一. 色譜法
色譜法:根據(jù)各物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)(表示溶解 或 吸附的能力)不同而進(jìn)行分離、分析的方法。
各組分被分離后,可進(jìn)一步進(jìn)行定性和定量分析:
經(jīng)典:分離過程和其含量測定過程是離線的,即不能連續(xù)進(jìn)行
現(xiàn)代:分離過程和其含量測定過程是在線的,即 能連續(xù)進(jìn)行
經(jīng)典色譜法:將潮濕的碳酸鈣擠出玻璃管,用刀將各色帶切下,用適宜的方法進(jìn)行分析;
現(xiàn)代色譜法:當(dāng)一個兩組分(A和B)的混合物樣品在時間t1從柱頭加入,隨著流動相不斷加入,洗脫作用連續(xù)進(jìn)行,直至A和B組分先后流出柱子而進(jìn)入檢測
器,從而使各組分濃度轉(zhuǎn)變成電信號后在熒光屏上顯示出來。
根據(jù)峰的位置(出峰時間 t ) ——定性
根據(jù)峰的面積 A (或峰高h) ——定量
二. 色譜法分類
(一)按兩相物理狀態(tài)分
1. 氣相色譜法 (gas chromatography 簡稱 GC)用氣體作流動相的色譜法。
2. 液相色譜法 (liquid chromatography 簡稱 LC)用液體作流動相的色譜法。
3. 超臨界流體色譜法 (SFC)
用超臨界狀態(tài)的流體作流動相的色譜法。
超臨界狀態(tài)的流體不是一般的氣體或流體 , 而是臨界壓力和臨界溫度以上高度壓縮的氣體 , 其密度比一般氣體大得多而與液體相似 , 故又稱為 “ 高密度氣相色譜法 ”
(二)按分離原理分
1. 吸附色譜法( adsorption chromatography ):
根據(jù)吸附劑表面對不同組分物理吸附能力的強(qiáng)弱差異進(jìn)行分離的方法。
如:氣一固色譜法、液-固色譜法——吸附色譜
2. 分配色譜法 (partition chromatography ):
根據(jù)不同組分在固定相中的溶解能力和在兩相間分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離的方法。
如:氣-液色譜法、液-液色譜法——分配色譜
3. 離子交換色譜法(ion exchange chromatography )
根據(jù)不同組分離子對固定相親和力的差異進(jìn)行分離的方法。
4. 排阻色譜法( size exclusion chromatography):
又稱凝膠色譜法 (gel chromatography ),
根據(jù)不同組分的分子體積大小的差異進(jìn)行分離的方法。
其中:以水溶液作流動相的稱為凝膠過濾色譜法 ;以有機(jī)溶劑作流動相的稱為凝膠滲透色譜法。
5. 親合色譜法 (affinity chromatography)
利用不同組分與固定相共價鍵合的高專屬反應(yīng)進(jìn)行分離的方法。
(三)按固定相的形式
1. 柱色譜法(column chromatography ):
固定相裝在柱中 , 試樣沿著一個方向移動而進(jìn)行分離。
包括 填充柱色譜法:固定相填充滿玻璃管和金屬管中
開管柱色譜法:固定相固定在細(xì)管內(nèi)壁(毛細(xì)管柱色譜法)
2. 平板色譜法 (planer chromatography ):
固定相呈平面狀的色譜法。
包括 紙色譜法: 以吸附水分的濾紙作固定相;
薄層色譜法:以涂敷在玻璃板上的吸附劑作固定相。