和美國(guó)商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因玉米和棉花進(jìn)行針對(duì)性研究后認(rèn)為,轉(zhuǎn)基因作物可能引起腦膜炎和其它新病種。也有資料證實(shí),轉(zhuǎn)基因食品可能誘發(fā)癌癥并傳遞給下一代以及導(dǎo)致失調(diào),可能需要30年或更長(zhǎng)的時(shí)間。
轉(zhuǎn)基因治療性藥物、人體組織器官等是否對(duì)人體健康造成影響。尚無(wú)法檢測(cè)證實(shí)。
4,環(huán)保的影響
(1),除草劑使用的增加:科學(xué)家估計(jì),基因化的農(nóng)作物對(duì)除草劑具有抵抗力,實(shí)際應(yīng)藥量高于正常的3倍。農(nóng)民知道其作物對(duì)除草劑有抵抗力,會(huì)大量使用除草劑。
(2),殺蟲(chóng)劑使用的增加:GE農(nóng)作物常使用自己特有的殺蟲(chóng)劑,EPA將其分類(lèi)為殺蟲(chóng)劑,這就意味著比以前有更多的殺蟲(chóng)劑進(jìn)入我們的食品和田野。有報(bào)導(dǎo),將優(yōu)良的特定的基因(如抗殺蟲(chóng)劑)植入作物,可能會(huì)使周?chē)吧参镆徊@得改良,呈現(xiàn)出抗殺蟲(chóng)劑的特征。
(3),生態(tài)被破壞:GEO通過(guò)食物鏈影響當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境,新的微生物與有親緣關(guān)系的生物進(jìn)行有效的竟?fàn)帲瓠h(huán)境發(fā)生不可見(jiàn)的破壞。作為人工制造成的轉(zhuǎn)基因作物,可能成為自然界不存在的外來(lái)品種,若干年后,可能對(duì)地壤、野生近緣種、普通作物、相鄰的植物及環(huán)境造成破壞。
(4),基因污染難以消除:基因化的生物、細(xì)菌、病毒等進(jìn)入環(huán)境,保存或恢復(fù)是不可能的,它不象化學(xué)或核污染,副面危害是不可逆轉(zhuǎn)的。
(5),轉(zhuǎn)基因作物通過(guò)基因流可使野生近緣種變?yōu)殡s草,成為“超級(jí)雜草”。有資料證明,把轉(zhuǎn)基因油菜釋放后,當(dāng)大田的油菜附近有近緣雜草時(shí),在萌發(fā)的后代種子中有93%被證實(shí)是種間雜草。
(6),對(duì)非目標(biāo)生物有傷害,對(duì)生物多樣性形成威脅:Hilbeck(1998)用轉(zhuǎn)基因Bt玉米喂飼歐洲玉米鉆心蟲(chóng)(ECB),并以它作為草蛉的飼料,GN喂飼一般玉米作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果,轉(zhuǎn)基因Bt玉米組死亡率60%以上,而對(duì)照組40%以下,認(rèn)為與Bt有關(guān)的因子有關(guān),存活的草蛉中喂Bt玉米組成熟的時(shí)間平均比對(duì)照組晚3天。Birch,A.等(1996/7)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯飼喂蚜蟲(chóng),雌蟲(chóng)的產(chǎn)卵量減少1/3,用喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯長(zhǎng)大的雄蚜蟲(chóng)與對(duì)照組蚜蟲(chóng)交配,所得的未受精卵數(shù)量多4倍,已受精卵在未孵化前比對(duì)照組死亡率高近3倍,以轉(zhuǎn)基因馬鈴薯蚜蟲(chóng)為食物的雌飄蟲(chóng)的存活時(shí)間比對(duì)照組少一半,如果大規(guī)模的種植轉(zhuǎn)基因作物,可能會(huì)減少有益昆蟲(chóng)的種群。
實(shí)際上,我們對(duì)DNA的了解是有限的,97%的人類(lèi)基因稱(chēng)為“廢品”,因?yàn)椴恢浪脑S多功能。單一細(xì)胞的新陳代謝是相當(dāng)復(fù)雜的,它們的整個(gè)過(guò)程就更難了解。
二、轉(zhuǎn)基因化生物的檢測(cè)進(jìn)展
盡管公眾對(duì)基因食品的安全性越來(lái)越關(guān)注,但要分離基因作物和非基因作物的代價(jià)相當(dāng)高。食物從農(nóng)場(chǎng)到餐桌要經(jīng)過(guò)多個(gè)環(huán)節(jié),每一個(gè)環(huán)節(jié)都有眾多的參與者,要分離基因作物和非基因作物可以說(shuō)是困難重重。
目前對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的檢測(cè)取得了進(jìn)展。對(duì)轉(zhuǎn)基因成份檢測(cè),必須快速、準(zhǔn)確、靈敏、可靠,同時(shí)含有轉(zhuǎn)基因成份的農(nóng)產(chǎn)品品種多,數(shù)量大,尤其是含有轉(zhuǎn)基因成份的食品,成份復(fù)雜,待檢測(cè)成份(核酸或蛋白質(zhì))往往已被降解或破壞,或僅含少量比例的轉(zhuǎn)基因成份,檢測(cè)難度很大。
通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因成份所獨(dú)有的DNA序列來(lái)提示基因表達(dá)譜。一是人工檢測(cè),在傳統(tǒng)的生物實(shí)驗(yàn)室中用人工測(cè)定,但是速度較慢,測(cè)定十幾個(gè)DNA片斷的序列(約合4000個(gè)堿基對(duì))至少需要一個(gè)工作日。二是儀器檢測(cè),PE3700-DNA序列分析儀及同類(lèi)儀器,一個(gè)工作日可測(cè)定近2000個(gè)DNA序列(約合70萬(wàn)個(gè)堿基對(duì))。英國(guó)RHM技術(shù)公司于1999年3月宣布發(fā)明一種新方法,它能精確測(cè)試出深加工的食品中是否含有微量轉(zhuǎn)基因大豆或玉米的成份以及配料中轉(zhuǎn)基因成份的具體比例。據(jù)研究人員介紹,它們?cè)鴮?duì)一塊面包進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其中含0.67%的豆粉成份,用新的方法進(jìn)行進(jìn)一步精確分析后,他們成功地發(fā)現(xiàn)這些微量豆粉中2%為轉(zhuǎn)基因成份。三是生物芯片,上海細(xì)胞生物學(xué)研究所(1999)研制成功生物芯片的初級(jí)形式“cDNA陣列”,用于檢測(cè)生物樣品中基因表達(dá)譜的改變。有一種不成熟的生物芯片在15分種完成了1.6萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)的測(cè)定,96個(gè)這樣的生物芯片平行工作,就相當(dāng)于每天1.47億個(gè)堿基對(duì)的分析能力。美國(guó)加州某公司于1996年成功制作出首次用DNA芯片,并制出“基因芯片”系統(tǒng)。此外,俄羅斯的某分子生物研究所,美國(guó)的其它公司也投入類(lèi)似的研究,并致力拓展應(yīng)用范圍。
