19世紀末，一位英國醫生使用雞蛋作為生物指示劑，以雞蛋的凝固來判定滅菌效果，首次從概念上引入了生物指示劑。1955年，美國國立衛生研究院（National Institutes of Health, NIH）使用嗜熱脂肪芽孢桿菌制備生物指示劑，因為該菌無致病性、無熱原、無毒，而且對壓力蒸汽的抵抗力在所有微生物中最強。1957年，美國AMSOO公司在芝加哥的一次全美醫院協會上首先推薦市售商品化的生物指示劑。1965年美國藥典就提到已知微生物芽孢，1975年以后比較詳細論述了生物指示劑的有關參數。我國衛生部也制訂了生物指示劑的有關法規。

2、定義和分類

在美國藥典中生物指示劑被定義為一種對特定的滅菌程序有確定的、穩定的耐受性的特殊微生物制成品。

生物指示劑分類：

1）按結構分可分為片狀生物指示劑(strip biological indicator)和自含式生物指示劑(self-contained biological indicator)；片狀生物指示劑需要使用陽性對照和陰性對照，而自含式生物指示劑只需要陽性對照即可 。

2）根據ISO 11138 -1(2006)的分類，目前的生物指示劑有環氧乙烷滅菌用生物指示物、濕熱 滅菌用生物指示物、干熱 滅菌用生物指示物、過氧化氫低溫等離子滅菌生物指示物和甲醛滅菌用生物指示物 。

3.生物指示劑的應用

生物指示劑的應用貫穿了滅菌工藝驗證的整個流程。滅菌工藝驗證包含了滅菌工藝開發和滅菌程序確認兩大部分。目前，常用生物指示劑進行生物監測指征。由于生物指示劑能夠直觀反應微生物在經歷滅菌過程后的存活程度，生物指示劑的應用并不局限于滅菌監測。生物指示劑可應用于對滅菌設備進行性能確證的輔助工作中以及特定物品的滅菌工藝研發以及建立工作中。生物指示劑可應用于終包裝或終容器內產品的滅菌工藝驗證，同樣可應用于無菌過程中使用的滅菌設備、材料和包材組分滅菌工藝驗證。生物指標也可用于已驗證滅菌程序的定期再驗證。生物指示劑還用于隔離器和無菌潔凈室滅菌工藝的驗證評估。

4、生物指示劑性能評估

生物指示劑有2 項主要性能: 孢子數量和以D 值表征的對滅菌工藝的抗性。美國藥典要求生物指示劑生產廠家應能提供效期內的微生物總數數值、D 值及D 值測定方法等相關信息。生物指示劑使用者在應用前能夠對每使用單位的平均菌落數進行測定、對生物指示劑D 值進行評估。