實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久,早在史前時期,先人們就學會釀酒。約在6000年前,就發明發面的方法。直到十九世紀有了顯微鏡 ,人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯,他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌的。
材料器具 甜酒釀汁液,新鮮酵母 ,豆芽;顯微鏡,載玻片,蓋玻皮,玻璃棒,鑷子,滴管,吸水紙,酒精燈,石棉網,火柴,漏斗架,玻璃斗,量杯,三角燒瓶,燒杯,天平,量筒,棉絮;蔗糖,乳酸,碘液。
步驟
1.觀察酵母菌
(1)用滴管從甜酒釀的汁液中吸取一滴汁液,滴在載玻片上,用針攤開,蓋上蓋玻片,在低倍鏡下就能清楚地看到甜酒釀的汁液中懸浮著無數酵母菌。再換高倍鏡仔細觀察一個酵母菌,可以看到酵母菌是橢圓形的單個細胞,細胞中有許多小顆粒,也有幾個大的液泡(圖示)。有的酵母菌的一端長出大小不同的突起,這是酵母菌的芽體。芽體成長脫落,就成為新的個體,有的芽體在從母體脫落前又長出突起。這種繁殖方法叫出芽繁殖。
(2)在蓋玻片一邊加一滴碘液,從另一邊用吸水紙把染液引入蓋玻片下。不久就能看到被染成棕褐色的細胞核和變成藍紫色的淀粉粒。
2.培養酵母菌
(1)用蔗糖液培養 在盛有100毫升的三角燒瓶里加5克蔗糖,煮沸。等到溶液稍稍冷卻,加一小塊鮮酵母,用玻璃棒攪拌均勻;再用棉絮塞緊瓶口。然后把燒瓶放在 25~30℃的溫暖地方,數小時后就可見到溶液里有氣泡產生,并散發出酒味。這是因為酵母菌正在把糖分解成乙醇和二氧化碳。
(2)二三天后吸取溶液在顯微鏡下觀察,就可看到已培養出大量酵母菌。
注意事項
1.觀察酵母菌時,視野里雜質較多,有淀粉粒、半分解的淀粉團塊、曲霉孢子和其他雜菌等等,只要掌握住酵母菌的形狀和體內具有液泡,尤其是染色后體內具有褐色的核和藍色的淀粉粒這些特點,就可以跟其他雜菌區分開來。
2.發酵在缺氧的環境里仍能良好地進行,不必為了增加氧氣去攪拌已放入菌種的培養液。
分析和討論
酵母菌是少數能在缺氧環境里生存較長時間的一種微生物,它屬于兼性菌類。在一般情況下進行有氧呼吸。如環境中有豐富的糖類,它進行缺氧呼吸。其過程如下:
1.C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O+2.87×103兆焦(有氧呼吸)
2.C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+109×103兆焦(缺氧呼吸)
建議 培養酵母菌還可以采用下列兩種方法。
1.用乳酸、豆芽汁和蔗糖液培養
(1)取10克豆芽放入100毫升水中,加熱煮沸半小時,盛起,用細布過濾。在濾液里加5克蔗糖和5毫升乳酸,配成液體培養液。
(2)把鮮酵母半塊或老面(發酵后晾干的面粉團)打碎,投入培養液中,放在黑暗溫暖的地方,二三天后就可以培養出大量酵母菌。
2.用巴斯德培養液培養
酵母菌需要的無機營養來自外界環境。如果在培養液內適當增加氮、磷等元素,效果會更好。巴斯德培養液的配方如下:
蔗糖15克,碳酸銨1克,磷酸氫鉀0.2克,磷酸鈣0.02克,硫酸鎂0.02克,蒸餾水100毫升,培養方法跟上述的相同。