據(jù)中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào)報(bào)道,我國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫部門(mén)應(yīng)用新的檢測(cè)方法,對(duì)部份進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè),從中檢出轉(zhuǎn)基因成份。國(guó)家檢驗(yàn)檢疫局植物檢疫實(shí)驗(yàn)所(2000)利用生物芯片技術(shù)原理,摸索出“親合吸附-PCRHyb-ELISA”檢測(cè)方法,此方法與國(guó)際已知的同類(lèi)方法PCR法相比,解決了轉(zhuǎn)基因檢測(cè)中樣品核酸制備的難題,同時(shí)降低了檢測(cè)成本和時(shí)間,提高了檢測(cè)靈敏度和穩(wěn)定性,提高了樣品檢測(cè)自動(dòng)化程度,適合口岸大樣品量的檢測(cè)。本檢測(cè)方法能特異的檢測(cè)出35S啟動(dòng)子和Nos終止子核酸系列,這兩種核酸系列存在目前已知的絕大部分轉(zhuǎn)基因成分中。
江蘇檢驗(yàn)檢疫局農(nóng)畜食品實(shí)驗(yàn)室科學(xué)地確定了以CTAB法提取DNA,從而掌握了PCR擴(kuò)增技術(shù)確定是否含有轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)方法,其被檢測(cè)試樣中轉(zhuǎn)基因成份達(dá)到2%就能準(zhǔn)確檢出。
上海檢驗(yàn)檢疫局和中科院上海植物生理研究所(2000)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因大米為檢測(cè)對(duì)象,采用PCR技術(shù),以CTAB法微量快速抽提法提取總DNA,對(duì)廣泛應(yīng)用的鑒定目的基因表達(dá)的報(bào)告基因GUS檢測(cè),能檢測(cè)大米混樣中含量在1%以上的轉(zhuǎn)基因大米。
以PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)將廣泛用于轉(zhuǎn)基因生物及食品的檢測(cè)(Kary,B.等,1994;Boyce,O.等,1998;Nobuaki,S.等,1998;Hoef van A.M.A.等,1998;Hupfer,C.等,1998)。它既可定性又可定量,比以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的免疫檢測(cè)法敏感100倍。但該技術(shù)的檢測(cè)結(jié)果也有可能是不相同的。其可信性和敏感性受DNA的抽提和純化,DNA的PCR分析技術(shù),PCR反應(yīng)產(chǎn)物的電泳分析三個(gè)因素的影響,其中DNA的純化和抽提是關(guān)鍵。如果DNA降解和受污染,檢測(cè)結(jié)果就達(dá)不到預(yù)期的檢測(cè)結(jié)果。若同時(shí)存在DNA降解和污染物,就有可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,即檢測(cè)物本身含有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而未檢出。而當(dāng)污染物存在時(shí),就可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,即本身未有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而測(cè)出有轉(zhuǎn)基因成份。所有這些結(jié)果均可能導(dǎo)致食品銷(xiāo)售或購(gòu)買(mǎi)者的經(jīng)濟(jì)災(zāi)難。
Robert,M.(1999)報(bào)告,值得注意的是轉(zhuǎn)基因生物轉(zhuǎn)變?yōu)槭称沸柚刂丶庸ぃ捎行У爻NA成份,人們最終食用的部份大多根本不含新增基因。在這個(gè)意義上,轉(zhuǎn)基因食品失去了所有曾加入的基因的記憶。如基因改良大豆含有除草劑基因,煉出的豆油經(jīng)檢測(cè)卻不含任何經(jīng)基因改良的DNA殘余,而未精煉的豆油里還可發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的痕跡,精煉的過(guò)程完全可以把它去除。從而增加了食品中檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成份的難度。食品轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)關(guān)鍵問(wèn)題是,食品中含有鹽、油、糖和其他蛋白質(zhì),加工后的食品在DNA的抽提過(guò)程中,要保證其DNA的純度,不受污染和降解。
歐盟JRC提出的1998環(huán)狀試驗(yàn)法幾乎44%的實(shí)驗(yàn)室不能完全對(duì)GMO的DNA的分析。
John,B.Fagan(2000)介紹了一種新方法,基因ID法可避免上述結(jié)果的出現(xiàn),采用異硫氰酸胍鹽抽提法可避免DNA的降解和污染,此法費(fèi)時(shí)又非常昂貴。而其它水溶性法則無(wú)法避免。基因ID法有以下優(yōu)點(diǎn):1,能對(duì)進(jìn)入市場(chǎng)的GMO進(jìn)行檢測(cè);2,具有三級(jí)檢測(cè)系統(tǒng),只有3個(gè)GMO特異引物均為陽(yáng)性時(shí),才能判為轉(zhuǎn)基因成份的存在;3,樣本用量大,比常規(guī)方法大10倍,許多實(shí)驗(yàn)室僅用能滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的樣本量;4,快速準(zhǔn)確定量,3天或3天以內(nèi)可得出定性或定量的結(jié)果;5,廣泛用于食品的檢測(cè),不僅能對(duì)原材料,還能對(duì)加工后的不同食品進(jìn)行檢測(cè);6,快速,36-24小時(shí)或3個(gè)工作日內(nèi)可得出結(jié)果。因其相當(dāng)精確和可信,認(rèn)為具有國(guó)際領(lǐng)先水平。
此法已用于豆類(lèi)和玉米及其衍生物,如整形玉米、豆餐、玉米胚、豆花(去脂和未去脂)、玉米粉、非烤豆粉、油煎玉米副產(chǎn)品餐、加工及完全脂性未烤豆粉餅、去脂烤豆粉、玉米面筋丸(正在改進(jìn)電泳技術(shù))、濃縮大豆蛋白、玉米糊產(chǎn)品、大豆分離蛋白、大豆外殼、豆乳(凍干和液狀)、豆乳酪(凍干和液狀)、大豆卵磷脂、豆油、豆子葉、豆類(lèi)嬰兒食品、豆芽、豆腐、豆類(lèi)香腸等基因成份的檢測(cè)。
所有的檢測(cè)方法均以樣品中含GMO少于XX%報(bào)告之。不能對(duì)整批貨物或生產(chǎn)線上的GMO準(zhǔn)確定量。
