方法編號:CDC-2041
1 適用范圍:本方法適用于蘇丹紅(1、2、3、4號)等油溶性非食用色素的現場快速檢測。
2 方法原理:根據蘇丹紅等油溶性非食用色素的化學極性不同,通過展開劑在試紙上的展開距離不同來確定確定組分的存在。
3 檢測試材(試劑盒組成):快速層析紙,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號系列蘇丹紅對照液,展開劑,毛細管。
4 樣品處理:取約1g樣品于容器中,加入2~4 mL乙酸乙酯,充分混勻,提取1min,靜置3min以上。
5 點樣:取一張層析紙,在端底向上約1cm處、平行相隔約1cm、用鉛筆畫出將要點樣的+字線或五個小點。取1支毛細管沾取樣品溶液的上層液,將其分別點在五個+字線上(樣品溶液顏色較淺時,可在每次點樣斑點揮干后重復點樣),斑點直徑控制在5毫米以內。另取四支毛細管分別沾取蘇丹紅1、2、3、4號對照液少許分別點在樣品的原點上。
6 展開:取一個250mL以上的燒杯,加入約5mL展開劑,將層析紙(樣品端朝下)插入展開劑中靠在杯壁上,待展開劑延層析紙向上平行展開至層析紙頂端約1厘米處時取出層析紙,觀察結果。
7 結果判斷
7.1在本實驗條件下,如果樣品在展開軌跡中出現斑點,其斑點展開(向上跑)的距離與某一對照液展開后的斑點距離相等、顏色相同或顏色雖淺卻相近時,即可判斷樣品中含有這一色素。
7.2我國允許使用的色素除天然色素外沒有油溶性色素,天然色素的化學極性往往很小,樣品中即使含有天然色素,展開后的色斑會在前沿之處出現淡色斑點或淡色條帶。
7.3如果對照物已經展開,而樣品色斑在原處未動或展開的距離很小,表明這一色素為水溶性色素,可用水溶性色素檢測試劑來判斷其是食用的還是非食用的。
8 注意事項:
8.1本方法檢出限為點樣量10 µL,0.08µg 目視可見;最低檢出濃度8µg/mL。精確定量需要采用高效液相色譜儀。
8.2 檢測的樣品數量較多時,不必每張層析紙上都點對照液,可一次點幾個樣品,當展開過程中出現斑點后,再做加入對照液實驗。
8.3 蘇丹紅對照液的點樣量不要太多,以能夠展現斑點而無拖尾現象為宜。
8.4 展開劑的使用應適量,液面高度應控制在斑點以下,展開過程中層析紙不能傾倒,每展一張層析紙最好更換一次展開劑。
8.5 樣品展開時,燒杯上不要蓋蓋,以便于斑點的展開。當環境溫度較低,斑點展開的距離較短;或環境溫度較高,展開劑展開到層析紙一半距離不再往上展時,應重新操作并在燒杯上加蓋物品。
8.6 如果對照物展開后全部堆積到展開前沿處或原點處為移動,說明試劑或操作有問題,應查明原因重新操作。
9 試劑質量控制:將蘇丹紅系列對照液在試紙上按產品說明展開,應明顯區分出不同的展開距離,否則試劑不可再用。
10 產品儲藏與效期:試劑閉光常溫保存,有效期為1年。