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大腸桿菌檢測培養基的配方及原理

放大字體  縮小字體 發布日期:2016-12-13  來源:豆丁網
核心提示:本文主要對大腸桿菌微生物檢測培養基的配方及原理進行了介紹,為化驗從業人員提供參考!
1 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)

原 理:

  月桂基硫酸鈉,別名月桂醇硫酸鈉,表面活性作用強,具有乳化作用。
  一種優質蛋白胨,是以新鮮牛肉和牛骨經胰酶消化,濃縮干燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好的物理性狀。含有豐富的氮源、氨基酸等胰蛋白胨或胰酪胨 20g 提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求 。
 
配方:(g/L)


2 煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯(Brilliant Green Lactose Bile Broth) 

原理:

  膽鹽(Bile Salt):是一種膽酸的鈉鹽,是膽酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸(C2H7NO3S)的氨基(C2H5NO2),通過酰胺鍵結合而成。
① 可降低培養基與細菌細胞膜界面上的表面張力,使細胞膜紊亂,導致細菌自溶。
②腸桿菌科細菌在腸道內長期與膽汁接觸。對膽鹽有一定的抵抗力。合適的膽鹽量能促進該科細菌的生長。
③膽鹽遇酸生成沉淀,使菌落色素不致擴散從而有利于鑒別。
④ 膽鹽中含有一定量的膽紅素、粘蛋白、色氨酸,對不受膽鹽抑制的細菌生長有營養作用。
  煌綠(亮綠):抑制革蘭氏陽性菌和大多數非沙門氏菌的革蘭氏陰性桿菌,通常抑制發酵乳糖、蔗糖的細菌。煌綠和枸櫞酸鈉對大腸菌的生長、菌體蛋白質的合成和糖的利用都有顯著的抑制作用,以煌綠的作用為較強。枸酸鈉能抑制大腸菌的呼吸,而煌綠的抑制作用則較弱。混合膽鹽及硫代硫酸鈉對大腸菌的上述代謝活動都沒有抑制作用。
 
配方:(g/L)


 
用法:

  將蛋白胨、乳糖溶于約500 ml蒸餾水中,加入牛膽粉溶液200 ml(將20.0 g 脫水牛膽粉溶于200 ml 蒸餾水中,調節pH至7.0~7.5),用蒸餾水稀釋到975 ml,調節pH,再加入0.1%煌綠水溶液13.3 ml, 用蒸餾水補足到1000 ml,用棉花過濾后,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml 。121 ℃高壓滅 15 min 。
 
3 伊紅美藍瓊脂(EMB)Eosin-Methylene Blue Agar

原理:

  伊紅美藍瓊脂含有伊紅和美藍兩種苯胺類染料,它們可以抑制革蘭氏陽性菌的生長。伊紅為酸性染料,美藍為堿性染料。當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結合形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。
  在堿性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色,伊紅和美藍不能結合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。
常用的伊紅美藍乳糖培養基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。
 
配方:(g/L)



用法:

  稱取本品 37.4g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌 15分鐘, 備用。 
 
4 EC肉湯 (E.Coli Broth)

用途:

  用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(GB2008、SN標準)
 
配方:(g/L)


 
5 營養瓊脂斜面 營養瓊脂(NA)Nutrient Agar

用途:

  細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用(GB標準)。
 
配方:(g/L)

編輯:foodec007

 
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