美國(guó)ADM公司集團(tuán)稱(chēng),該公司建立了一套農(nóng)作物身份識(shí)別系統(tǒng),可以保證向國(guó)外供應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品時(shí),不含基因作物。
三、評(píng)價(jià)
轉(zhuǎn)基因食品的安全性是一個(gè)很重要而復(fù)雜的問(wèn)題,應(yīng)謹(jǐn)慎對(duì)待,不要急于下結(jié)論。
1,食品安全性評(píng)價(jià)的必要性:傳統(tǒng)育種有100多年的歷史,它只限于種內(nèi)或近緣種間的有性雜交,從來(lái)沒(méi)有人提出生物安全性評(píng)價(jià)問(wèn)題。而轉(zhuǎn)基因食品是通過(guò)基因工程方法,按照人的意圖和目的而設(shè)計(jì)生物的性狀,顯然不同于傳統(tǒng)的育種方法。基因工程所用的基因來(lái)源于任何生物,生物種類(lèi)之間的界限完全被打亂。對(duì)出現(xiàn)的新組合和性狀在不同遺傳背景下的表達(dá)、對(duì)環(huán)境和人類(lèi)的影響還缺乏認(rèn)識(shí),有些甚至一無(wú)所知,因此對(duì)轉(zhuǎn)基因生物及食品的安全性評(píng)價(jià)是完全必要的。
2,食品安全性評(píng)價(jià)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題:(1),安全性是一個(gè)相對(duì)的和動(dòng)態(tài)的概念,隨著時(shí)間的推移和科學(xué)水平的提高,對(duì)食品安全性的認(rèn)識(shí)可能會(huì)發(fā)生改變;(2),任何時(shí)候食品供應(yīng)都不可能是100%的安全。如黃曲霉毒素、貝類(lèi)毒素等污染食物至今仍有發(fā)生;(3),100%缺乏有害影響的證據(jù)是從來(lái)都不可能達(dá)到的。沒(méi)有任何人發(fā)現(xiàn)已轉(zhuǎn)基因植物中的卵磷脂、大豆油或大豆淀粉食用后對(duì)健康有任何潛在的危險(xiǎn)。在缺乏任何假設(shè)的情況下要設(shè)計(jì)一種靈敏的試驗(yàn)是不可能的。食品的安全性試驗(yàn)最主要的問(wèn)題是提出相關(guān)科學(xué)問(wèn)題并加以回答,假如安全性分析包括所有可能的變數(shù),則會(huì)太復(fù)雜,難以處置。相反,若僅觀察少數(shù)變數(shù),則某些重要因素可能會(huì)被忽略。
3,經(jīng)濟(jì)發(fā)展合作組織(OECD)(1993)提出了食品安全性分析的原則--實(shí)質(zhì)等同性(Substantial equivalence)原則,即生物技術(shù)產(chǎn)生的食品及食品成份是否與目前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的食品具有實(shí)質(zhì)等同性(WHO,1995;FAO/WHO1996)。評(píng)價(jià)的內(nèi)容包括天然有毒物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成份和抗?fàn)I養(yǎng)因子、過(guò)敏原、工藝性狀等。WHO(1995)將此分為3類(lèi),1是與市售傳統(tǒng)商品有“實(shí)質(zhì)等同性”;2是除某些特定的差異外,與市售傳統(tǒng)商品有“實(shí)質(zhì)等同性”;3是與傳統(tǒng)食品沒(méi)有“實(shí)質(zhì)等同性”。考慮到轉(zhuǎn)基因生物的多樣性,應(yīng)采取個(gè)案分析原則,即不能說(shuō)轉(zhuǎn)基因食品是安全和不是安全的。轉(zhuǎn)基因食品的安全性評(píng)估主要包括:有無(wú)毒性,有無(wú)過(guò)敏性,以及抗生素抗性等標(biāo)記基因的安全性。然而,F(xiàn)DA的科學(xué)家們擔(dān)心,轉(zhuǎn)基因食品可能會(huì)帶來(lái)新的毒素和過(guò)敏原,利用簡(jiǎn)單的“實(shí)質(zhì)等同性原則”并不能發(fā)現(xiàn)這些新出現(xiàn)的問(wèn)題。WHO的專(zhuān)家們還建議轉(zhuǎn)基因食品安全評(píng)價(jià)要考慮消費(fèi)者的類(lèi)型、暴露水平、食品加工過(guò)程對(duì)食品安全的影響和潛在的食物營(yíng)養(yǎng)和成份的改變。
目前面臨的挑戰(zhàn)是對(duì)未知過(guò)敏原來(lái)源的蛋白質(zhì)的過(guò)敏性評(píng)價(jià)的困難。建議對(duì)常見(jiàn)的致敏食品不要進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移。
4,轉(zhuǎn)基因的安全檢測(cè):檢測(cè)急性中毒,大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為,可用短期的動(dòng)物飼喂實(shí)驗(yàn)。而檢測(cè)其它有害物質(zhì),就必須在人的志愿參加者中進(jìn)行。假如其物質(zhì)不是致死性的,它僅能引起頭痛,動(dòng)物試驗(yàn)是不可能得出結(jié)果的,兔是不能告訴研究者患頭痛。變態(tài)反應(yīng)在動(dòng)物體中也不能得到結(jié)果。WHO建議加強(qiáng)檢測(cè)方法學(xué)和動(dòng)物試驗(yàn)方法的研究。
四、展望
目前,以美國(guó)、日本、歐盟等國(guó)為代表的政府、社會(huì)團(tuán)體、生物公司等對(duì)轉(zhuǎn)基因生物和食品的安全性爭(zhēng)論不休,各執(zhí)已見(jiàn)。同時(shí)也制定了相應(yīng)的嚴(yán)格的管理辦法。轉(zhuǎn)基因食品安全性爭(zhēng)論已從技術(shù)問(wèn)題上升為貿(mào)易和政治問(wèn)題。
我們既要充分認(rèn)識(shí)轉(zhuǎn)基因生物的優(yōu)點(diǎn),又要高度重視其潛在的安全性問(wèn)題。迄今為止,國(guó)際國(guó)內(nèi)都尚未肯定轉(zhuǎn)基因食品的安全性,轉(zhuǎn)基因生物在遺傳及技術(shù)上的不穩(wěn)定性帶來(lái)的潛在危害不容忽視,對(duì)生態(tài)的影響、防止轉(zhuǎn)基因植物與野生種、雜草間通花粉傳播產(chǎn)生基因轉(zhuǎn)移還需更周密有效地控制。大部分已商業(yè)化的作物缺乏遺傳穩(wěn)定性資料。要大力開(kāi)展轉(zhuǎn)基因生物和食品的毒性、過(guò)敏性分析,加快轉(zhuǎn)基因生物和食品的鑒別檢測(cè)方法的研究,建立“轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)測(cè)”制度,制定科學(xué)的管理法規(guī),進(jìn)行有效地監(jiān)管,廣泛開(kāi)展轉(zhuǎn)基因生物的科學(xué)宣傳,正確的輿論導(dǎo)向。筆者相信,在合法研究的前提下,剔出少數(shù)不安全的因素后,抗逆、抗病蟲(chóng)害、雜草、抗枯萎、品質(zhì)好、產(chǎn)量高、耐干旱、抗凍、增加附加值、再生能源等優(yōu)點(diǎn)的生物將被廣泛應(yīng)用,以解決人類(lèi)食品短缺問(wèn)題。轉(zhuǎn)基因食品不但被人們坦然接受,而且還會(huì)給人類(lèi)帶來(lái)更多的實(shí)惠。
