培養(yǎng)基的主要作用有兩方面:
①提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì);
②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類型的細(xì)菌或真菌進行培養(yǎng),并區(qū)分不同種類的微生物。
因此,在微生物檢驗中,必須對培養(yǎng)基進行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗提供精準(zhǔn)、可靠的檢測結(jié)果。
培養(yǎng)基的概述
培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質(zhì),按照物理性質(zhì)可以分成液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基,按照化學(xué)性質(zhì)可以分成天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基,按照功能可以分成選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。不同培養(yǎng)基要求不同,保存方式也不同。在受熱、吸潮后,培養(yǎng)基極易被微生物污染或分解變質(zhì),需在避光、防潮、陰涼處儲存。
培養(yǎng)基的采購驗收
微生物檢驗需使用大量培養(yǎng)基。為提高檢驗效率,實驗室多使用商品化即用型培養(yǎng)基、商品化脫水合成培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基的采購中,應(yīng)選擇國內(nèi)、外知名商家的產(chǎn)品,并向生產(chǎn)企業(yè)索要培養(yǎng)基成分名稱、產(chǎn)品編號、批號、最終 pH 值、儲存條件、生產(chǎn)日期、有效期、質(zhì)控報告和必要的相關(guān)信息,以保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在產(chǎn)品交貨驗收時,購買者需對產(chǎn)品包裝的完整性、生產(chǎn)日期、有效期和產(chǎn)品合格證明等進行核驗,檢查培養(yǎng)基的顏色、性質(zhì)等是否符合實驗室相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),培養(yǎng)基檢驗合格后進行入庫登記。
培養(yǎng)基的制備
配制要求
正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗的基礎(chǔ)。實驗人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時,要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明進行配制,并做好配制記錄。在配制過程中,實驗人員需要嚴(yán)格遵守相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn),佩戴口罩進行操作,避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末,稱量、溶解應(yīng)使用專門的角匙,不使用金屬制品,避免金屬離子混入培養(yǎng)基,影響微生物生長;準(zhǔn)確稱量后,應(yīng)先加入適量的水充分溶解,再加水至所需量進行加熱,加熱中應(yīng)不斷攪拌,防止培養(yǎng)基在容器底部積聚;調(diào)節(jié)pH值,分裝到比培養(yǎng)基體積最少大 20% 的容器中,按說明要求進行滅菌。粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基開封后應(yīng)存放在陰涼干燥處,及時使用,環(huán)境濕度過大會使培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結(jié)塊、污染等情況。對于瓊脂類培養(yǎng)基,可采用沸水浴或流動蒸汽的加熱方式進行融化,但反復(fù)凍融只允許進行1次。
配制用水
水是配制培養(yǎng)基不可或缺的一部分,一般使用純化水。還應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基配制用水的微生物污染情況,應(yīng)符合純化水要求。