一. 減小柱內(nèi)展寬,提高柱效
l. 固定相:①粒度小,均勻,以減小渦流擴(kuò)散和流動相傳質(zhì)阻力;②改進(jìn)結(jié)構(gòu),盡可能采用大孔徑和淺孔道的表面多孔型載體或全多孔微粒型載體,減少滯留流動相傳質(zhì)阻力。
2. 流動相:選用低粘度的流動相,有利于增大組分在溶劑中的擴(kuò)散系數(shù)Dm,減少傳質(zhì)阻力。
3. 流速:從H-U曲線可知,HPLC的最佳流速在流速很小處,減少流速有利于提高柱效,但在實(shí)踐中為加快分析速度,常采用比最佳流速高數(shù)倍的流速。
圖2 氣相色譜(GC)和液相色譜(LC)的H-u曲線比較
4. 柱溫:適當(dāng)提高柱溫,可降低流動相粘度,減少傳質(zhì)阻力,但柱溫升高將使分辨率降低,柱壽命短,易產(chǎn)生氣泡,一般在室溫下進(jìn)行。
二. 柱外展寬
柱外譜帶展寬又稱“柱外效應(yīng)”,系指從進(jìn)樣點(diǎn)到檢測池之間除柱子本身以外的所有死體積所引起的色譜峰展寬,柱效下降。可分為:
1.柱前展寬 主要由進(jìn)樣引起,減小進(jìn)樣器的死體積,用閥門進(jìn)樣可減少柱前譜帶展寬,提高柱效。
2.柱后展寬 主要由接管、檢測器流通池體積及檢測器響應(yīng)時間等因素所引起。因此,盡可能用短而內(nèi)徑細(xì)的接管,減少流通池體積,改進(jìn)檢測器和記錄系統(tǒng)的響應(yīng)速度等都是克服柱后展寬的途徑。