美國(guó)科學(xué)家正在研究一種名為“嵌合體移植術(shù)”的新技術(shù),既可以實(shí)施基因改性,又不需要植入外來(lái)基因,只要取一段DNA基因片段,將其與RNA結(jié)合在一起,就如同給細(xì)胞一種化學(xué)指令,使其按照要求的方式改變基因。最近發(fā)展的技術(shù),已可以允許其他標(biāo)識(shí)基因,而不必用抗抗生素基因。這些方法的成功,將在很大程度上解脫人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食品造成難以消除的“基因污染”的疑慮。
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綜述:轉(zhuǎn)基因生物和食品存在的安全性問(wèn)題、檢測(cè)和評(píng)價(jià)研究
2007-3-30 9:22:19 信息來(lái)源: 中國(guó)食品產(chǎn)業(yè)網(wǎng)
- 綜述:轉(zhuǎn)基因生物和食品存在的安全性問(wèn)題、檢測(cè)和評(píng)價(jià)研究 80年代初,美國(guó)最早對(duì)轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行研究。首例轉(zhuǎn)基因生物(GeneticallyModifiedOrganism,GMO)于1983年問(wèn)世,轉(zhuǎn)基因作物(1986)批準(zhǔn)進(jìn)行田間試驗(yàn),延熟保鮮番茄(1993)(Calgene公司生產(chǎn))在美國(guó)批準(zhǔn)上市,開(kāi)創(chuàng)了轉(zhuǎn)基因植物商業(yè)應(yīng)用的先例。6年來(lái),其發(fā)展更為迅速,超出人們預(yù)料。1998年全球轉(zhuǎn)基因作物和種植面積達(dá)2780萬(wàn)公頃,1999年增至3990萬(wàn)公頃,增
一、轉(zhuǎn)基因食品的安全性
GMO系一種或幾種植物或動(dòng)物乃至人類(lèi)的基因植入某一種生物,從而表現(xiàn)出本身自然不能擁有的由轉(zhuǎn)入基因帶來(lái)的新特性,達(dá)到改善其產(chǎn)品的品質(zhì)、提高營(yíng)養(yǎng)成份、增加其抗病、蟲(chóng)、害、增加產(chǎn)量、抗逆轉(zhuǎn)、延長(zhǎng)貨架期等。轉(zhuǎn)基因食品(Gene Food)系以轉(zhuǎn)基因生物為原料,加工為人類(lèi)所食用的產(chǎn)品。轉(zhuǎn)基因食品是一項(xiàng)新技術(shù)。
1,轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身的主要不足
(1),不精確的技術(shù):基因技術(shù)將一異源基因從一生物轉(zhuǎn)入另一生物,雖然其DNA可以精確地切割,但不能將新基因準(zhǔn)確地植入另一生物中,從而影響這一生物其它基因的基本功能。科學(xué)家無(wú)法預(yù)見(jiàn)植物基因化后產(chǎn)生新的,未知的蛋白質(zhì),也不能完全準(zhǔn)確的預(yù)見(jiàn)對(duì)受體影響的結(jié)果表現(xiàn)為不成熟性。
(2),副作用:基因技術(shù)像外科醫(yī)生動(dòng)心臟手術(shù)一樣,科學(xué)家不能完全、預(yù)先知道對(duì)生物進(jìn)行DNA手術(shù),有可能導(dǎo)致突變而對(duì)環(huán)境和人造成危害。雖然實(shí)驗(yàn)非常成熟,面對(duì)自然界的強(qiáng)大壓力,不能掌握所有對(duì)人類(lèi)可能造成影響的資料。
(3),農(nóng)作物廣泛減產(chǎn):基因技術(shù)通過(guò)不斷出售種子而獲取利潤(rùn),這就意味著,農(nóng)場(chǎng)主種植基因化種子時(shí),所有種植的植物基因相同。當(dāng)真菌、病毒、蟲(chóng)害侵襲這些特別的植物時(shí),會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的產(chǎn)量減產(chǎn)。
(4),嚴(yán)重影響整個(gè)食物供給:昆蟲(chóng)、鳥(niǎo)類(lèi)、野生物會(huì)攜帶基因化的種子到附近的田野,當(dāng)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生花粉時(shí),它們會(huì)交叉授花基因化的作物和野生物,所有的作物、有機(jī)物或無(wú)機(jī)物通過(guò)交叉授花易受污染。
2,衛(wèi)生危害
(1),未進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的安全性試驗(yàn):基因化食品改變了我們所食用食品的自然屬性,它所使用的生物物質(zhì)不是人類(lèi)食品安全提供的部份,未進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的安全試驗(yàn),沒(méi)有人知道這類(lèi)食品是安全的。
(2),產(chǎn)生毒素:基因化食品能產(chǎn)生不可預(yù)見(jiàn)的生物突變,會(huì)在食品中產(chǎn)生較高水平和新的毒素。Losey,J.E.等(1999)報(bào)道,在一種植物馬利筋葉片上撒有轉(zhuǎn)基因Bt玉米花粉后,普累克西普斑蝶食用葉片就少,長(zhǎng)得慢,4天的幼蟲(chóng)的死亡率44%。而對(duì)照組(飼喂不撒Bt玉米花粉的葉片)無(wú)一死亡。轉(zhuǎn)基因作物產(chǎn)生的殺蟲(chóng)毒素可由根部滲入周?chē)胁磺宄䲡?huì)產(chǎn)生何種影響。
(3),過(guò)敏或變態(tài)反應(yīng):基因技術(shù)會(huì)在食品中產(chǎn)生不能預(yù)見(jiàn)的和未知的變態(tài)反應(yīng)原。據(jù)報(bào)告,對(duì)巴西堅(jiān)果產(chǎn)生過(guò)敏的主體也會(huì)對(duì)用該堅(jiān)果基因工程化而得到的大豆產(chǎn)生過(guò)敏。科學(xué)家把巴西胡桃的特性移植到黃豆上去,結(jié)果卻使一些對(duì)胡桃過(guò)敏的人在攝取黃豆時(shí)有過(guò)敏的可能。植物凝血素(Lectin)對(duì)有些害蟲(chóng)來(lái)說(shuō)是有毒的,轉(zhuǎn)基因食品不得含有此類(lèi)有毒物質(zhì)。
