小反芻獸疫(PPR),也稱(chēng)羊瘟,是由副黏病毒科麻疹病毒屬小反芻獸疫病毒(PPRV)引起的,以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征的急性接觸性傳染病,山羊和綿羊易感,且山羊發(fā)病率和病死率均較高。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。除山羊外,PPR感染并不具有明顯的臨床癥狀,加之其傳播迅速,病程較短,因此快速確定疫情并采取有效的防控措施,對(duì)于保護(hù)地區(qū)經(jīng)濟(jì),保護(hù)養(yǎng)戶(hù)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)熱情具有重要意義。
根據(jù)《小反芻獸疫防治技術(shù)規(guī)范》要求,病原學(xué)診斷是PPR確診的重要依據(jù),推薦的方法包括病毒的細(xì)胞分離鑒定、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),檢測(cè)條件為生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室(BSL-Ⅲ)。限于實(shí)驗(yàn)器材和技術(shù)難度,上述均方法無(wú)法在生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)開(kāi)展。由此而發(fā)生的采樣、送檢、結(jié)果報(bào)告等過(guò)程時(shí)滯,對(duì)于疫情控制亦造成了不可避免的延誤。
核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的成熟發(fā)展催生了現(xiàn)場(chǎng)分子診斷方法。以基因試紙卡為例,該技術(shù)融合了核酸診斷方法的靈敏特異及試紙法判讀的簡(jiǎn)單方便,僅需恒溫裝置和低速離心機(jī)即可完成全部操作,對(duì)檢測(cè)環(huán)境無(wú)限制要求且不產(chǎn)生任何生物污染。基因試紙卡實(shí)現(xiàn)了核酸診斷技術(shù)的現(xiàn)場(chǎng)化使用,在疫病凈化、引種篩查及生產(chǎn)、加工現(xiàn)場(chǎng)檢疫等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
利用現(xiàn)場(chǎng)分子診斷技術(shù),結(jié)合流行病學(xué)分析,當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)口腔炎癥癥狀、呼吸道癥狀等PPR早期癥狀,即可對(duì)其口鼻拭子進(jìn)行基因試紙卡檢測(cè);蛟嚰埧ǖ囊撞僮鳌⒌统杀,以及特異性和靈敏性,為PPR的早發(fā)現(xiàn)、早確診提供了有力的工具。