問題一、不同培養基的滅菌條件不一致,是否可以合并成一個滅菌條件?
答:培養微生物的培養基滅菌條件常見有三種,如下表1,如果沒有遵從如下滅菌條件,可能會導致最后的培養結果有偏離。
表1常見微生物培養所需的培養基
問題二、在實際工作中,由于一些原因導致微生物培養時間與標準規定培養時間不一致,培養結果是否可以接受?
答:同樣依據表1,如果培養時間與標準規定培養時間不一致,如實際培養時間多于或少于標準規定的時間范圍都會影響試驗結果。因為一般的微生物在一個相對穩定的環境中的生長曲線是“S”形,培養時間多一些或少一些可能會對試驗結果有重大影響,別人也無法重復試驗結果。
問題三、微生物培養箱能否放置在接種室?
答:不能。會有交叉污染的風險,此外如果接種室是利用臭氧來消毒的話,臭氧會影響培養箱里面正在培養的微生物。
問題四、霉菌培養箱、細菌培養箱能否放置在同一個房間培養?
答:可以。有條件的話可以分不同的房間。
問題五、霉菌和細菌是否可以用同一個培養箱培養?(分時段單獨培養)
答:不可以。通過表2就可知,雖然霉菌培養箱和生化培養箱具備培養細菌、霉菌、酵母菌的能力,但是一般的微生物檢測是細菌、霉菌和酵母同時進行,如果用同一個培養箱分時段單獨培養很難證明試驗結果的有效性;同時,企業的生產一般是連續的,導致微生物檢驗也是連續的,一個培養箱也滿足不了實際質控的要求。
表2三種培養箱的對比
問題六、如何對培養箱進行消毒?
答:培養箱需要定期消毒。一般的消毒劑為75%的酒精;由于培養箱內膽材料一般為不銹鋼,所以不適合用次氯酸鈉或苯扎溴銨,因為這些消毒劑對不銹鋼有腐蝕性。
問題七、對于外購的培養基,開瓶之后的可以保存多久?
答:對于外購的培養基,開瓶之后的有效期需要經過驗證才能確定,一般情況下開瓶之后一年內都可以使用。
問題八、滅菌后的培養基的可以保存多久?
答:滅菌后的培養基的有效期同樣也需要驗證,一般經驗為冰箱4℃保存建議一周內使用完,室溫保存不超過3天。用來封口的塞子最好是規格統一的,不然驗證就沒有意義。
問題九、可以使用微波爐來溶解培養基嗎?
答:滅菌后的培養基室溫放置一段時間后會凝固,使用前需要溶解,通常采用水浴的方式。使用微波爐也可以,不過需要驗證。
問題十、培養箱中培養的培養皿是正著放置還是倒著?
答:培養箱中培養的培養皿需倒扣,第一有利于微生物向上吸收營養物質,第二避免培養皿蓋上的冷凝水污染微生物。但新國標要求霉菌檢測的平皿是需要正置培養的。
問題十一、什么時候需要做空白對照和陽性對照?
答:微生物試驗都要求做空白對照;但是不同的參考標準對陽性對照規定不一樣,中國藥典規定需要做陽性對照,美國藥典、歐洲藥典和日本藥典沒有強制規定。
問題十二、一般的微生物檢驗室需要生物安全柜嗎?
答:不一定。微生物檢驗室的分類及所需的主要設備,如表3。
表3微生物檢驗室的分類及所需的主要設備
問題十三、該怎么選擇合適的生物安全柜?
對于實驗室生物安全柜的安裝及使用,在GB 50346-2011《生物安全實驗室建筑技術規范》中有很詳細的說明,表4為生物安全實驗室選用生物安全柜的原則。為了更多的了解生物安全柜的知識,可以閱讀JG 170-2005《生物安全柜》和YY 0569-2011《II級生物安全柜》等資料。
表4生物安全實驗室選用生物安全柜的原則