(4),減少食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值或降解食品中重要的成份:基因化的目的是去除或滅活人們認(rèn)為不需要的物質(zhì),這些物質(zhì)可能是未知的,但它是基本的。比如它有自然的抑制癌癥的能力(Pariza,M.W.,1990)。美國(guó)的研究資料表明,在具有抗除草劑基因的大豆中,異黃酮類(lèi)激素等防癌的成份減少了。基因化食品的虛假新鮮感迷惑消費(fèi)者。具有芳香、有光澤的紅色蕃茄能貯藏幾周,但營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較低。消費(fèi)者在購(gòu)買(mǎi)水果或蔬菜時(shí),僅依靠外觀和質(zhì)地,因此,不能準(zhǔn)確判定該產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在環(huán)境中自然循環(huán)受到轉(zhuǎn)基因微生物的干擾。
(5),產(chǎn)生抗菌素耐藥性細(xì)菌:基因技術(shù)采用耐抗菌素(如抗卡那霉素、氨芐青霉素、新霉素、鏈霉素等)基因來(lái)標(biāo)識(shí)轉(zhuǎn)基因化的農(nóng)作物,這就意味著農(nóng)作物帶有耐抗菌素的基因。這些基因通過(guò)細(xì)菌而影響我們。英國(guó)的研究顯示,轉(zhuǎn)基因作物中的突變基因可能會(huì)進(jìn)入到生物有機(jī)體,突變的基因如跨越種群和轉(zhuǎn)移至細(xì)菌,其結(jié)果可能會(huì)導(dǎo)致新的疾病。雖然這種機(jī)會(huì)可能性很小,但如出現(xiàn)無(wú)法治療的并廣泛傳播的對(duì)生命造成嚴(yán)重威脅的疾病時(shí),其后果不堪設(shè)想。荷蘭科學(xué)家發(fā)表在《新科學(xué)家》雜志的試驗(yàn)結(jié)果稱(chēng),設(shè)計(jì)一人造胃,對(duì)人消化轉(zhuǎn)基因食物的過(guò)程進(jìn)行模擬,發(fā)現(xiàn)DNA滯留在腸內(nèi),同時(shí)一些轉(zhuǎn)基因細(xì)菌能夠把自己的抗生素抗性基因轉(zhuǎn)移給人造胃的細(xì)菌。如果類(lèi)似結(jié)果發(fā)生在人和動(dòng)物體內(nèi),就可能培養(yǎng)出功效最強(qiáng)的、抗菌素也無(wú)法殺死的超級(jí)細(xì)菌。英國(guó)新食品和工藝顧問(wèn)委員會(huì)就禁止一種用抗氨芐青霉素基因作標(biāo)識(shí)的轉(zhuǎn)基因改良玉米趨勢(shì)飼喂牛,因其中含有的DNA仍保持原樣,并有可能加速對(duì)抗菌素的抗藥性。
(6),產(chǎn)生的問(wèn)題不能進(jìn)行追蹤:若不進(jìn)行標(biāo)識(shí),我們的公共衛(wèi)生當(dāng)局就無(wú)力因出現(xiàn)問(wèn)題發(fā)現(xiàn)其來(lái)源,潛在性的危害值得懷疑。
(7),副作用能殺害人體:Mayeno,A.N.等(1994)報(bào)告,發(fā)生一種新的,不明原因的病癥,主要表現(xiàn)為嗜酸性肌痛。臨床表現(xiàn)有麻痹、神經(jīng)問(wèn)題、痛性腫脹、皮膚發(fā)癢、心臟出現(xiàn)問(wèn)題,記憶缺乏、頭痛、光敏、消瘦(Brenneman,D.E.等,1993;Love,L.A.等,1993)。后查明系日本一公司生的基因化工程細(xì)菌產(chǎn)生的色氨酸所致。食用者在3個(gè)月后發(fā)病,導(dǎo)致37人死亡,1500人體部份麻痹,5000多人發(fā)生偶爾性無(wú)力。據(jù)測(cè)定,含量為0.1%便可殺死人體。
3,直接危害
Lancet雜志1999年10月16日?qǐng)?bào)告,蘇格蘭Rowett研究所的Pusztai,A.(1998)首次用轉(zhuǎn)雪花蓮凝結(jié)素(GNA)基因的馬鈴薯喂大鼠,10天后,發(fā)現(xiàn)飼喂組大鼠結(jié)腸、空腸和部分小腸粘膜變厚,而未飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯組未發(fā)現(xiàn)病變。他認(rèn)為,也許是導(dǎo)入的基因激活或阻止植物中的其它基因的結(jié)果。另外觀察到,實(shí)驗(yàn)鼠腎臟、胸腺和脾臟生長(zhǎng)異常或萎縮或生長(zhǎng)不當(dāng),多個(gè)重要器官也遭到破壞,腦部萎縮,免疫系統(tǒng)變?nèi)酢km然英國(guó)皇家醫(yī)學(xué)會(huì)對(duì)此專(zhuān)門(mén)組織科學(xué)家進(jìn)行調(diào)查研究,認(rèn)為,該實(shí)驗(yàn)從設(shè)計(jì)、執(zhí)行到分析等多方面存在缺陷,不應(yīng)過(guò)早得出結(jié)論,雖然兩組存在差異,但因受實(shí)驗(yàn)技術(shù)的限制和不正確的利用統(tǒng)計(jì)學(xué),這些差異說(shuō)明不了問(wèn)題。但仍不能消除人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的疑慮。重組奶牛生產(chǎn)激素(rbGH)在美國(guó)投入商業(yè)化使用后,使用者很快發(fā)現(xiàn)這類(lèi)藥物導(dǎo)致了奶牛乳房炎發(fā)病率增加,奶牛的繁殖率低。由于藥物的作用,使奶牛的新陳代謝加快,導(dǎo)致能耗增加而引起死亡。牛奶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也降低了。科學(xué)家對(duì)獲準(zhǔn)在西班牙和美國(guó)商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因玉米和棉花進(jìn)行針對(duì)性研究后認(rèn)為,轉(zhuǎn)基因作物可能引起腦膜炎和其它新病種。也有資料證實(shí),轉(zhuǎn)基因食品可能誘發(fā)癌癥并傳遞給下一代以及導(dǎo)致失調(diào),可能需要30年或更長(zhǎng)的時(shí)間。
轉(zhuǎn)基因治療性藥物、人體組織器官等是否對(duì)人體健康造成影響。尚無(wú)法檢測(cè)證實(shí)。
4,環(huán)保的影響
(1),除草劑使用的增加:科學(xué)家估計(jì),基因化的農(nóng)作物對(duì)除草劑具有抵抗力,實(shí)際應(yīng)藥量高于正常的3倍。農(nóng)民知道其作物對(duì)除草劑有抵抗力,會(huì)大量使用除草劑。
(2),殺蟲(chóng)劑使用的增加:GE農(nóng)作物常使用自己特有的殺蟲(chóng)劑,EPA將其分類(lèi)為殺蟲(chóng)劑,這就意味著比以前有更多的殺蟲(chóng)劑進(jìn)入我們的食品和田野。有報(bào)導(dǎo),將優(yōu)良的特定的基因(如抗殺蟲(chóng)劑)植入作物,可能會(huì)使周?chē)吧参镆徊@得改良,呈現(xiàn)出抗殺蟲(chóng)劑的特征。
