實驗小妙招丨滅菌后小倒管內(nèi)留有氣泡原因及解決辦法!
原因一:高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠
壓鍋在滅菌過程中產(chǎn)生的最大壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)的氣體擠出,導致滅菌后任留有小氣泡。此外,高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度,也會出現(xiàn)類似現(xiàn)象。
使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡,對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監(jiān)測。
原因二:試管塞塞得太緊
在滅菌時,試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會導致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時,鍋內(nèi)壓力會大于試管內(nèi)壓力,試管內(nèi)壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;當滅菌鍋降溫降壓時,鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力,可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報廢。
改用塑料帽、不銹鋼管帽,或者與試管相匹配的硅膠塞。
原因三:小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后,一方面液體培養(yǎng)基要進入小倒管,另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出,如果小倒管管口太小,液體不容易進去,里面的空氣不容易被排出,就會導致有小氣泡生成。
改用開口比較大的倒管。
原因四:培養(yǎng)基質(zhì)量引起一系列問題
由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時用水做培養(yǎng)基組的對照試驗,若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是有此原因引起。
改用其它培養(yǎng)基。
原因五:過早打開滅菌鍋
當滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高與室溫時,不要打開滅菌鍋。因為打開鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導致管內(nèi)氣壓減小,沸點降低,部分水會汽化留在小導管內(nèi)。
等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。
最后
盡量不要采用將滅菌后的試管顛倒或大角度傾斜的方式,使小倒管內(nèi)氣體排出。此種方法可能會導致培養(yǎng)基通過試管口或試管塞受到污染,或者導致試管內(nèi)液體流出。
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