標準曲線的制作中，會有這樣那樣的問題，比如常有人問：一定要做5個點?線性相關系數R值必須幾個9才達標?標曲是每天都做還是每次都做?標曲是否必須通過原點?……

GB/T22554-2010《基于標準樣品的線性校準》中：

1)標準曲線的濃度范圍應覆蓋正常操作條件下的被測量范圍;

2)標準樣品的組分盡量與被測樣品組分一致;

3)標準樣品的濃度值應等距離的分布在被測量范圍;

4)標準樣品的個數至少應有3個濃度;

5)每個標準點至少重復2次，這個重復是指從稀釋開始;如果國家標準有相應的濃度系列推薦，盡量按國家標準。工作中我們經常采用線性校準，因為線性方程最為簡潔。

校準曲線包括標準曲線和工作曲線，前者用標準溶液系列直接測量，沒有經過預處理過程，這對于樣品往往造成較大誤差;而后者所使用的標準溶液經過了與樣品相同的消解、凈化、測量等全過程。

實驗室應按檢測標準(方法)的要求使用標準溶液或標準物質建立標準曲線。所用標準溶液或標準物質應覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標準(方法)如無具體的要求，至少使用5個標樣(除空白外)建立線性標準曲線，每個點重復測定1-3次，對于篩選方法，線性回歸方程的相關系數不應低于0.98，對于確證方法，相關系數不應低于0.99。其實，大于0.99是判斷是否為線性相關的一個標準，實際應用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監測結果只用接近最高濃度一半(中間濃度)的位置才比較準確，如果線性大于0.999的話，在整個線性范圍內都會有一個比較滿意的結果。

如果檢測的線性不好，可以減少標準的覆蓋范圍，將標準的濃度調整到待測樣品濃度附近，這樣結果也是非常準確的。

(1)標準曲線屬于實驗室質量控制的范圍，按照《實驗室資質認定評審準則》中結果控制的要求：

定期使用有證標準物質(參考物質)進行監控和/或使用次級標準物質(參考物質)開展內部質量控制。

(2)準則中并未對“定期”進行規定，所以如果“定期”，就根據實驗室的實際情況來定了。

(3)既然準則上沒說明，那根據一般的分析教材，當實驗條件(包括藥劑、人員、儀器等)發生變化時，最好重新制作標準曲線。一般來說儀器如果長期使用，并經過檢定，是處于穩定狀態，而人員藥劑的變化往往會較大。如果說每次換個人操作都要換曲線，那工作量就太大了。

從藥品檢測的要求來說，因為：

1、每天所配的流動相都會有所不同，導致出峰的時間都會有一定的差異，峰面積相應都有所差異。

2、檢測器光能也在不斷的衰弱，因此其每天的相應值也有所不同，其峰面積也有差異。基于以上原因，原則上應該是每天都要進行標準曲線校正的。標準曲線不要每次都做，但是每次必須進標準品樣品;因為每次你的流動相和原來的不可能完全一樣，同時儀器的狀態也在變化，所以不同批次間的保留時間是不一致的，所以你必須用隨行標準品來定位與定量。

不能長期使用，可以短期使用，使用前做一個單點重校，測試一個零點和中間點，測出一個糾正過的曲線。

看要求，如果零點的有效值是小數點后面第四位才有數字不影響測試，超過0.001就不行了。

最高點一定要大于被測試樣品(物質)10%。

至少二位以上。

看標準要求，以國標或行業標準為依據。測試范圍窄的建議使用一次線性方程，測試范圍寬點使用非線性或二次方程。

1、參考依據，參考標準HJ 630,其他行業參考使用。

2、相關系數R保留的有效數字，校準曲線相關系數只舍不入，保留到小數點后第一個非9數字。如果小數點后多于4個9，最多保留4位。

3、校準曲線斜率的有效位數，校準曲線斜率的有效位數，應與自變量的有效數字位數相等。

4、校準曲線截距的有效位數，校準曲線截距的最后一位數，應與因變量的最后一位數取齊。

5、自變量和因變量的有效數字，記錄測定數值時，應同時考慮計量器具的精密度、準確度和讀數誤差。對檢定合格的計量器具，有效數字位數可以記錄到最小分度值，最多保留一位不確定數字。