(3),生態(tài)被破壞:GEO通過(guò)食物鏈影響當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境,新的微生物與有親緣關(guān)系的生物進(jìn)行有效的竟?fàn)帲瓠h(huán)境發(fā)生不可見(jiàn)的破壞。作為人工制造成的轉(zhuǎn)基因作物,可能成為自然界不存在的外來(lái)品種,若干年后,可能對(duì)地壤、野生近緣種、普通作物、相鄰的植物及環(huán)境造成破壞。
(4),基因污染難以消除:基因化的生物、細(xì)菌、病毒等進(jìn)入環(huán)境,保存或恢復(fù)是不可能的,它不象化學(xué)或核污染,副面危害是不可逆轉(zhuǎn)的。
(5),轉(zhuǎn)基因作物通過(guò)基因流可使野生近緣種變?yōu)殡s草,成為“超級(jí)雜草”。有資料證明,把轉(zhuǎn)基因油菜釋放后,當(dāng)大田的油菜附近有近緣雜草時(shí),在萌發(fā)的后代種子中有93%被證實(shí)是種間雜草。
(6),對(duì)非目標(biāo)生物有傷害,對(duì)生物多樣性形成威脅:Hilbeck(1998)用轉(zhuǎn)基因Bt玉米喂飼歐洲玉米鉆心蟲(chóng)(ECB),并以它作為草蛉的飼料,GN喂飼一般玉米作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果,轉(zhuǎn)基因Bt玉米組死亡率60%以上,而對(duì)照組40%以下,認(rèn)為與Bt有關(guān)的因子有關(guān),存活的草蛉中喂Bt玉米組成熟的時(shí)間平均比對(duì)照組晚3天。Birch,A.等(1996/7)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯飼喂蚜蟲(chóng),雌蟲(chóng)的產(chǎn)卵量減少1/3,用喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯長(zhǎng)大的雄蚜蟲(chóng)與對(duì)照組蚜蟲(chóng)交配,所得的未受精卵數(shù)量多4倍,已受精卵在未孵化前比對(duì)照組死亡率高近3倍,以轉(zhuǎn)基因馬鈴薯蚜蟲(chóng)為食物的雌飄蟲(chóng)的存活時(shí)間比對(duì)照組少一半,如果大規(guī)模的種植轉(zhuǎn)基因作物,可能會(huì)減少有益昆蟲(chóng)的種群。
實(shí)際上,我們對(duì)DNA的了解是有限的,97%的人類(lèi)基因稱(chēng)為“廢品”,因?yàn)椴恢浪脑S多功能。單一細(xì)胞的新陳代謝是相當(dāng)復(fù)雜的,它們的整個(gè)過(guò)程就更難了解。
二、轉(zhuǎn)基因化生物的檢測(cè)進(jìn)展
盡管公眾對(duì)基因食品的安全性越來(lái)越關(guān)注,但要分離基因作物和非基因作物的代價(jià)相當(dāng)高。食物從農(nóng)場(chǎng)到餐桌要經(jīng)過(guò)多個(gè)環(huán)節(jié),每一個(gè)環(huán)節(jié)都有眾多的參與者,要分離基因作物和非基因作物可以說(shuō)是困難重重。
目前對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的檢測(cè)取得了進(jìn)展。對(duì)轉(zhuǎn)基因成份檢測(cè),必須快速、準(zhǔn)確、靈敏、可靠,同時(shí)含有轉(zhuǎn)基因成份的農(nóng)產(chǎn)品品種多,數(shù)量大,尤其是含有轉(zhuǎn)基因成份的食品,成份復(fù)雜,待檢測(cè)成份(核酸或蛋白質(zhì))往往已被降解或破壞,或僅含少量比例的轉(zhuǎn)基因成份,檢測(cè)難度很大。
通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因成份所獨(dú)有的DNA序列來(lái)提示基因表達(dá)譜。一是人工檢測(cè),在傳統(tǒng)的生物實(shí)驗(yàn)室中用人工測(cè)定,但是速度較慢,測(cè)定十幾個(gè)DNA片斷的序列(約合4000個(gè)堿基對(duì))至少需要一個(gè)工作日。二是儀器檢測(cè),PE3700-DNA序列分析儀及同類(lèi)儀器,一個(gè)工作日可測(cè)定近2000個(gè)DNA序列(約合70萬(wàn)個(gè)堿基對(duì))。英國(guó)RHM技術(shù)公司于1999年3月宣布發(fā)明一種新方法,它能精確測(cè)試出深加工的食品中是否含有微量轉(zhuǎn)基因大豆或玉米的成份以及配料中轉(zhuǎn)基因成份的具體比例。據(jù)研究人員介紹,它們?cè)鴮?duì)一塊面包進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其中含0.67%的豆粉成份,用新的方法進(jìn)行進(jìn)一步精確分析后,他們成功地發(fā)現(xiàn)這些微量豆粉中2%為轉(zhuǎn)基因成份。三是生物芯片,上海細(xì)胞生物學(xué)研究所(1999)研制成功生物芯片的初級(jí)形式“cDNA陣列”,用于檢測(cè)生物樣品中基因表達(dá)譜的改變。有一種不成熟的生物芯片在15分種完成了1.6萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)的測(cè)定,96個(gè)這樣的生物芯片平行工作,就相當(dāng)于每天1.47億個(gè)堿基對(duì)的分析能力。美國(guó)加州某公司于1996年成功制作出首次用DNA芯片,并制出“基因芯片”系統(tǒng)。此外,俄羅斯的某分子生物研究所,美國(guó)的其它公司也投入類(lèi)似的研究,并致力拓展應(yīng)用范圍。
據(jù)中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào)報(bào)道,我國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫部門(mén)應(yīng)用新的檢測(cè)方法,對(duì)部份進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè),從中檢出轉(zhuǎn)基因成份。國(guó)家檢驗(yàn)檢疫局植物檢疫實(shí)驗(yàn)所(2000)利用生物芯片技術(shù)原理,摸索出“親合吸附-PCRHyb-ELISA”檢測(cè)方法,此方法與國(guó)際已知的同類(lèi)方法PCR法相比,解決了轉(zhuǎn)基因檢測(cè)中樣品核酸制備的難題,同時(shí)降低了檢測(cè)成本和時(shí)間,提高了檢測(cè)靈敏度和穩(wěn)定性,提高了樣品檢測(cè)自動(dòng)化程度,適合口岸大樣品量的檢測(cè)。本檢測(cè)方法能特異的檢測(cè)出35S啟動(dòng)子和Nos終止子核酸系列,這兩種核酸系列存在目前已知的絕大部分轉(zhuǎn)基因成分中。
