01 微生物菌種保藏方法概述
02 菌種活化的基本步驟和一些重要的注意事項
菌種活化是將保藏狀態的菌種恢復到活躍狀態的過程,以便進行進一步的實驗或生產。
基本步驟:
1、配置培養基:根據菌種的生長需求配置適宜的培養基(也可以選擇適宜的商品化培養基)。
2、恢復菌種狀態:將冷凍或其他形式保存的菌種恢復到室溫狀態,如解凍。
3、菌種復壯:將菌種接種到培養基中進行培養,進行多次傳代,通常需要2-3代的培養后再進行后續實驗。之所以在活化時需要進行多次傳代是為了:①恢復活力:長期保存的菌種可能因為低溫、營養缺乏等條件而導致活力下降,通過傳代培養可以幫助菌種逐漸恢復到適宜的生長狀態。②篩選健康菌株:在保存過程中,菌種中可能會出現活性降低或遺傳性狀改變的細胞,多次傳代培養有助于篩選出具有良好生長特性和穩定遺傳性狀的健康菌株。③適應培養環境:保存時的條件與培養時的條件可能有所不同,傳代培養可以讓菌種逐步適應最終的培養環境,有利于后續的大規模培養或實驗研究。④提高培養效率:經過傳代培養的菌種,其細胞濃度更高,可以縮短種子在發酵階段的延遲期,提高整體的培養效率。⑤減少變異風險:多次傳代培養可以減少由于細胞分裂帶來的潛在變異,保持菌種的遺傳穩定性。⑥檢驗菌種純度:傳代培養過程中可以監控菌種的純度,確保不會有雜菌污染,這對于實驗結果的準確性至關重要。
4、挑選和擴大培養:挑選生長良好的菌落,再次接種到新的培養基中進行培養,以獲得純而壯的培養物。
注意事項:
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在無菌操作條件下進行菌種的活化,以防止污染。
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活化過程中可能需要調整培養條件,如溫度、濕度和氣體環境,以適應不同菌種的需求。
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某些菌種可能需要特殊的培養基或添加劑,如血液、血清或抗生素,以促進其生長。
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活化后的菌種應及時使用或妥善保存,以保持其活性。