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弓形蟲病實驗室診斷與結果分析

放大字體  縮小字體 發布日期:2013-09-22  來源:實驗室資訊網
核心提示:弓形蟲病(toxoplasma)是由剛地弓形蟲引起的人畜共患的傳染病,具有廣泛的自然疫源性,很多哺乳動物和鳥類均可罹患此病。弓形蟲
 弓形蟲病(toxoplasma)是由剛地弓形蟲引起的人畜共患的傳染病,具有廣泛的自然疫源性,很多哺乳動物和鳥類均可罹患此病。弓形蟲侵襲人體可導致弓形蟲感染和弓形蟲病,后者專指有臨床表現和活動性感染的病理學改變。人體弓形蟲感染多為隱性感染,但抵抗力低下時,則可出現嚴重的臨床癥狀。先天性感染常致胎兒畸形、死胎及流產。
[病因學] 弓形蟲生活史包括有性生殖和無性生殖2個階段,全過程需兩種宿主——終末宿主(貓及貓科動物)和中間宿主(其他動物或人體內)。弓形蟲發育全過程有5種不同形態:即滋養體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。
貓食人弓形體卵囊或包囊后,在腸腔分別釋放出子孢子和滋養體,并侵入小腸上皮細胞進行裂體增殖,部分裂殖子發育為雌雄配子體,兩者結合為合子,發育為卵囊,隨貓糞排出體外。
人食人弓形體卵囊或吞食包囊后,在腸內逸出子孢子、緩殖子或速殖子,隨即侵入腸壁經血或淋巴進入單核吞噬細胞系統寄生,并擴散至全身各器官組織的實質細胞內繁殖,導致細胞破裂,引起各種急性病癥。在免疫功能正常的機體,部分速殖子侵入宿主細胞后,特別是腦、眼、骨骼肌的蟲體繁殖速度減慢,并形成包囊,包囊在宿主體內可存活數月、數年,甚至終身不等。當機體免疫功能低下或長期應用免疫抑制藥時,組織內的包囊可破裂,釋出緩殖子,進入血流和其他新的組織細胞繼續發育繁殖。
速殖子期是弓形蟲的主要致病階段,以其對宿主細胞的侵襲力和在有核細胞內獨特的內二芽殖法增殖破壞宿主細胞。蟲體逸出后又重新侵入新的細胞,刺激淋巴細胞、巨噬細胞的浸潤,導致組織的急性炎癥和壞死。
包囊內緩殖于是引起慢性感染的主要形式,包囊因緩殖子增殖而體積增大,擠壓器官,使功能受到障礙。包囊增大到一定程度,可因多種因素而破裂。游離的蟲體可刺激機體產生遲發性變態反應,并形成肉芽腫病變,后期的纖維鈣化灶多見于腦、眼部等。宿主感染弓形蟲后,在正常情況下,可產生有效的保護性免疫,多數無明顯癥狀,當宿主有免疫缺陷或免疫功能低下時才引起弓形蟲病,即使在隱性感染,也可導致復發或致死的播散性感染;近幾年有報道艾滋病患者因患弓形蟲腦炎而致死。
[實驗室診斷]
特異性檢查
(1)涂片檢查。
(2)動物接種分離法。
(3)血清學檢查。
(4)分子生物學診斷。
[結果分析與判斷]
1.涂片檢查 取急性期患者的體液、腦脊液、血液、骨髓、羊水、胸水經離心后,沉淀物作涂片,或采用活組織穿刺物涂片,經姬姆薩染色后,顯微鏡下檢查出弓形蟲滋養體即可確診。此法簡便,但陽性率不高、易漏檢。此外也可切片用免疫酶或熒光染色法,觀察特異性反應,可提高蟲體的檢出率。
2.動物接種分離法 動物接種分離法或細胞培養法查找滋養體。采用敏感的實驗動物小白鼠,樣本接種于腹腔內,1周后剖殺取腹腔液顯微鏡檢查,陰性需盲目傳代至少3次;樣本亦可接種于離體培養的單層有核細胞。動物接種和細胞培養是目前常用的病原查診方法。
3.血清學檢查 由于弓形蟲病原學檢查存在不足,血清學檢查成為廣泛應用的診斷手段。方法種類較多,主要有以下4種。
(1)染色試驗:為經典的特異血清學方法,采用活滋養體在有致活因子的參與下與樣本內特異性抗體作用,使蟲體表膜破壞不為著色劑美藍所染。顯微鏡檢查見蟲體不被藍染者為陽性,蟲體多數被藍染者為陰性。
(2)IHA:此法特異、靈敏、簡易,適用于流行病學調查及篩查性抗體檢測,應用廣泛。
(3)間接免疫熒光抗體試驗:以整蟲為抗原,采用熒光標記的第2抗體檢測特異抗體。此法可測同型及亞型抗體,其中檢測IgM適用于臨床早期診斷。
(4)ELISA:用于檢測宿主的特異循環抗體或抗原,已有多種改良廣泛用于早期急性感染和先天性弓形蟲病的診查,這種方法的靈敏度可檢出抗原量為0.5ug/L
4.分子生物學診斷 近年來將PCR及DNA探針技術應用于檢測弓形蟲感染,更具有靈敏、特異、早期診斷的意義,目前已開始試用于臨床。
弓形蟲病的臨床表現多種多樣,且易與許多疾病混淆,鑒別診斷很關鍵。先天性弓形蟲感染必須與風疹、巨細胞病毒感染、單純性皰疹病毒相區別。
 
編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 弓形蟲病 實驗室
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