江蘇檢驗(yàn)檢疫局農(nóng)畜食品實(shí)驗(yàn)室科學(xué)地確定了以CTAB法提取DNA,從而掌握了PCR擴(kuò)增技術(shù)確定是否含有轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)方法,其被檢測(cè)試樣中轉(zhuǎn)基因成份達(dá)到2%就能準(zhǔn)確檢出。
上海檢驗(yàn)檢疫局和中科院上海植物生理研究所(2000)應(yīng)用轉(zhuǎn)基因大米為檢測(cè)對(duì)象,采用PCR技術(shù),以CTAB法微量快速抽提法提取總DNA,對(duì)廣泛應(yīng)用的鑒定目的基因表達(dá)的報(bào)告基因GUS檢測(cè),能檢測(cè)大米混樣中含量在1%以上的轉(zhuǎn)基因大米。
以PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)將廣泛用于轉(zhuǎn)基因生物及食品的檢測(cè)(Kary,B.等,1994;Boyce,O.等,1998;Nobuaki,S.等,1998;Hoef van A.M.A.等,1998;Hupfer,C.等,1998)。它既可定性又可定量,比以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的免疫檢測(cè)法敏感100倍。但該技術(shù)的檢測(cè)結(jié)果也有可能是不相同的。其可信性和敏感性受DNA的抽提和純化,DNA的PCR分析技術(shù),PCR反應(yīng)產(chǎn)物的電泳分析三個(gè)因素的影響,其中DNA的純化和抽提是關(guān)鍵。如果DNA降解和受污染,檢測(cè)結(jié)果就達(dá)不到預(yù)期的檢測(cè)結(jié)果。若同時(shí)存在DNA降解和污染物,就有可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,即檢測(cè)物本身含有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而未檢出。而當(dāng)污染物存在時(shí),就可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,即本身未有轉(zhuǎn)基因物質(zhì),而測(cè)出有轉(zhuǎn)基因成份。所有這些結(jié)果均可能導(dǎo)致食品銷(xiāo)售或購(gòu)買(mǎi)者的經(jīng)濟(jì)災(zāi)難。
Robert,M.(1999)報(bào)告,值得注意的是轉(zhuǎn)基因生物轉(zhuǎn)變?yōu)槭称沸柚刂丶庸ぃ捎行У爻NA成份,人們最終食用的部份大多根本不含新增基因。在這個(gè)意義上,轉(zhuǎn)基因食品失去了所有曾加入的基因的記憶。如基因改良大豆含有除草劑基因,煉出的豆油經(jīng)檢測(cè)卻不含任何經(jīng)基因改良的DNA殘余,而未精煉的豆油里還可發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的痕跡,精煉的過(guò)程完全可以把它去除。從而增加了食品中檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成份的難度。食品轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)關(guān)鍵問(wèn)題是,食品中含有鹽、油、糖和其他蛋白質(zhì),加工后的食品在DNA的抽提過(guò)程中,要保證其DNA的純度,不受污染和降解。
歐盟JRC提出的1998環(huán)狀試驗(yàn)法幾乎44%的實(shí)驗(yàn)室不能完全對(duì)GMO的DNA的分析。
John,B.Fagan(2000)介紹了一種新方法,基因ID法可避免上述結(jié)果的出現(xiàn),采用異硫氰酸胍鹽抽提法可避免DNA的降解和污染,此法費(fèi)時(shí)又非常昂貴。而其它水溶性法則無(wú)法避免。基因ID法有以下優(yōu)點(diǎn):1,能對(duì)進(jìn)入市場(chǎng)的GMO進(jìn)行檢測(cè);2,具有三級(jí)檢測(cè)系統(tǒng),只有3個(gè)GMO特異引物均為陽(yáng)性時(shí),才能判為轉(zhuǎn)基因成份的存在;3,樣本用量大,比常規(guī)方法大10倍,許多實(shí)驗(yàn)室僅用能滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的樣本量;4,快速準(zhǔn)確定量,3天或3天以內(nèi)可得出定性或定量的結(jié)果;5,廣泛用于食品的檢測(cè),不僅能對(duì)原材料,還能對(duì)加工后的不同食品進(jìn)行檢測(cè);6,快速,36-24小時(shí)或3個(gè)工作日內(nèi)可得出結(jié)果。因其相當(dāng)精確和可信,認(rèn)為具有國(guó)際領(lǐng)先水平。
此法已用于豆類(lèi)和玉米及其衍生物,如整形玉米、豆餐、玉米胚、豆花(去脂和未去脂)、玉米粉、非烤豆粉、油煎玉米副產(chǎn)品餐、加工及完全脂性未烤豆粉餅、去脂烤豆粉、玉米面筋丸(正在改進(jìn)電泳技術(shù))、濃縮大豆蛋白、玉米糊產(chǎn)品、大豆分離蛋白、大豆外殼、豆乳(凍干和液狀)、豆乳酪(凍干和液狀)、大豆卵磷脂、豆油、豆子葉、豆類(lèi)嬰兒食品、豆芽、豆腐、豆類(lèi)香腸等基因成份的檢測(cè)。
所有的檢測(cè)方法均以樣品中含GMO少于XX%報(bào)告之。不能對(duì)整批貨物或生產(chǎn)線上的GMO準(zhǔn)確定量。
美國(guó)ADM公司集團(tuán)稱(chēng),該公司建立了一套農(nóng)作物身份識(shí)別系統(tǒng),可以保證向國(guó)外供應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品時(shí),不含基因作物。
三、評(píng)價(jià)
轉(zhuǎn)基因食品的安全性是一個(gè)很重要而復(fù)雜的問(wèn)題,應(yīng)謹(jǐn)慎對(duì)待,不要急于下結(jié)論。
1,食品安全性評(píng)價(jià)的必要性:傳統(tǒng)育種有100多年的歷史,它只限于種內(nèi)或近緣種間的有性雜交,從來(lái)沒(méi)有人提出生物安全性評(píng)價(jià)問(wèn)題。而轉(zhuǎn)基因食品是通過(guò)基因工程方法,按照人的意圖和目的而設(shè)計(jì)生物的性狀,顯然不同于傳統(tǒng)的育種方法。基因工程所用的基因來(lái)源于任何生物,生物種類(lèi)之間的界限完全被打亂。對(duì)出現(xiàn)的新組合和性狀在不同遺傳背景下的表達(dá)、對(duì)環(huán)境和人類(lèi)的影響還缺乏認(rèn)識(shí),有些甚至一無(wú)所知,因此對(duì)轉(zhuǎn)基因生物及食品的安全性評(píng)價(jià)是完全必要的。
