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金黃色葡萄球菌及檢驗

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-05-11
核心提示: 一、生物學(xué)特性  典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0.8μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞

 

一、生物學(xué)特性

  典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0.8μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛,大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽性。金黃色葡萄球菌營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧,最適生長溫度37°C,最適生長pH 7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1-2mm。血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10-15%NaCl肉湯中生長。可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應(yīng)陽性,VP反應(yīng)弱陽性。許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力,對磺胺類藥物敏感性低,但對青霉素、紅霉素等高度敏感。

二.流行病學(xué)

  金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在,空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的機會很多。近年來,美國疾病控制中心報告,由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位,僅次于大腸桿菌。金黃色葡萄球菌腸毒素是個世界性衛(wèi)生問題,在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占整個細(xì)菌性食物中毒的33%,加拿大則更多,占45%,我國每年發(fā)生的此類中毒事件也非常多。金黃色葡萄球菌的流行病學(xué)一般有如下特點:

  季節(jié)分布,多見于春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚及其制品。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道。上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。一般說,金黃色葡萄球菌可通過以下途徑污染食品:

  食品加工人員、炊事員或銷售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過程中受到了污染,產(chǎn)生了腸毒素,引起食物中毒;熟食制品包裝不嚴(yán),運輸過程受到污染;奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時,對肉體其他部位的污染。

  腸毒素形成條件:

  存放溫度,在37°C內(nèi),溫度越高,產(chǎn)毒時間越短;

  存放地點,通風(fēng)不良氧分壓低易形成腸毒素;

  食物種類,含蛋白質(zhì)豐富,水分多,同時含一定量淀粉的食物,腸毒素易生成。

三.致病性

  金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。金黃色葡萄球菌的致病力強弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶:a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ四種,能損傷血小板,破壞溶酶體,引起肌體局部缺血和壞死;b.殺白細(xì)胞素:可破壞人的白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞;c.血漿凝固酶:當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時,該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固,阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關(guān);d.脫氧核糖核酸酶:金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來作為依據(jù)鑒定金黃色葡萄球菌;e.腸毒素:金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質(zhì)性腸毒素,分為A、B、C、D、E及F五種血清型。腸毒素可耐受100°C煮沸30分鐘而不被破壞。它引起的食物中毒癥狀是嘔吐和腹瀉。此外,金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。

四.檢驗和控制

1.金黃色葡萄球菌的檢驗

  樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中均質(zhì),制成10-1稀釋液。

  增菌培養(yǎng):將10-1稀釋液接入7.5%NaCl肉湯或胰蛋白胨肉湯中,37°C培養(yǎng)24小時。

  分離培養(yǎng):將上述稀釋液或培養(yǎng)液分別劃線血平板和Baird-Parker平板,置37°C培養(yǎng)24-48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落為圓形,直徑2-3mm,顏色灰或黑色,周圍有一渾濁帶。

  染色觀察:從平板上挑取可疑性菌落進行革蘭氏染色,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性,顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜,直徑0.5-1μm。

  血漿凝固酶試驗:吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯24小時培養(yǎng)物充分混勻,置36±1°C培養(yǎng),每隔半小時觀察一次,連續(xù)觀察6小時,出現(xiàn)凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內(nèi)容物不流動,判為陽性。同時做陰陽性對照。

  耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min,用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板,36±1°C培養(yǎng)24小時,在刺種線周圍出現(xiàn)淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。

2.金黃色葡萄球菌腸毒素檢測

  金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學(xué)試驗、免疫熒光試驗及酶聯(lián)免疫吸附等方法,在此就不一一贅述。

3.金黃色葡萄球菌的控制主要包括:

  1)防止金黃色葡萄球菌污染食品

  防止帶菌人群對各種食物的污染:定期對生產(chǎn)加工人員進行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時停止其工作或調(diào)換崗位。

  防止金黃色葡萄球菌對奶及其制品的污染:如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房,不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶;奶擠出后,要迅速冷至-10℃以下,以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶為原料,注意低溫保存。

  對肉制品加工廠,患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位,經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進行加工生產(chǎn)。

  2)防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成

  應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6小時,并且食用前要徹底加熱。

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