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金黃色葡萄菌檢測(cè)常見問(wèn)題及解答

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2023-02-23
核心提示: 1、金黃色葡萄菌檢測(cè)第二法,從典型菌落中任選5個(gè),是從一個(gè)平行樣中選5個(gè)還是5個(gè)平行樣加起來(lái)選5個(gè)?答:從符合計(jì)數(shù)范圍的
 1、金黃色葡萄菌檢測(cè)第二法,從典型菌落中任選5個(gè),是從一個(gè)平行樣中選5個(gè)還是5個(gè)平行樣加起來(lái)選5個(gè)?


答:從符合計(jì)數(shù)范圍的稀釋度三個(gè)平行樣中任選五個(gè)做血漿凝固酶試驗(yàn)。


2、國(guó)標(biāo)GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)中培養(yǎng)時(shí)間很多都改成了24-48h ,這個(gè)跨度有點(diǎn)大,具體怎么判定啊?


答:如果培養(yǎng)24h后已經(jīng)長(zhǎng)菌就不需要再進(jìn)行培養(yǎng)了;如果培養(yǎng)24h后未長(zhǎng)菌則需要繼續(xù)培養(yǎng)至48h。

 

3、Baird-Parker培養(yǎng)基上,金黃色葡萄球菌和普通變形桿菌都是黑色菌落,有渾濁帶和最外透明帶,有的說(shuō)普通變形桿菌的渾濁帶比較大,可是培養(yǎng)基上很難判斷,那有沒(méi)有更好的判斷方式?


答:金葡:直徑約為0.5~1μm。平板上菌落呈金黃色,也有時(shí)為白色,大而突起、圓形、不透明、表面光滑,周圍有溶血圈,而Baird-Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤(rùn)、直徑為2~3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈;在BP上區(qū)分不出來(lái),需要進(jìn)一步生化實(shí)驗(yàn)。


4、金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)分離中,要求分別用BP平板跟血平板。可是到5.5確認(rèn)鑒定里面,在血漿凝固酶試驗(yàn)中,只需選其中一個(gè)就可以。
那么為什么不在分離這個(gè)步驟里就只使用BP平板呢。


答:一個(gè)看形態(tài),一個(gè)看溶血,只有按照標(biāo)準(zhǔn)方法檢驗(yàn)的結(jié)果才有法律效力。


5、金黃色葡萄球菌第二法涂布法中,1ml接種到三塊平板是用一條玻璃涂布棒涂布就好還是同個(gè)樣品不同平板也要更換涂布棒涂布?


答:個(gè)人見解,一根就可以了,最后統(tǒng)計(jì)數(shù)量的時(shí)候,是計(jì)算三個(gè)板的總數(shù)

 

6、Baird-Parker瓊脂配制中說(shuō)要冷卻至50°C的意思是高壓滅菌完放入50°C的恒溫水浴鍋嗎?


答:高壓滅菌出鍋后就制作BP平板,可以將熱培養(yǎng)基基礎(chǔ)進(jìn)行冷卻,加入增菌劑時(shí)保證基礎(chǔ)培養(yǎng)基的溫度不超過(guò)50攝氏度,不然可能影響增菌劑的效果。

 

7、每個(gè)稀釋度分別吸取1mL樣品勻液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量分別加入三塊BP平板,以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量的作用是?如果同時(shí)在1ml的移液管中分別放入到三個(gè)平板中,當(dāng)剩下的0.4nl樣品液,存在的偏差是否對(duì)結(jié)果有影響?平板上是否應(yīng)該做好相對(duì)應(yīng)的標(biāo)識(shí)?

 

答:每板分?jǐn)偟囊毫浚阌谕坎几稍?; 三板共計(jì)1mL,用來(lái)計(jì)量。使用總則規(guī)定的經(jīng)檢校的吸量管,吸1mL分到三塊板上即可,先能夠按標(biāo)準(zhǔn)完成測(cè)定,量器誤差對(duì)不確定度的影響留待探討。不管測(cè)定啥項(xiàng)目,平板都要作清楚標(biāo)記。

 


8、無(wú)菌涂布棒是使用高壓濕熱滅菌還是可以按照接種環(huán)這樣進(jìn)行使用?

 

答:涂布捧,提前干熱、濕熱滅菌,現(xiàn)場(chǎng)灼燒滅菌,均可。購(gòu)買使用已經(jīng)滅菌的、一次性的涂布棒,也行。



9、如涂布過(guò)程中,觸及平板邊緣,出現(xiàn)的情況是菌落蔓延生長(zhǎng)嗎?

 

答:觸及邊緣,順邊緣擴(kuò)散生長(zhǎng),無(wú)法像在平面上生長(zhǎng)那樣便于觀察計(jì)數(shù)。


10、BP平板的傾倒量是否有規(guī)定,還是以15-20mL的量為好?且BP平板是當(dāng)天檢驗(yàn),當(dāng)天滅菌使用,不需進(jìn)行剔除試驗(yàn)是嗎?


答:就是通常平板澆注的用量。B.P.平板的制作、貯存,詳見標(biāo)準(zhǔn)和培養(yǎng)基說(shuō)明書。作好相關(guān)質(zhì)控。


11、如樣液未完全吸收,就翻轉(zhuǎn)平板,是容易掉落下來(lái),還是會(huì)影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)?


答:有液體存在,長(zhǎng)出的菌落可能洇漫交疊不清晰,觀察計(jì)數(shù)困難。



12、分別做血漿凝固酶試驗(yàn),如可疑還是需要挑取到營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面進(jìn)行鑒定是嗎?

 

答:血凝酶試驗(yàn),按標(biāo)準(zhǔn)5.5.2步驟進(jìn)行。試驗(yàn)開始時(shí),就要同時(shí)接種到BHI和NA斜面。先用BHI培養(yǎng)物鑒定,再用NA斜面培養(yǎng)后再次轉(zhuǎn)接到BHI的培養(yǎng)物重復(fù)鑒定。



13、同時(shí)劃線接種到血平板,是接種到一個(gè)平板便可?

答:一板劃成幾個(gè)區(qū),接種幾個(gè)菌落,能充分生長(zhǎng)便于觀察就可以的。


14、計(jì)算公式中的A(某一稀釋度典型菌落的總數(shù))是指8.4.2中的讀數(shù)吧?而B(某一稀釋度鑒定為陽(yáng)性的菌落數(shù))是指血平板的菌落數(shù)嗎?

答:

A:是8.4.2數(shù)出來(lái)的典型總數(shù)。
B:是8.4.3挑取幾個(gè)菌落作鑒定試驗(yàn)里,被確認(rèn)陽(yáng)性的菌落數(shù)。如果挑5個(gè),則B可能數(shù)值為0、1、2、3、4、5。
C:是8.4.3挑取作鑒定試驗(yàn)的菌落數(shù)。如果挑5個(gè),則C為5。
B÷C,鑒定試驗(yàn)的陽(yáng)性比率。

 

編輯:songjiajie2010

 
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