2,食品安全性評(píng)價(jià)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題:(1),安全性是一個(gè)相對(duì)的和動(dòng)態(tài)的概念,隨著時(shí)間的推移和科學(xué)水平的提高,對(duì)食品安全性的認(rèn)識(shí)可能會(huì)發(fā)生改變;(2),任何時(shí)候食品供應(yīng)都不可能是100%的安全。如黃曲霉毒素、貝類(lèi)毒素等污染食物至今仍有發(fā)生;(3),100%缺乏有害影響的證據(jù)是從來(lái)都不可能達(dá)到的。沒(méi)有任何人發(fā)現(xiàn)已轉(zhuǎn)基因植物中的卵磷脂、大豆油或大豆淀粉食用后對(duì)健康有任何潛在的危險(xiǎn)。在缺乏任何假設(shè)的情況下要設(shè)計(jì)一種靈敏的試驗(yàn)是不可能的。食品的安全性試驗(yàn)最主要的問(wèn)題是提出相關(guān)科學(xué)問(wèn)題并加以回答,假如安全性分析包括所有可能的變數(shù),則會(huì)太復(fù)雜,難以處置。相反,若僅觀察少數(shù)變數(shù),則某些重要因素可能會(huì)被忽略。
3,經(jīng)濟(jì)發(fā)展合作組織(OECD)(1993)提出了食品安全性分析的原則--實(shí)質(zhì)等同性(Substantial equivalence)原則,即生物技術(shù)產(chǎn)生的食品及食品成份是否與目前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的食品具有實(shí)質(zhì)等同性(WHO,1995;FAO/WHO1996)。評(píng)價(jià)的內(nèi)容包括天然有毒物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成份和抗?fàn)I養(yǎng)因子、過(guò)敏原、工藝性狀等。WHO(1995)將此分為3類(lèi),1是與市售傳統(tǒng)商品有“實(shí)質(zhì)等同性”;2是除某些特定的差異外,與市售傳統(tǒng)商品有“實(shí)質(zhì)等同性”;3是與傳統(tǒng)食品沒(méi)有“實(shí)質(zhì)等同性”。考慮到轉(zhuǎn)基因生物的多樣性,應(yīng)采取個(gè)案分析原則,即不能說(shuō)轉(zhuǎn)基因食品是安全和不是安全的。轉(zhuǎn)基因食品的安全性評(píng)估主要包括:有無(wú)毒性,有無(wú)過(guò)敏性,以及抗生素抗性等標(biāo)記基因的安全性。然而,F(xiàn)DA的科學(xué)家們擔(dān)心,轉(zhuǎn)基因食品可能會(huì)帶來(lái)新的毒素和過(guò)敏原,利用簡(jiǎn)單的“實(shí)質(zhì)等同性原則”并不能發(fā)現(xiàn)這些新出現(xiàn)的問(wèn)題。WHO的專(zhuān)家們還建議轉(zhuǎn)基因食品安全評(píng)價(jià)要考慮消費(fèi)者的類(lèi)型、暴露水平、食品加工過(guò)程對(duì)食品安全的影響和潛在的食物營(yíng)養(yǎng)和成份的改變。
目前面臨的挑戰(zhàn)是對(duì)未知過(guò)敏原來(lái)源的蛋白質(zhì)的過(guò)敏性評(píng)價(jià)的困難。建議對(duì)常見(jiàn)的致敏食品不要進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移。
4,轉(zhuǎn)基因的安全檢測(cè):檢測(cè)急性中毒,大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為,可用短期的動(dòng)物飼喂實(shí)驗(yàn)。而檢測(cè)其它有害物質(zhì),就必須在人的志愿參加者中進(jìn)行。假如其物質(zhì)不是致死性的,它僅能引起頭痛,動(dòng)物試驗(yàn)是不可能得出結(jié)果的,兔是不能告訴研究者患頭痛。變態(tài)反應(yīng)在動(dòng)物體中也不能得到結(jié)果。WHO建議加強(qiáng)檢測(cè)方法學(xué)和動(dòng)物試驗(yàn)方法的研究。
四、展望
目前,以美國(guó)、日本、歐盟等國(guó)為代表的政府、社會(huì)團(tuán)體、生物公司等對(duì)轉(zhuǎn)基因生物和食品的安全性爭(zhēng)論不休,各執(zhí)已見(jiàn)。同時(shí)也制定了相應(yīng)的嚴(yán)格的管理辦法。轉(zhuǎn)基因食品安全性爭(zhēng)論已從技術(shù)問(wèn)題上升為貿(mào)易和政治問(wèn)題。
我們既要充分認(rèn)識(shí)轉(zhuǎn)基因生物的優(yōu)點(diǎn),又要高度重視其潛在的安全性問(wèn)題。迄今為止,國(guó)際國(guó)內(nèi)都尚未肯定轉(zhuǎn)基因食品的安全性,轉(zhuǎn)基因生物在遺傳及技術(shù)上的不穩(wěn)定性帶來(lái)的潛在危害不容忽視,對(duì)生態(tài)的影響、防止轉(zhuǎn)基因植物與野生種、雜草間通花粉傳播產(chǎn)生基因轉(zhuǎn)移還需更周密有效地控制。大部分已商業(yè)化的作物缺乏遺傳穩(wěn)定性資料。要大力開(kāi)展轉(zhuǎn)基因生物和食品的毒性、過(guò)敏性分析,加快轉(zhuǎn)基因生物和食品的鑒別檢測(cè)方法的研究,建立“轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)測(cè)”制度,制定科學(xué)的管理法規(guī),進(jìn)行有效地監(jiān)管,廣泛開(kāi)展轉(zhuǎn)基因生物的科學(xué)宣傳,正確的輿論導(dǎo)向。筆者相信,在合法研究的前提下,剔出少數(shù)不安全的因素后,抗逆、抗病蟲(chóng)害、雜草、抗枯萎、品質(zhì)好、產(chǎn)量高、耐干旱、抗凍、增加附加值、再生能源等優(yōu)點(diǎn)的生物將被廣泛應(yīng)用,以解決人類(lèi)食品短缺問(wèn)題。轉(zhuǎn)基因食品不但被人們坦然接受,而且還會(huì)給人類(lèi)帶來(lái)更多的實(shí)惠。
美國(guó)科學(xué)家正在研究一種名為“嵌合體移植術(shù)”的新技術(shù),既可以實(shí)施基因改性,又不需要植入外來(lái)基因,只要取一段DNA基因片段,將其與RNA結(jié)合在一起,就如同給細(xì)胞一種化學(xué)指令,使其按照要求的方式改變基因。最近發(fā)展的技術(shù),已可以允許其他標(biāo)識(shí)基因,而不必用抗抗生素基因。這些方法的成功,將在很大程度上解脫人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食品造成難以消除的“基因污染”的疑慮。
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嘿嘿 ,”發(fā)酵的細(xì)菌也被你吃了啊“ 看來(lái)沒(méi)什么損失了。。。